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1 UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTE FACULDADE DE CIÊNCIAS DA SAÚDE DO TRAIRI GRADUAÇÃO EM NUTRIÇÃO RAFAEL VICTOR VIEIRA DE MELO Qualidade Higiênico Sanitária de carne de frango in natura comercializada no município de Santa Cruz/RN SANTA CRUZ 2016 2 RAFAEL VICTOR VIEIRA DE MELO Qualidade Higiênico Sanitária de carne de frango in natura comercializada no município de Santa Cruz/RN Artigo Científico apresentado Faculdade de Ciências da Saúde do Trairi da Universidade Federal do Rio Grande do Norte, para obtenção do título de Graduação em Nutrição. Orientador: Edvaldo Vasconcelos de Carvalho Filho SANTA CRUZ 2016 3 4 RAFAEL VICTOR VIEIRA DE MELO Qualidade Higiênico Sanitária de carne de frango in natura comercializada no município de Santa Cruz/RN Artigo Científico apresentado Faculdade de Ciências da Saúde do Trairi da Universidade Federal do Rio Grande do Norte, para obtenção do título de Graduação em Nutrição. Aprovado em: 09 de junho de 2016. BANCA EXAMINADORA Prof. Dr. Edvaldo Vasconcelos de Carvalho Filho – Orientador Universidade Federal do Rio Grande do Norte Profa. Ms. Katya Anaya Jacinto Lopes - Membro da banca Universidade Federal do Rio Grande do Norte Profa. Dra. Ediane Maria Gomes Ribeiro – Membro da banca Universidade Federal do Rio Grande do Norte 5 AGRADECIMENTOS A Deus por ter me dado saúde e força para superar as dificuldades. À minha esposa Ingrid, pelo incentivo, paciência e compreensão nos momentos mais importantes. Aos meus pais José Antônio e Marineide, pelo amor e apoio. Meus agradecimentos a Jéssyca Camila e Luís Otávio, companheiros de trabalho e na amizade que fizeram parte da minha formação. Ao Prof. Dr. Edvaldo pela oportunidade e apoio na elaboração deste trabalho. A todos que direta ou indiretamente fizeram parte da minha formação, о meu muito obrigado. 6 “A persistência é o menor caminho do êxito”. (Charles Chaplin) 7 LISTA DE TABELAS Tabela 1 Contagem total de microrganismos aeróbios mesófilos em peito de frango........................................................................................... 13 Tabela 2 Número mais provável de coliformes totais em peito de frango....... 14 Tabela 3 Número mais provável de coliformes termotolerantes em peito de frango................................................................................................ 14 8 SUMÁRIO 1 INTRODUÇÃO..................................................................................... 10 2 MATERIAIS E MÉTODOS................................................................... 11 2.1 COLETA DA AMOSTRA...................................................................... 11 2.2 MÉTODOS........................................................................................... 11 3 RESULTADOS E DISCUSSÃO.......................................................... 13 4 CONSIDERAÇÕES FINAIS................................................................ 16 REFERÊNCIAS................................................................................... 17 9 Qualidade Higiênica Sanitário da carne de frango in naturacomercializado no município de Santa Cruz/RN Rafael Victor Viera de Melo1 Resumo:No contexto atual em que se enfatiza a produção de alimentos em larga escala, a criação de aves desponta como uma atividade rentável. A avicultura de corte garante ao país posição de destaque no cenário mundial e em 2004 tornou-se o maior exportador, à frente dos Estados Unidos da América. No entanto esse aumento ocorreu devido a mudanças significativas nos hábitos alimentares da população, que muito contribuiu para um crescente aumento do mercado. Com isso é de grande importância a análise microbiológica da carne de frango, sendo uma forma de assegurar ao consumidor um produto com qualidade, coerente com o que a legislação sanitária vigente. O presente trabalho teve como objetivo analisar a qualidade microbiológica de carne de frango in