Sexagem de sêmen

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sexagem de sêmen1
Biotecnologia
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· Separação do sêmen com espermatozoides contendo cromossomos sexuais de um dado tipo.
· Possibilita a seleção do sexo do futuro embrião
Espermatozoides portadores de cromossomos X e Y
· Fêmeas (sexo homogamético): possuem 2 cromossomos sexuais similares (X e Y)
· Machos (sexo heterogamético): possuem cromossomos sexuais diferentes (X e Y)
· O sexo dos descendentes é determinado pelo cromossomo sexual dentro do espermatozoide
· Existem diferenças potenciais entre os espermatozoides que contem os cromossomos X e Y
· Conteúdo de DNA: menos DNA no espermatozoide Y.
· Tamanho: espermatozoide X é maior.
· Motilidade: espermatozoide Y é mais rápido
Diferenças no conteúdo de DNA
· Corantes fluorescentes
· Corante Hoechst 33342: menos tóxico entre os corantes de DNA
· Potencial de penetração na membrana plasmática de células vivas
· Liga seletivamente a regiões ricas de DNA e permite a detecção de pequenas diferenças do conteúdo de DNA
· Espermatozoide X: recebe cerca de 4% mais corante vinculado ao seu DNA, do que o espermatozoide Y
· Tal corante fluoresce apenas quando exposto a uma especifica onda de luz fornecida por raio laser.
Técnicas para seleção do sexo do espermatozoides
· Centrifugação em gradiente de densidade
· Citometria de fluxo - nome da técnica; (detecta células somáticas).
· Acurácia da citometria: 90%!!
Centrifugação em gradiente de densidade
· Baseia-se na diferença de densidade existente entre os cromossomos X e Y;
· O cromossomo X contém mais conteúdo de DNA e proteína nuclear que os espermatozoides Y;
· Diferença de peso e na densidade entre os 2 tipos celulares;
· Centrifugação em gradiente de Percoll (diferentes densidades) para a separação dos espermatozoides bovinos portadores do cromossomo X ou Y;
· 10 camadas de 0,6 ml de soluções de Percoll com concentrações variando entre 22% a 48%; 
· Injúrias causadas nos espermatozoides pelas sucessivas centrifugações e manipulações são possíveis serem minimizadas através da diminuição do nº de centrifugações;
Citometria de fluxo
Princípio do método: 
· Técnica de medição das propriedades de células em suspensão, orientadas em um fluxo laminar e interceptadas uma a uma por um feixe de luz (LASER).
· Produção de 1 palheta de sêmen sexado:
· 7 palhetas por hora na concentração de 2x106 espermatozoides/dose; 
· Utilização de inseminação com doses de sêmen sexado na concentração convencional, torna-se impraticável. 
· Seleção de touros que, com baixas concentrações de sêmen apresentam uma boa fertilidade;
· Uso do sêmen de animais em boas condições de manejo; 
· Qualidade do ejaculado: influência direta na velocidade do processo de sexagem.
Vantagens da utilização do sêmen sexado
· Maximizar a produção animal;
· O sexo do bezerro é um dos fatores determinantes para o desempenho do agronegócio;
· Maximização do progresso genético entre gerações, de acordo com as necessidades de cada programa de melhoramento genético e aptidão do rebanho.
Desvantagens da utilização do sêmen sexado
· Custo extra da dose de sêmen sexado;
· Menos capacidade de fertilização em relação ao convencional;
· Danos às células: mais sensíveis ao processo de criopreservação;
· Imprecisão na definição do sexo do futuro produto;
· Fecundação in vitro: menores taxas de desenvolvimento embrionário comparados aos não-sexados.
Fertilidade: sêmen sexado
· Fertilidade média 15% inferior ao sêmen não sexado;
· Fertilidade é maior em novilhas que em vacas;
Sêmen sexado
IA convencional
· Doses de ¼ cc (palheta fina):
· 2 milhões de espermatozoides;
· Melhores taxas de gestação de gestação com novilhas do que com vacas, devido às melhores condições uterinas e metabólicas das primeiras.
TE/FIV
· Tx gestação: inferior ao sêmen não sexado. 
· Doses de ¼ cc (palheta fina):
· 5 milhões de espermatozoides
@gabimed.vet
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