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PÓS-TESTE
Extração de dna de células humanas

1) Imagine que você seja um perito forense e que tenha sido contratado para descobrir a identidade de um criminoso que cometera um assassinato horas antes. Você chega ao local do crime e encontra diversos vestígios com amostra biológica supostamente do suspeito. Entre os vestígios identificados estão alguns fios de cabelos no chão, uma escova de dentes e alguns pingos de sangue na maçaneta da porta. Com relação aos vestígios e aos materiais que você deve coletar para realizar a análise de identificação genética do criminoso, assinale a alternativa correta.
a) Você deve coletar a amostra de sangue para análise laboratorial. Os fios de cabelo, por estarem no chão, já estão contaminados e não fornecerão uma amostra pura de DNA. A escova de dentes não é um vestígio com material biológico disponível;
b) Você deve coletar as amostras de fios de cabelo e de sangue. A amostra de sangue é sempre um material que produz maior quantidade de DNA. A escova de dentes deve ser coletada como um vestígio, mas não é possível realizar qualquer análise molecular a partir dela;
c) Você deve coletar a amostra de fios de cabelo, de sangue e a escova de dentes. Não é possível afirmar qual das amostras produzirá maior concentração de DNA com as informações dadas, pois a quantidade e a qualidade do material disponível interferem no resultado. A partir da escova de dentes é possível coletar células da boca do indivíduo e, a partir daí, realizar a extração e a análise do DNA.
RESPOSTA CORRETA
Isso mesmo. Tanto os fios de cabelo como a amostra de sangue e a escova de dentes podem ser utilizados como fonte de material biológico para extração de DNA. A qualidade e a quantidade do DNA extraído dependem das condições da amostra encontrada.
PÓS-TESTE

2) Considere que você seja o técnico de laboratório responsável por fazer a extração de DNA a partir de amostras de sangue e que o protocolo empregado no seu laboratório utiliza os reagentes dodecil sulfato de sódio (SDS), sal (NaCl) e álcool isopropanol. Em determinado dia, você percebe que não há mais SDS no laboratório para realizar a prática de extração. Você decide procurar reagentes substitutos. Marque a alternativa que apresenta a melhor solução para o seu problema.
a) Você deve procurar outro detergente para substituir o SDS (que também é um detergente). Os detergentes atuam lisando as células para permitir que o conteúdo celular fique disponível na solução;
RESPOSTA CORRETA
Isso mesmo. Os detergentes atuam rompendo as células e a membrana nuclear de forma a liberarem o material genético na solução. Você deve substituir o detergente SDS por outro detergente.
b) Você deve utilizar o fenol para substituir o SDS. Ambos os reagentes realizam a lise das células na primeira etapa do protocolo de extração;
c) Você deve procurar outro detergente para substituir o SDS (que também é um detergente). Os detergentes atuam removendo proteínas e outros contaminantes da solução aquosa do DNA na segunda etapa do protocolo de extração.
 Considere que você seja professor de aulas práticas para uma turma de Biomedicina. Entre as diferentes aulas práticas que você ensina, está a aula de extração de DNA. Nessa aula, você explica que o protocolo de extração é basicamente o mesmo para todos os organismos e que inclui três etapas principais: a lise das membranas celulares, a desnaturação de proteínas e a precipitação do DNA. Um aluno pergunta como o DNA é precipitado da solução. Qual das respostas a seguir você daria ao aluno?
a) “A precipitação do DNA é realizada com o uso do álcool etanol, que atua removendo as proteínas da solução. Consequentemente, o DNA não terá outros interferentes ou contaminantes na solução aquosa”;
b) “A precipitação do DNA é realizada com o uso de um álcool, como etanol ou isopropanol. O álcool causa modificação estrutural da molécula de DNA, o que resulta na agregação e na precipitação do DNA”;
RESPOSTA CORRETA
Está certo. O álcool é utilizado para precipitação do DNA por meio da modificação da estrutura do DNA, resultando na sua agregação e precipitação.
c) “A precipitação do DNA é realizada com o uso do isopropanol, um álcool que é capaz de modificar estruturalmente a molécula de DNA e, assim, causar a agregação e a precipitação do DNA”.
4) O protocolo de extração de DNA, para fins didáticos, é dividido em etapas básicas: (1) rompimento das membranas celulares para exteriorização do DNA, (2) remoção dos componentes celulares indesejados, como restos de membrana, proteínas e RNA, e (3) precipitação e purificação do DNA. Marque a alternativa que melhor descreve o papel do sal de cozinha (NaCl) no protocolo de extração de DNA.
a) O sal de cozinha (NaCl), em altas concentrações, é utilizado na segunda etapa do protocolo de extração de DNA, quando realiza a desnaturação de proteínas. A partir de então, é possível a remoção dos restos celulares. O DNA fica dissolvido na solução aquosa e, na etapa seguinte, será precipitado;
RESPOSTA CORRETA
Isso mesmo. O sal de cozinha resulta na desnaturação de proteínas, permitindo que seja realizada a remoção dos componentes celulares indesejados.
b) O sal de cozinha (NaCl), em altas concentrações, é utilizado na primeira etapa do protocolo de extração, quando realiza o rompimento das membranas celulares para exteriorização do DNA;
c) O sal de cozinha (NaCl), em altas concentrações, é utilizado na segunda etapa do protocolo de extração, quando realiza a precipitação do DNA.
Considere que você esteja em uma aula prática de extração de DNA. Após a prática, o professor solicita que os alunos resumam em duas pequenas frases o experimento de extração de DNA e sua importância. Qual das frases a seguir poderia ter sido escrita por você?
a) A extração de DNA envolve três etapas básicas, que são a lise das células, a desnaturação de proteínas e a precipitação do DNA. A importância da técnica se refere à possibilidade de realizar análises adicionais, como análises de expressão gênica;
b) A extração de DNA envolve quatro etapas básicas, que são o rompimento da parede celular, a lise das células, a desnaturação de proteínas e a precipitação do DNA. Trata-se de um método muito importante para análises genéticas, sendo utilizado em análises de mutações genéticas, análises evolutivas, entre outras;
c) A extração de DNA envolve três etapas básicas, que são a lise das células, a desnaturação de proteínas e a precipitação do DNA. Trata-se de um método muito importante para análises genéticas, sendo utilizado em análises de mutações genéticas, genética forense, análises evolutivas, entre outras.
RESPOSTA CORRETA
Isso mesmo! O protocolo de extração envolve as três etapas descritas. O material extraído pode ser utilizado em muitas análises genéticas, conforme mencionado.