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O esfregaço (já fixado pelo calor) é coberto pelo cristal violeta (corante primário) conferindo cor violeta a todas as células, depois adiciona água e remove o corante. Após coloração de todas e remoção do corante primário, cubra o esfregaço com iodo de lugol. Este irá fixar o corante aos componentes celulares. Depois lave o mordente(iodo de lugol).Nesse momento ambas Gram apareceram com cor violeta escura ou roxa. A descoloração ocorre agora, quando a lâmina é lavada com solução etanol-acetona (álcool) que removera a cor violeta de algumas espécies. Após a remoção do excesso de álcool, a lâmina é recoberta com um segundo corante básico a Fucsina com cor rósea, ela então dará cor as gram negativas. Fernanda Valentina Por último faz a lavagem do esfregaço e retire o excesso de água com papel filtro para olhar ao microscópio. Conclusões Cristal violeta: todas as células se coram de violeta ou roxo (corante primário). Após descoloração com álcool: Gram+ = retém a cor que estavam Gram - = perdem a cor Corante secundário fuscsina/safranina: dará cor rósea ou vermelha as Gram - que tinham perdido Final do procedimento Gram + : cor violeta/azul escuro Gram - : cor rósea/vermelha Fernanda Valentina
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