Estudo dirigido - Biomol 2

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UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO DE JANEIRO
INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOMÉDICAS
CURSO DE FARMÁCIA NOTURNO
DISCIPLINA: BIOLOGIA MOLECULAR DA CÉLULA 
PROF.: LEONARDO R. ANDRADE
1o ESTUDO DIRIGIDO DE BIOLOGIA CELULAR
Quais as etapas de preparação de uma amostra de tecido biológico para visualização por microscopia óptica?
Fixação, desidratação, clareamento, impregnação (em parafina) e inclusão.
Quais as principais partes de um microscópio óptico?
Diafragma/Condensador, Lentes objetivas e oculares, revólver, canhão, charriot, mesa, foco, macrométrico e micrométrico.
Quais as modalidade de microscopia óptica que você conhece?
Microscopia otica de campo colorido e de fluorescencia.
Qual a principal diferença entre a microscopia óptica e a microscopia eletrônica?
Que na eletronica não se usam lentes e luz e sim um feixe de eletrons e bobinas que gerarão a imagem.
Quais os dois principais tipos de microscopia eletrônica? E que tipo de informação a imagem delas pode gerar.
Transmissão – Observa cortes ultrafinos; Varredura – Gera imagens de superfícies em alta ampliação.
Para quê se usa anticorpos em ensaios visualizados por microscopia em um laboratório de pesquisa?
Se usa anticorpos conjugados a fluorocromos, tornando possivel a localização e identificação de moléculas que reagem com o anticorpo.
Qual a definição de citoesqueleto e de que é formado?
Redes de proteínas fibrosas distribuidas pelo citoplasma. É constituido por microtubulos, microfilamentos e filamentos intermediários.
Cite 3 funções do citoesqueleto para a célula.
Condiciona a forma das células, envolvido na formação de protusões celulares e possibilitam o movimento de organelas, vesiculas citoplasmáticas e cromossomos
Descreva os microtúbulos, explicando sua estrutura básica e como é formado.
Determinam a posição de organelas e de vesiculas de transporte intracelular, são longos e cilíndricos, feitos por heterodimeros (com 13 subunidades) de alfa e beta tubulina.
Em que processos os microtúbulos estão envolvidos?
Na manutenção da estrutura celular, substrato para movimentação de organelas e como proteínas motoras auxiliando no transporte.
Quais as funções da dineína e cinesina?
Despolimerizar e polimerizar respectivamente as extremidades do MT
Qual a estrutura básica dos cílios e flagelos?
O Axonema (1 par de mts central circundado por 9 duplas)
Para que servem os centríolos?
Para separar as cromátides durante a divisão celular e auxiliar na citocinese.
O que é centro organizador de microtúbulos?
É a estrutura celular por onde os microtubulos emergem.
Descreva os microfilamentos de actina, explicando sua estrutura básica e como é formado.
São filamentos que se arranjam em matrizes paralelas ou em rede presentes em todas as células, é formado por subunidades globulares de actina organizadas em hélices de 2 fios. Cada monomero possui uma ligação para o ATP que auxilia na polimerização.
Escreva as principais funções dos microfilamentos.
Separam as celulas filhas ao final da divisão celular, produzem correntes citoplasmáticas, participa dos processos de endocitose, exocitose e migração além de formar o córtex celular.
 Descreva os filamentos intermediários, explicando sua estrutura básica e como é formado.
Ptns que polimerizam em filamentos com diametro em torno de 10 nm com funções estruturais e mecânicas relacionadas à resistência celular. Podem ser do tipo queratinas, vimentinas (mesenquima embrio), ptns de neurofilamentos, GFAP, desmina (linha z dos musculos estriados)
Qual a função básica dos FI? Onde podem ser encontrados?
Resistencia celular, podem ser encontrados em quase todas as células eucariotas
Dê exemplos de FI e quais células são encontradas.
Queratinas (unha, cabelo, chifres), vimentinas (mesenquima embrio), ptns de neurofilamentos, GFAP (astrócitos e células de schwann), desmina (linha z dos musculos estriados)
O que são ptns acessórias? Dê 3 exemplos e sua interação com microfilamentos.
Controladoras da organização dos filamentos do citoesqueleto em locais especificos. Alfa actinina e fimbrina (conexões entre os filamentos), Proteina Cap (previne a polimerização e despolimerização) e Profilina (liga subunidades, acelerando a polimerização)
Explique resumidamente as etapas da movimentação de uma célula sobre a matriz extracelular.
A filamentos de actina se polimerizam na extremidade + causando protrusão da membrana formando o lamelipódio, com a célula extendida, integrinas formam o contato focal que fixam a célula à matriz. Após isso, a miosina II provoca a contração na outra extremidade da célula, gerando então o movimento. 
O que é anel contrátil e qual sua função?
