Análises Metabólicas

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Métodos analíticos em 
laboratório Clínico 
 
COMO ANÁLISAR UMA AMOSTRA? 
Primeiro é necessário: 
1) Entender qual o tipo de amostra 
(sangue total, plasma, soro, 
urina, líquidos cavitários...) 
2) O que estamos procurando 
(Glicose, triglicerídeos, 
AST/ALT, albuminas, HIV...) 
3) Qual a precisão analítica que 
queremos (Análise qualitativa, 
quantitativa, funcional, point-
of-care...) 
4) Quais os equipamentos temos 
disponíveis para essa análise 
(Calorímetro, espectrofotômetro, 
fluorômetro...). 
ESPECTROFOTOMETRIA é o principal 
método analítico em um laboratório 
clínico, com características de 
transmissão, absorção e dispersão da 
luz no meio de reação. 
INTERAÇÕES ENTRE A LUZ E O 
MEIO 
Refração da luz em um meio físico. 
EMISSÃO (E): emissão de luz com isso 
várias coisas podem acontecer, por 
exemplo: 
1) REFLEXÃO (R): A luz bate na 
partícula e é refletida/volta. 
2) DISPERSÃO (D): A luz bate na 
partícula e é desviada. 
3) TRANSMISSÃO (T): A luz bate 
na partícula e continua seu 
caminho ao redor da partícula. 
4) ABORBÂNCIA (A): É a 
capacidade que o meio vai ter de 
absorver a luz. A absorbância 
depende da concentração de 
partículas no meio (C). 
(T) é inversamente proporcional a (C). 
(A) é diretamente proporcional a (C). 
Importante: Quanto menor a 
absorbância maior é a transmissão. 
LEI DE BEER – LAMBERT 
LEI DE LAMBERT- cada camada do 
meio reflete, dispersa e absorve a luz de 
forma individual. Quanto maior a 
quantidade de camadas no meio, menor 
a transmitância final. 
“A intensidade da luz emitida decresce 
exponencialmente à medida que a expressiva 
do meio absorvente aumente 
aritmeticamente.” 
LEI DE BEER- Quanto maior a 
concentração de partículas do meio, 
menor a transmitância desse meio. 
“A intensidade de um feixe de luz 
monocromático decresce exponencialmente a 
medida que a concentração da substancia 
absorvente aumenta aritmeticamente.” OU 
SEJA: QUANTO MAIS PARTICULAS, MAIOR A 
ABSORVANCIA DE LUZ. E AS PARTICULAS VEM 
DAS REAÇÕES QUÍMICAS. 
REAÇÕES COLORIMÉTRICAS são 
reações onde o produto formador tem cor 
com intensidade medida na faixa 
visível do espectro da luz (380-680 
nm). 
Existem 2 tipos de reações, são elas: 
1) REAÇÃO PONTO FINAL: com 
branco de amostra e sem branco de 
amostra. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
2) REAÇÃO CINÉTICA: continua, 
tempo fixo e dois pontos. 
 
 
 
 
 As características e onde/quando utilizar 
essas reações dependem do analito. 
 
IMUNUENSAIOS são ensaios 
laboratoriais onde são utilizados 
antígeno anticorpo. 
Importância do anticorpo: 
1) Inativar alguns agentes 
(moléculas) para não atingir o 
nosso organismo. 
Patologia clínica Medicina 
Laboratorial 
• Diagnostico direto: Identificação 
do metabólico ou seus produtos na 
amostra. 
• Imunoensaios diretos e indiretos: 
pesquisa de antígenos, anticorpos 
ou imunocomplexos. 
• Imunologia Clínica: Função 
imunológica do paciente. 
 
Diagnostico Individual 
• Definição de fase doença. 
• Avaliação de prognóstico da 
doença. 
• Avaliação de eficácia terapêutica 
ou vacinal. 
• Diagnostico de doença congênita. 
• Diagnostico de 
imunodeficiências. 
• Seleção de doadores e receptores de 
sangue e órgãos. 
 
 
Epidemiologia 
Etiologia de Doenças 
• Incidência de doenças: Novos 
casos. 
• Prevalência da doença: Total de 
caos / Critério de cura / 
Erradicação de doença / 
Reintrodução de novos casos em 
área consolidada. 
AFINIDADE 
- Para diagnósticos de alta pressão, 
precisa de anticorpos de afinidade. 
- Constante de dissociação. 
- Mede a taxa de desligamento do 
anticorpo (calor, acides, agitação, ou 
seja, qualquer ação de energia pode ser 
utilizada para romper a reação, 
causando o desligamento).