natura comercializada em alguns pontos do município de Santa Cruz/RN. Logo, foram realizadas análises de bactérias Aeróbias mesófilas, Coliformes Totais e Termotolerantes, Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Salmonella spp. De acordo com os resultados obtidos pode-se verificar que as amostras apresentaram um elevado nível de contaminaçãopor bactérias aeróbias mesófilas, coliformes totais e termotolerantes. Para Staphylococcus aureus, as amostras apresentaram-se isentas. Em relação à Salmonellasppe aEscherichia coli, ambas estavam presentes em 100% das amostras. Perante os resultados obtidos no presente estudo, pode-se perceber que as amostras de peito de frango comercializadas no comercio varejista do município de Santa Cruz– RN não apresentam qualidade higiênico-sanitária satisfatória, demonstrando desta forma um produto com um elevado risco de causar intoxicação alimentar aos consumidores. Palavras-chave: Analise microbiológica.Intoxicação alimentar. Frango. 1 Graduando do curso de Nutrição da Universidade Federal do Rio Grande do Norte 10 1INTRODUÇÃO No contexto atual em que se enfatiza a produção de alimentos, a criação de aves desponta como uma atividade rentável. Sendo a produção de frangos de corte uma atividade simples que por meio da introdução de novas técnicas de nutrição, o melhoramento genético, manejo e controle sanitário permitem a obtenção de índices elevados de resultado visando à diversificação na produção (LIMA et al., 2013). O consumo de carne de frango tem aumentado substancialmente nas últimas décadas, dando posição de destaque ao Brasil como um dos maiores produtores mundiais de carne de aves. Com isso, vem crescendo a preocupação com a qualidade deste produto, em especial pelas implicações com toxinfecções alimentares (VIEIRA, 2000). A avicultura de corte garante ao país posição de evidência no cenário mundial e em 2004 tornou-se o maior exportador, à frente dos Estados Unidos da América, bem como o terceiro maior produtor, à frente da União Europeia (MIELE; GIROTTO, 2010). No ano de 2014, a produção de frangos alcançou mais de 12 milhões de toneladas, com um total 67,7% destinado para o consumo interno e 32,3% para o externo. Deste modo, o Brasil alcançou o posto de maior exportador mundial de frangos (ASSOCIAÇÃO BRASILEIRA DE PROTEÍNA ANIMAL, 2015). Esse aumento na produção ocorreu devido a mudanças significativas nos hábitos alimentares da população, que muito contribuiu para um crescente aumento do mercado, frisando a imagem da carne de frango como um produto nutritivo e saudável. Porém vale ressaltar que há algumas restrições quanto ao seu preparo e manuseio, onde a má utilização do produto pode resultar em doenças alimentares (OLIVEIRA; SALVADOR, 2011). Com isso é de grande importância à análise microbiológica da carne de frango, sendo uma forma de assegurar ao consumidor um produto com qualidade, coerente com o que a legislação vigente regulamentada. Assim, tendo em vista que a demanda porcarne de frango tem crescido nos últimos anos, e considerando o limitado número de estudos científicos na região do Trairi, torna-se relevante e oportuna a realização do presente estudo. 11 Deste modo o presente trabalho teve como objetivo analisar a qualidade microbiológica da carne de frangoin natura comercializada no comercio varejista de frango do município de Santa Cruz/RN. 2MATERIAIS E MÉTODOS 2.1 COLETA DA AMOSTRA Foram coletadasduas amostras emdoispontos de comercio varejista de frangoin natura localizadas no município de Santa Cruz – RN. As amostras (carne de peito de frango) foram coletadas em recipientes estéreis e apresentavam-se em temperatura ambiente, após a obtenção das amostras, as mesmas foram encaminhadas para o Laboratório de Microbiologia de Alimentos da Faculdade de Ciências da Saúde do Trairi - FACISA, onde foram submetidas à análise microbiológica realizada em duplicata. 