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INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOMÉDICAS-USP BMM-0413 - MICROBIOLOGIA PARA MEDICINA VETERINÁRIA PROVA DE BACTERIOLOGIA. Prova 1 (27/04/2020) Nome: No. USP: Data: Aulas Morfologia e Estruturas Bacteriana, Antibacterianos, Antibiograma e Resistencia Bacteriana. Prof. Nilton 1. A seguinte figura representa uma parede bacteriana (1 ponto) a) Seguindo o conceito e definição da coloração de Gram, a que tipo de bactéria corresponde a estrutura? Cite um exemplo de espécie bacteriana que adquire a coloração referente ao tipo de estrutura apresentada. b) Qual é a diferença entre Gram-positivos e Gram-negativos? c) Qual é a utilidade da coloração de Gram para um Médico Veterinário? 2) Que tipo de bactérias (morfologia, coloração de Gram) observa na seguinte imagem (0.5 pontos) 1 3) No seguinte vídeo (link (ctrl + click) observe o evento imunológico (https:// www.youtube.com/watch?v=re_vezik490) (se não consegue ser redirecionado copie o link diretamente na barra de busca de internet). Responda brevemente, que tipo de estrutura bacteriana protege as bactérias deste evento imunológico? Que outra utilidade tem esta estrutura bacteriana para um patógeno bacteriano? (0.5 pontos) 4) A figura representa dois antibiogramas realizados em 2 diferentes espécies bacterianas, onde os discos antibióticos numerados correspondem a: 1) Ceftiofur (beta- lactâmico cefalosporina); 2) Polimixina B (polimixina); 3) Tetraciclina (tetraciclina); 4) Enrofloxacina (quinolona). (1 ponto) a) Comente o resultado para o antibiótico 4. b) Para o antibiótico 1, si consideramos que o halo sugere que as bacterias são sensíveis ao antibiótico, qual é o provável espectro de ação/atividade? c) Qual é o mecanismo de ação dos antibióticos beta-lactâmicos como penicilina ou cefalosporinas? d) Qual é utilidade do antibiograma para o profissional Médico Veterinário? 5) Assista o seguinte vídeo (https://www.youtube.com/watch?v=sn8DFgHuePc) se não consegue ser redirecionado copie o link diretamente na barra de busca de internet. Sugerindo a seguinte situação: cão atendido no hospital veterinário por possível infecção do ouivido (otite). O dono do animal relata que o animal parou de comer, de se movimentar e chora recorrentemente faz 3 dias, logo após ter levado o cachorro para banho e tosa. A Veterinária que acompanha o caso observa drenagem de pus no ouvido. Foi realizada uma coleta do material purulento, o qual foi encaminhado para o laboratório de MICROBIOLOGIA para isolamento, identificação e antibiograma do possível agente infeccioso. Na coloração de Gram o laboratorista observa presença de cocos Gram Positivos agrupados na forma de corrente ou cadeias. (1 ponto) a) Qual seria o provável agente infeccioso (Gênero)?: b) Qual poderia ser a fonte/origem da infecção?: c) Escolha um antibiótico que poderia ser utilizado e fundamente a sua escolha. 2 https://www.youtube.com/watch?v=re_vezik490 https://www.youtube.com/watch?v=re_vezik490 https://www.youtube.com/watch?v=sn8DFgHuePc Aulas Fisiologia Bacteriana, Microbiota e Bacilos Gram-negativos. Profa. Vanessa 6. O crescimento de micro-organismos nos diferentes meios de cultura fornece as primeiras informações para a sua identificação. É importante conhecer o potencial de crescimento em cada meio de cultura e adequar ao perfil bacteriano esperado para cada material. Observe as imagens a seguir e explique as características de crescimento evidentes em cada Agar e que auxiliam na identificação bacteriana. (0,3 ponto) a) Agar MacConkey b) Agar EMB c) Agar Baird-Parker d) Agar Sal Manitol 7. Em um laboratório de microbiologia, os alunos observaram ao microscópio óptico colônias bacterianas coradas pelo método de Gram, isoladas de uma amostra de doce de leite. Também foi observado o crescimento da bactéria em Agar MacConkey. Em seguida, foi testado o crescimento em meio de cultura contendo colchicina, uma droga que despolimeriza microtúbulos. As colônias foram, em seguida, tratadas com cianureto, uma droga que bloqueia a cadeia respiratória. Por fim, inocularam o fago T à cultura bacteriana e o vírus rapidamente aniquilou todas as colônias. Mais tarde, descobriram que essa amostra de doce de leite havia sido comida com os dedos pela indisponibilidade de talher. Analise os resultados abaixo e responda: (1 ponto) Coloração de Gram Agar MacConkey a) Por que o crescimento em presença de colchicina foi maior que em presença de cianureto? b) Por que a adição do fago T aniquilou as bactérias dessa cultura? c) Você consegue realizar a identificação presuntiva da espécie bacteriana com os dados disponíveis? d) Como a espécie em questão pode ter contaminado o doce de leite? 