É um anel de microfilamentos de actina que com a ajuda da miosina provocam a separação das células filhas na divisão celular.
Qual a estrutura básica das microvilosidades?
Protusão em forma ciliar, composta por filamentos de actina ligados por fimbrinas com extensões laterais (calmodulina e miosina I) e uma substância amorfa na região apical.
 O que são ptns motoras?
Proteínas que promovem a movimentação de organelas ao longo dos filamentos ou movem os próprios filamentos
Que definição você daria para núcleo?
Organela responsável pelo controle das atividades celulares. Contém o genoma (cromossomos) com as informações genéticas contidas no DNA.
Quais as principais funções do núcleo e em que processo celular está envolvido?
Contém a maquinaria molecular para duplicação do DNA; Responsável pela síntese e processamento de RNA(r, m, t); Dependente da síntese de PTNs no citoplasma;
Descreva a estrutura do núcleo com seus compartimentos.
Forma arredondada ou alongada dependendo do tipo de célula, diâmetro de 5 a 10 mm (mamífero), afinidade por corantes básicos (H). Compartimentos: membrana nuclear (envoltório), cromatina (eu, hetero), nucléolo, matriz nuclear e nucleoplasma.
O que complexo do poro e como é estruturado?
O envelope nuclear é perfurado por estruturas elaboradas chamadas complexo do poro que mediam a entrada e saída de substâncias do núcleo (100 ptns aprox em forma octogonal).
O que é heterocramatina e eucromatina?
Hetero: concentração densa de dna compactado e inativo. Eucromatina: dna não condensado e ativo na forma de granulos.
Dê 3 exêmplos de células multinucleadas.
Osteoclastos, celulas musculares e sinciciotrofoblasto
Como as moléculas mais complexas são transportadas através do poro nuclear?
Proteinas com sinais de destinação nuclear se ligam à proteinas do citosol, que se aderem passivamente às ptns do complexo. Com gasto energético, o canal do poro se abre e a proteina é transportada pra dentro do nucleo, permanecendo a proteina citoplasmática, fora.
Que organela possui ligação direta com o envoltório nuclear?
O centrossomo
Escreva o nome de uma célula que possua mais de um núcleo.
Osteoclasto
O que é lâmina nuclear, de que é formada e qual sua função?
É uma rede de Fis formada pelos diferentes tipos da proteina Lamina e confere estabilidade mecânica ao envelope nuclear.
O que é cromatina e quais os tipos existentes?
Corresponde aos cromossomos desespiralados (dupla helice de dna associada à proteínas). Pode ser hetero ou eucromatina.
Cite algumas proteínas encontradas no nucleoplasma.
Polimerases, Ligases, helicase, topoisomerase etc...
Quais as funções das proteínas não-histônicas que se ligam à cromatina?
Estruturais no arranjo cromossomal ou reguladoras das atividades gênicas ou enzimáticas (RNA e DNA Polimerases).
Como é estruturado o nucléolo e qual sua principal função?
Região nuclear densa onde são montados os ribossomos (rRNA).
O que acontece com o núcleo durante a divisão celular?
O envoltório nuclear se despolimeriza e o conteúdo do núcleo se mistura no citosol. Após a divisão, o envelope nuclear se repolimeriza isolando os componentes nucleares novamente.
O que é matriz extracelular (MEC) e quais as suas funções?
É a composição que preenche o meio intercelular. Preencher os espaços não ocupados pelas células, conferir aos tecidos resistência à compressão e ao estriamento;constituir um meio por onde cheguem os nutrientes e sejam eliminados dejetos celulares; ser um veículo por onde migram células quando se deslocam de um ponto para o outro; ser um meio pelo qual chegam as substâncias indutoras provenientes de outras células. 
Quais as principais moléculas encontradas na MEC?
A matriz extracelular é formada por elementos fluidos e fibrosos. Os fluidos são as glicosaminoglicanas e proteoglicanas . Os fibrosos são proteínas estruturais (colágeno, fibras elásticas ou fibras colágenas) e proteínas adesivas (fibronectina e laminina). 
O que é lâmina basal, para que serve e onde se localiza de maneira geral?
É uma matriz rica em proteinas que formam uma malha filtrante em diferentes tipos de tecidos, como no plasma sanguíneo e na formação da urina nos rins, além de servir de base para as células se fixarem e movimentarem.
Quais os componentes moleculares das lâminas basais?
Colágeno IV, laminina, proteoglicanas e fibronectina 
Fale sobre as proteínas colágenas tipo I e II, que tecidos se localizam e suas principais funções.
Tipo I (comumente encontrado em tendões, ossos e pele), Tipo II (encontrado em olhos, cartilagem hialina e discos vertebrais). Devem resistir respectivamente à grandes tensões e grandes pressões.
Qual a importância do colágeno tipo I nos tecidos mineralizados como osso e dente?