2.2 MÉTODOS Contagem total de aeróbios mesófilos em placas, a qual foi obtida por meio de 25g da amostra homogeneizada em 225mL de solução salina peptonada, a partir das quais se realizou diluições decimais seriadas em solução salina peptonada, da ordem de 10-1 a 10-3, sendo alíquotas de 0,1 mL semeadas em superfície (spread plate) individualmente em duplicatas em placas de Petri contendo aproximadamente 20 mL de Ágar Padrão para Contagem (PCA). Após o processo, as placas foram incubadas em posição invertida em estufa bacteriológica a 35±1oC/48±2h(SILVA et al., 2010). Contagem de Coliformes Totais, Termotolerantes e Escherichia coli: A partir de 25g de amostra homogeneizada em 225mL de solução salina peptonada, realizou-se diluições seriadas também na ordem de 10-1 a 10-3 no mesmo tipo de solução. Destas diluições realizaram-se novas diluições em caldo Lauril Sulfato triptose (LST) para o teste presuntivo, incubando-se os 12 tubos em estufa bacteriológica a 35±0,5oC/24-48±2h, e posteriormente, 1 alçada dos tubos com crescimento e produção de gás foi retirada e inoculada em caldo E.coli (EC) para o teste confirmativo de coliformes termotolerantes em 45,5±0,2oC/24±2h em banho-maria, e 1 alçada foi retirada e inoculada em caldo Verde Brilhante Bile (VB) a 35±0,5oC/24-48±2h em estufa bacteriológica para o teste confirmativo de coliformes totais. Para a pesquisa de E.coli, retirou-se uma alçada dos tubos confirmativos de coliformes termotolerantes, e destes realizou-se estrias de esgotamento em placas de Petri contendo Ágar Levine Eosina Azul de Metileno (L-EMB), os quais ficaram incubados a 35ºC/24h. As placas que apresentaram colônias típicas tiveram uma alçada retirada, inoculando-a em Ágar Citrato de Simons e incubando-a a 35ºC/96h para o teste de citrato (SILVA et al., 2010). Na detecção de Salmonella spp. realizou-se o pré-enriquecimento, com a incubação de 25g de amostra por pelo menos 18 horas a 37ºC±1ºC. Em seguida, o enriquecimento em dois tipos de caldo seletivo, o Tetrationato e Selenito Cistina, sendo inoculados 1 mL e 0,1mL respectivamente e incubados a 37ºC±1ºC/24±3h e 41,5±1ºC/24±3h, respectivamente. O plaqueamento seletivo diferencial foi realizado com os meios de Ágar Entérico de Hectoen e Ágar Verde Brilhante, e incubou-se a 37ºC±1ºC/24±3h. Isolou-se 1 colônia formada de cada meio para o teste bioquímico e confirmação das colônias suspeitas do microrganismo em Ágar Tríplice AçúcarFerro (TSI) (SILVA et al., 2010). A análise de Staphylococcus aureus coagulase positivo ocorreu utilizando-se 25g da amostra homogeneizada em 225mL de solução salina peptonada, a partir das quais se realizou diluições decimais seriadas em solução salina peptonada, da ordem de 10-1 a 10-3, sendo alíquotas de 0,1 mL semeadas em superfície (spread plate) individualmente em duplicatas em placas de Petri contendo aproximadamente 20 mL de Ágar Baird-Perker. Após o processo, as placas foram incubadas em posição invertida em estufa bacteriológica a 35 – 37oC/45-48 (SILVA et al., 2010). 13 4RESULTADOS E DISCUSSÃO A Tabela 1 demonstra os resultados analisados quanto à determinação de Aeróbios mesofilos, os resultados encontrados apresentaram valores distintos entre as amostras, com uma variação de 3,1x10³ a 9,1x104 UFC/g. Tabela 1 –Contagem total de microrganismos aeróbios mesófilos em peito de frango. UFC/g Ponto 01 Amostra 01 Amostra 02 3,1 x 103 3,4 x 104 Ponto 02 Amostra 01 Amostra 02 5,6 x 104 9,1 x 104 Fonte: Autoria Própria Para Guzzoet al. (2015), a presença em grande número de Aeróbios mesófilos indica que o produto demonstra uma contaminação excessiva, a limpeza e desinfecção da superfície dos equipamentos e bancadas estão inadequadas, higiene insuficiente na produção e condições inapropriadas de tempo e temperatura durante a produção ou mesmo a conservação dos alimentos. Segundo Penteado eEsmerino (2011), que analisaram carcaça de frango coletadas em pontos de vendas no município de Ponta Grossa, Paraná, encontraram resultados semelhantes aos desta pesquisa, quais sejam, aeróbios