Biologia Molecular usada no cotidiano da profissão do biólogo

Prévia do material em texto

Biologia Molecular usada no cotidiano da profissão do biólogo
O biólogo tem um importante papel na Biologia Molecular pois tem atuação no sequenciamento do DNA que utiliza seu Genoma que é o conjunto de material genético que caracteriza um determinado organismo. Faz a sequência de bases que contém mensagem genética para ser transcrita e traduzida em células eucromatina ou genes usando os cromossomos de cada par que contém a mesma sequência linear de gene (exceto X e Y). 
 (Brasil, 2019 )
Atua na técnica da Eletroforese que tem como objetivo a técnica de separação de componentes por meio da aplicação de uma corrente elétrica. Usada para analisar biomoléculas. Ocorre dentro de um gel (matriz) que submerso em uma solução-tampão, que permite o fluxo da corrente elétrica mantendo o pH constante.
Na PCR (Reação da cadeia de Polimerase), utiliza a técnica para replicação do DNA , permite à amplificação in vitro de segmentos de DNA específicos, resultando em bilhões de cópias desta região de interesse e tornando insignificante a concentração do restante do material genômico. Trata-se de um método muito sensível e por isso toda contaminação deve ser evitada. A manipulação de todo o material a ser utilizado deve ser feita com bastante cuidado. Os reagentes e materiais devem ser de boa qualidade, e livres de possíveis contaminações por DNAs exógenos e DNAses. O uso de luvas e jaleco, autoclavagem de vidraria e material plástico (tubos, ponteiras, etc.), limpeza adequada da bancada de trabalho são algumas das precauções que aumentam o sucesso do experimento.
Para minimizar a variabilidade intrínseca da metodologia é possível preparar um “mix de reação”, contendo todos os reagentes exceto a amostra Esta amostra, seja ela DNA genômico ou plasmidial, ou mesmo RNA deve estar em uma concentração final adequada para a amplificação. O preparo de um controle negativo (a amostra é substituída por H2O) é importante para verificar da qualidade dos reagentes, possibilitando identificar qualquer possível contaminação com DNA exógeno.
Com relação a enzima Taq polimerase, embora ela seja termoestável, ela deverá ser manipulada com todo o cuidado que é sempre dispensado a qualquer enzima. Por isso, realizar as operações o mais rapidamente possível, mantendo os reagentes e amostras em um reservatório contendo gelo, faz-se necessário.
Referências:
Tavares, Marina F. M.Mecanismos de Separação em Eletroforese Capilar. Química Nova [online]. 1997, v. 20, n. 5 [Acessado 30 Outubro 2021] , pp. 493-511. Disponível em: <https://doi.org/10.1590/S0100-40421997000500010>. Epub 09 Set 2008. ISSN 1678-7064. https://doi.org/10.1590/S0100-40421997000500010.
Souza, Karina Koerich de et al. Otimização da técnica da PCR para a detecção de Actinobacillus pleuropneumoniae. Ciência Rural [online]. 2008, v. 38, n. 8 [Acessado 30 Outubro 2021] , pp. 2239-2244. Disponível em: <https://doi.org/10.1590/S0103-84782008000800023>. Epub 11 Nov 2008. ISSN 1678-4596. https://doi.org/10.1590/S0103-84782008000800023.