Observação e diferenciação de bactérias gram positivas e gram negativas

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Observação e diferenciação de bactérias gram positivas e gram negativas
Autor: Juarez Bruschi Junior, Biomédico
Introdução
A observação e a diferenciação de bactérias gram positivas e gram negativas são técnicas fundamentais para o diagnóstico e tratamento de diversas doenças infecciosas. Essas bactérias apresentam diferenças em sua parede celular que permitem a diferenciação por meio da coloração de Gram. O objetivo deste artigo é descrever as etapas para a observação e a diferenciação dessas bactérias.
Materiais e Métodos
Os materiais utilizados para a observação e a diferenciação de bactérias gram positivas e gram negativas incluem:
Lâmina de vidro;
Alça bacteriológica esterilizada;
Gram Crystal Violet;
Lugol;
Álcool-acetona a 95%;
Safranina.
O processo de observação e diferenciação de bactérias gram positivas e gram negativas é dividido em duas etapas: coloração de Gram e observação microscópica.
Resultados
Coloração de Gram
Fixação da amostra: Com a alça bacteriológica esterilizada, coletar a amostra de interesse e espalhá-la na lâmina de vidro de forma uniforme. Deixar secar ao ar livre.
Coloração de Gram: Cobrir toda a amostra com o cristal violeta de Gram e deixar agir por 1 minuto. Em seguida, lavar a amostra com água destilada.
Adição do lugol: Adicionar uma gota de lugol e deixar agir por 1 minuto. Em seguida, lavar a amostra com água destilada.
Descoloração: Adicionar álcool-acetona a 95% e deixar agir por 10 a 15 segundos. Em seguida, lavar a amostra com água destilada.
Coloração de contraste: Adicionar a safranina e deixar agir por 1 minuto. Em seguida, lavar a amostra com água destilada.
Observação microscópica
Colocar a lâmina preparada sob o microscópio.
Observar a amostra com objetiva de imersão.
Anotar a morfologia das bactérias, o tipo de coloração e a disposição das células.
Discussão
As bactérias gram positivas e gram negativas são diferenciadas pela coloração de Gram, que é baseada em suas diferenças na parede celular. As bactérias gram positivas apresentam uma parede celular espessa, composta principalmente por peptidoglicano, que retém o corante cristal violeta e aparecem como células azuladas. Já as bactérias gram negativas apresentam uma parede celular mais fina e uma camada adicional de lipopolissacarídeos, que impede a retenção do cristal violeta. Essas bactérias são coradas pela safranina, e aparecem como células vermelhas ou rosadas.
A identificação de bactérias gram positivas e gram negativas é fundamental para o diagnóstico e tratamento de diversas doenças infecciosas.