3 8. Após um jantar de aniversário, várias pessoas apresentaram quadro de gastroenterite. Para a investigação de doença transmitida por alimento, as sobras dos alimentos consumidos foram coletadas e enviadas para o laboratório, que procedeu a análise microbiológica. Após incubação, os resultados obtidos pela enumeração das bactérias nas placas de cultivo foram: Cite e explique qual(is) outro(s) procedimento(s) laboratorial(is) permitiria(m) a identificação do patógeno causador da gastroenterite? (0,3 ponto) 9. Sobre o metabolismo bacteriano, assinale a(s) alternativa(s) correta(s) e incorreta(s) e explique. (0,5 ponto) a) O rendimento energético na respiração aeróbia é menor que na respiração anaeróbia. b) Na respiração anaeróbia, o aceptor final de elétrons é o oxigênio. c) Os organismos anaeróbios tendem a crescer mais rapidamente do que os aeróbios. d) Algumas bactérias Gram-negativas são capazes de utilizar nas reações de biossíntese celular a via Entner-Doudoroff, que produz duas moléculas de NADPH e uma molécula de ATP. e) A fermentação nunca ocorre na presença de oxigênio. 10. A Infecção do Trato Urinário (ITU) é caracterizada pela presença de microrganismos no trato urinário, podendo ser sintomática ou assintomática. Uma amostra coletada de uma paciente com cistite foi analisada em laboratório e os resultados foram os seguintes: Coloração de Gram Agar MacConkey Série bioquímica Sobre o patógeno identificado, cite e explique: (1 ponto) a) Quais estruturas auxiliam nos processos de colonização do hospedeiro? b) O que permite que essas bactérias estejam envolvidas em infecções recorrentes do trato urinário? c) Com essa bactéria consegue “driblar" o sistema imunológico do hospedeiro? 4 11. Defina os termos sublinhados e discorra sobre a seguinte afirmação: A supressão da microbiota normal cria um ambiente que tende a ser ocupado por micro-organismos oportunistas. (0,5 ponto) 12. Quando pensamos na relação entre micro-organismos e os seres humanos, a primeira coisa que nos vem à cabeça é: Doença. Porém, nos últimos anos tem ficado claro que nossa relação com os micro-organismos vai muito além disso. Nossa pele, ouvidos, cavidade oral, vias aéreas superiores, órgãos genitais e, principalmente, o intestino, são habitados por milhares de micro-organismos vivendo em harmonia. Com relação ao tema, julgue as seguintes sentenças, explicando porque estão corretas ou incorretas: (0,4 ponto) a) Uma bactéria localizada em uma parte do corpo humano em que normalmente não é encontrada, pode levar ao surgimento de doença. b) Embora os micro-organismos sejam considerados importantes para a manutenção da saúde, o organismo humano seria menos suscetível a doenças se não houvesse contato entre o recém-nascido e os micro-organismos da mãe durante o parto. c) Antagonismo microbiano, ou exclusão competitiva, ocorre quando o hospedeiro se beneficia da competição entre a microbiota normal e os micro-organismos potencialmente patogênicos. Aula Patogenicidade. Profa. Ana Marcia. 13. Estamos enfrentando uma pandemia de coronavirus. Assim como agentes virais, a transmissão de agentes bacterianos entre hospedeiros depende de fatoresrelacionados ao hospedeiro, ao ambiente e ao microrganismo. Tendo em mente patógenos transmitidos por gotículas respiratórias e/ou aerossóis, responda (1 ponto): (a) Quais estruturas bacterianas são determinantes para infecção do trato respiratório superior e inferior por um patógeno bacteriano? Foque nas seguintes etapas da doença infecciosa: acesso, adesão e invasão. (b) Quais mecanismos de defesa do hospedeiro são importantes para combater a infecção do trato respiratório? (c) A bactéria Mycobacterium tuberculosis, causadora da tuberculose em humanos, é transmitida por aerossol. Esse também é um microrganismo intracelular. Quais os principais mecanismos de sobrevivência intracelular exercidos por esses patógenos? (d) Bactérias gram-negativas possuem lipopolissacarídeos (LPS), também chamados de endotoxinas. Algumas bactérias gram-negativas podem causar pneumonia em cães, e essas bactérias podem atingir a circulação sanguínea (bacteremia). Baseado no seu conhecimento sobre a estrutura do LPS, qual a possível evolução de uma bacteremia com gram-negativas se não tratada? Descreva, resumidamente, a estrutura do LPS e indique qual a porção primariamente envolvida com esse agravamento. 5 Aula Genética Bacteriana. Prof. Rodrigo. 14. Um plasmídeo contendo genes de resistência a aminoglicosídeos e beta-lactâmicos foi identificado em uma linhagem de Escherichia coli isolada da urina de um cachorro com infecção urinária. Um plasmídeo 100% idêntico ao nível de sequência de DNA foi identificado em uma Kleibsiella pneumoniae isolada de um swab retal do dono deste animal doméstico. Discuta uma possível explicação para esta observação com base nos seus conhecimentos de genética bacteriana, explicando o mecanismo envolvido. (1 ponto). 6