mesofilos variando de5,3x10² a 6,0x104UFC/g. Conforme Lima (2010), mesmo que os patógenos estejam ausentes e que não tenham ocorrido alterações nas condições organolépticas do alimento, um número elevado de microrganismos mesófilos indica que o alimento é insalubre e que podem ter ocorrido problemas em relação ao tempo ou temperatura de armazenamento do produto. Em relação aoStaphylococcus aureusnenhuma dasamostrasapresentou colônias características para o microrganismo, necessitando então de provas bioquímicas para a identificação da espécie de microrganismo queestava presente nas amostras analisadas. Após análise de coliformes totais e termotolerantes, que obtiveram resultados semelhantes para ambos os estabelecimentos comerciaiscom uma 14 variação entre 23 NMP/g e >1.100 NMP/g, podemos perceber a presença de contaminação por esses microrganismosnas amostras.De acordo comBrasil (2001) que estabelece um limite máximo de 104 NMP/g de coliformes à 45ºC (termotolerantes ou fecais) em carnes resfriadas, congeladas ou in natura de aves. Tabela 2–Número mais provável de coliformes totais em peito de frango. NMP/g Ponto 01 Amostra 01 Amostra 02 23 >1.100 Ponto 02 Amostra 01 Amostra 02 >1.100 >1.100 Fonte: Autoria Própria Tabela 3–Número mais provável de coliformes termotolerantes em peito de frango. NMP/g Ponto 01 Amostra 01 23 Amostra 02 1.100 Ponto 02 Amostra 01 >1.100 Amostra 02 >1.100 Fonte: Autoria Própria Simas et al. (2013) observaram em seus estudos uma redução de aproximadamente 90% da contaminação nas carcaças de frango na contagem de coliformes termotolerantes quando comparado o antes e após o pré- resfriamento. Contudo a contaminação por coliformes totais em alimentos está relacionada a práticas inadequadas de sanitização e processamento desses produtos, ou mesmo a sua recontaminação após esses procedimentos (SALES et al., 2014), o que pode ter acontecido com as amostras analisadas nesta pesquisa. Sales et al. (2014) avaliaram, na Cidade de Curitiba/PR, as condições higiênico-sanitárias de 10 amostras de cortes de peito de frango resfriado comercializadas no varejo (supermercados) e encontraram 80% das amostras contaminadas para coliformes totais e 10% das amostras contaminadas para termotolerantes.Diferentemente do presente estudo, pois asamostras 15 analisadas apresentaram 75% de contaminação para coliformes totais e de 50% para coliformes termotolerantes. Foram encontrados nos dois pontos de comercialização de frango na cidade de Santa Cruz-RN a presença de Salmonellasppem 100% das amostras, indicando uma contaminação por esse microrganismo. Diferentemente dos resultados encontrados por Guzzo et al. (2015), que demonstrou ausência para todas as amostras analisadas depeito de frango de supermercados e feiras livres da Região do Alto Uruguai Gaúcho - RS. Estudos realizados com alimentos que apontam os principais envolvidos na veiculação de Salmonellaspp são os de origem animal, sendo ovos, carne de aves e seus derivados os mais envolvidos em surto alimentar em consequência da contaminação cruzada e do preparo inadequado, a ave, especialmente carne de frango de corte é um dos mais importantes reservatórios de Salmonellaspp na cadeia alimentar do homem (CARDOSO; TESSARI, 2008). Já no estudo realizado por Brito, Alves e Costa (2010) verificaram que do total de 40 amostras de carcaça de frango in natura comercializado no mercado público de São Luiz, 5 (12,50%) apresentaram contaminação por Salmonella spp.Em estudos realizados por Borsoi et al. (2010), encontraram um percentual em isolamento de Salmonellaspp em carcaça de frango abatido e comercializado em varejo na região nordeste do Rio Grande do Sul de um total de 180 amostras, 12,2% estavam contaminadas. A ausência de Salmonellasppna carne de frango destinada ao consumo humano é uma importante condição para a inocuidade para esse produto. Cabe ressaltar que Salmonellasppé causadora de graves toxinfecções alimentares, e sua presença nas amostras demonstra a necessidade de medidas de controle e garantia da segurança alimentar (OLIVEIRA et al., 2009). Em relação aos resultados de contaminação porEscherichia coli,observou-se presença nas amostras em sua totalidade, demostrou contaminação. Corroborando com nossos estudosBrizoet al.