Conferir maior união e força às células desses tecidos, auxiliando também na cicatrização e recuperação.
O que são GAGs, quais as moléculas que podem interagir e para que servem?
Polissacarideos heterogeneos (geralmente sulfatados) que interagem com as proteoglicanas. Servem para dar rigidez à matriz.
O que é agrecana, onde se localiza, e qual sua função?
É o conjunto de várias proteoglicanas unidas a um ácido hialurônico. Se localizam em cartilagens hialina e servem para preencher o intersticio entre os feixes de fibras colágenas, oferecendo maior resistência à pressão para a cartilagem
O que é matriz estromal ou intersticial?
É um tecido conectivo não funcional que serve para sustentar as celulas funcionais de um orgão.
Qual a diferenças entre os fibroblastos e os condroblastos em termos de produção de MEC?
Associe o câncer com MEC.
Células em mitose desenfreada tem também capacidade para digerir a matriz extracelular e enraizar-se em tecido conjuntivo e entrar na circulação.
Quais os principais componentes das membranas celulares?
Fosfolipídeos de membrana (bicamada lipídica), glicolipídeos, proteínas de membrana e colesterol.
De que forma eles se organizam na maioria das membranas?
Os lipídeos se organizam em uma bicamada enquanto as proteínas e os colesteróis ficam embebidos entre os lipídeos unidos por ligações não covalentes
Quais as funções das membranas celulares?
Manter as diferenças entre os meios intra e extracelular e estabelecer gradientes de substâncias com auxilio das proteínas de membrana.
O que caracteriza o termo Flip-flop?
É quando um fosfolipideo ou o colesterol migram de uma monocamada para outra da bicamada com auxilio das enzimas flipases.
Qual a importância deste evento para a composição e função das membranas de uma célula?
Esses eventos ocorrem para manter a assimetria da bicamada atuando na conversão de sinais extracelulares para o interior.
Como as proteínas podem estar associadas às membranas?
Podem ser periféricas (interna ou externamente) ou podem ser integrais.
O que é glicocálix? Descreva suas principais funções.
É uma cobertura extracelular formada por açucares de glicolipideos e glicoproteinas que conferem proteção à celula contra danos mecanicos e quimicos, retém nutrientes e previne interações celula-celula e ptn-ptn indesejadas.
Como o transporte de molécula através da membrana é regulado?
A membrana permite passagem rápida de moléculas hidrofóbicas pequenas e lenta de hidrofílicas pequenas. Grandes moléculas, moléculas carregadas ou íons não passam diretamente e precisam do auxilio de proteínas de membrana (transportes passivo e ativo)
Quais as funções das junções celulares?
Comunicação intercelular, troca de sinais, formato celular, expressão gênica e vedação.
Cite 4 tipos de junções celulares.
Junções aderentes/ancoragem, ocludentes, formadoras de canais (gap) e transmissoras de sinais (sinapses)
Comente sobre a organização básica das junções celulares
Podem ocorrer de modo célula-célula (vedação ou transmissão de sinais) ou célula-matriz (fixação). As junções são formadas por elementos proteicos da membrana e do citoesqueleto.
Descreva a composição das junções de ancoragem. Cite exemplos.
Porteínas de adesão (caderinas ou integrinas) ligados a elementos do citoesqueleto. Junção aderente, hemidesmossomo, desmossomo, adesão focal
De que forma as ptns de junções se associam aos filamentos do citoesqueleto?
Através de proteínas de ancoragem intracelular (beta-catenina, catenina p120, vinculina, alfa-actinina)
O que são adesões focais?
São junções Célula-MEC do tipo integrina-actina. Se formam por grandes complexos protéicos no qual o citoesqueleto entra em contato com a MEC
Qual a composição e função das junções ocludentes?
São compostas pelas proteínas de oclusão (ocludinas e claudinas) e por proteínas ZO (que ligam filamentos do citoesqueleto às proteínas de oclusão). Além de selarem os espaços entre as células, funcionam como cercas ajudando a separar os domínios da membrana plasmática, para impedir que ptns e lipideos apicais difundam livremente para a região basal e vice-versa. Ficam acima das junções aderentes (região apical)
Qual a composição, organização e função das junções gap (formadoras de canais)?
São hemicanais formados por 6 subunidades de conexinas (conéxons) transmembrana que ligam as células eletrica e metabolicamente. Organizam-se em placas de gap junction e tem como função, facilitar a passagem de substâncias entre os meios intracelulares das duas células.
De que forma é controlado o transporte de moléculas através de junções GAP?
Os canais se abrem e permitem a passagem de moléculas com até 1kDa de tamanho (íons, açúcares, aminoácidos, nucleotídeos, vitaminas e moléculas sinalizadoras), mas não de macromoléculas (ptns, acidos nucléicos e polissacarideos).