(2013), encontraram em 13 amostras analisadas, 100% de positividade para E. coli, e sendo nove (69%) destas adquiridas em abatedouros clandestinos, atribuindo assim as inadequações sanitárias durante o processamento dos produtos 16 analisados, evidenciando que os cuidados com as práticas higiênicas muitas vezes são negligenciados, confirmando o perigo em potencial para os consumidores e a necessidade de uma inspeção sanitária eficiente, para ter um controle melhor sobre os produtos. Cardoso et al. (2014) descrevem que os microrganismos que são encontrados em maior frequência nas aves são os aeróbios mesófilos e que destes, são poucos os que conseguem se desenvolver em temperaturas inferiores a 7°C. Contudo, sua contagem tem sido utilizada como indicador da qualidade higiênica, pois quando apresenta-se em grande número indica que ocorreu falhas durante a produção. 5CONSIDERAÇÕES FINAIS Perante os resultados obtidos no presente estudo, pode-se perceber que as amostras de peito de frango comercializadas no comercio varejista do município de Santa Cruz– RN não apresentam qualidade higiênico-sanitária satisfatória, demonstrando desta forma um produto com um elevado risco de causar intoxicação alimentar aos consumidores. Diante o exposto, faz-se necessário uma fiscalização sanitária pelos órgãos responsáveis com finalidade de capacitação dos manipuladores e a implantação de Boas Práticas, a fim de melhorar a qualidade do produto final. Quality Hygienic Sanitary chicken meat in natura sold in the city of Santa Cruz / RN Abstract:In the current context in which it emphasizes the production of large- scale food, poultry emerged as a profitable activity. The poultry production ensures the country a prominent position on the world stage and in 2004 became the largest exporter, ahead of the United States of America. However this increase was due to significant changes in eating habits of the population, which greatly contributed to increasing the market. It is of great importance to microbiological analysis of chicken meat, and a way to ensure the consumer a quality product, consistent with the current health legislation. This study aimed to analyze the microbiological quality of chicken meat in natura marketed in some parts of the municipality of Santa Cruz / RN. Thus, bacteria analyzes were performed mesophilic Aerobic, Total and fecal coliforms, Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Salmonella spp. According to the results it can be seen that the samples showed a high level of contamination by mesophilic 17 aerobic bacteria, total and fecal coliforms. Staphylococcus aureus, the samples presented Exempted. Regarding Salmonella spp and Escherichia coli, both were present in 100% of the samples. Given the results obtained in this study, it can be noticed that the chicken breast samples sold in the retail trade in the city of Santa Cruz-RN does not have satisfactory sanitary conditions, thus demonstrating a product with a high risk of causing poisoning food to consumers. Key words: Microbiological analysis. Food poisoning. Chicken. REFERÊNCIAS ASSOCIAÇÃO BRASILEIRA DE PROTEÍNA ANIMAL. Relatório anual de atividades 2014. São Paulo: ASSOCIAÇÃO BRASILEIRA DE PROTEÍNA ANIMAL; 2015. Disponível em: <http://abpa- br.com.br/setores/avicultura/mercado-externo>. Acesso em: 9 de maio de 2016. BORSOI, A. et al. Número mais provável de Salmonella isoladas de carcaças de frango resfriadas. Ciência Rural, Santa Maria, v.40, n.11, p.2338-2342, nov. 2010. BRASIL. Ministério da Saúde. Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Resolução RDC nº12, de 02 de Janeiro de 2001. 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