Estudo dirigido Biologia Molecular e Biotecnologia

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Biotecnologia e Biologia Molecular
Estudo dirigido para a Avaliação
Perguntas
- Sistema de Expressão em Eucariotos e Procariotos
1- Por que a expressão gênica deve ser regulada nas células de eucariotos e procariotos?
2- O que são genes constitutivos?
3- Em quais etapas a regulação da expressão gênica pode ocorrer?
4- Como são os genes nos procariotos? O que é um operon?
5- O que chamamos de controle positivo e controle negativo durante a regulação gênica nos procariotos e nos
eucariotos?
6- Entenda como a regulação ocorre nos procariotos:
-Operon Lac: Controle Negativo e Controle Positivo
-Operon da Arabinose: Controle Duplo Positivo e Negativo
-Operon do Triptofano: Controle Negativo e o Atenuador
7- Em Escherichia coli o operon da lactose compreende 3 genes estruturais: lac Z, lac Y e lac A, cujos
produtos estão envolvidos no metabolismo da lactose. O gene lac I codifica um repressor e a lactose
funciona como um indutor do sistema. Descreva a sequência de processos:
a) Na ausência de lactose.
b) Na presença de lactose.
c) Na presença de glicose no meio celular.
8- Pesquise sobre o operon trp (triptofano) e, considerando os operons lac e trp como modelos de indução e
repressão, respectivamente, responda:
a) Porque o mecanismo do triptofano é dito negativo e o da lactose é dito positivo?
b) Descreva a condição mais frequente de cada uma desses operons.
c) Descreva as alterações ocorridas quando moléculas efetoras estão presentes.
9- Diferencie repressores e indutores.
10-Uma mutação é a alteração na sequência de nucleotídeos de um gene, de um promotor ou de um operador.
Explique os efeitos de cada uma das mutações abaixo no operon lac da E. coli: Considere: I s > I + > I –
a) Mutação no operador, impedindo a ligação do repressor.
b) Mutação em lac I (gene regulador ou repressor), impedindo a sua transcrição.
c) Mutação no promotor impedindo o acoplamento da RNA polimerase.
d) Mutação em lac I, inibindo o acoplamento do repressor à lactose.
e) Mutação sem sentido em lac Y.
11- Controle da expressão gênica em eucariotos ocorre pelos diferentes mecanismos citados abaixo. Explique
cada um destes.
1-Alteração da Cromatina
2- Ativação e repressão da transcrição de genes
3- Regulação no processamento do pré-mRNA
4- Splicing alternativo
5- RNA interferência (RNAi).
- Mutação e Reparo
1) Como a recombinação genética causa variação genética?
2) O que seria uma mutação genômica, gênica ou cromossômica. Diferencie cada uma destas.
3) O que são SNPS?
4) O que diferencia uma mutação somática versus germinativas?
5) Quais são os tipos de mutação gênica? O que cada uma destas pode causar?
6) Diferencie mutação sem sentido de mutação de sentido trocado e de mutação silenciosa.
7) As mutações podem ser induzidas ou espontâneas. Exemplifique cada uma destas.
8) Mutações podem ser quimicamente induzidas por? DÊ exemplos
9) Quais são os tipos de reparo e DNA? Explique cada um destes.
10)O que é o sistema SOS? Quais problemas este sistema pode causar?
11) Elementos transponíveis podem provocar mutações, quando inseridos em um sítio próximo à sua
localização original, e também quebra na sequência gênica, quando inseridos no interior de um gene,
por interromperem a continuidade do gene. No último caso, poder-se-ia dizer que os íntrons também
interrompem a continuidade de um gene, embora ele permaneça funcional. Em relação ao tema,
responda:
a) Como os transposons podem provocar mutações quando inseridos em um sítio próximo à sua
localização original?
b) Que tipos de mutações podem ocorrer quando um transposon se insere em um sítio próximo à sua
localização original? Explique.
c) Por que a presença de um íntron em um gene não o inativa, enquanto a inserção de um elemento de
transposição pode inativá-lo?
- Ferramentas de Biologia Molecular e Biologia Molecular aplicada à Biotecnologia
1- Como ocorre a PCR? Quais os reagentes e enzimas necessárias? Quais são as etapas dos ciclos?
2- Diferencie a reação de PCR da reação de sequenciamento.
3- Como ocorre o sequenciamento por Sanger? E nos NGSs?
4- Para que serve a eletroforese? Diferencie a eletroforese em gel de agarose da eletroforese de
poliacrilamida?
5- Qual a diferença de PCR convencional do real time PCR?
6- Entender para que serve as diferentes ferramentas de biologia molecular
7- Explicar os mecanismos da Tecnologia do DNA Recombinante
8- Quais as etapas para a identificação de microrganismos cultiváveis e não cultiváveis em amostras
ambientais
9- Quais são as diferentes técnicas utilizadas para o diagnóstico genético molecular e para que são
aplicadas?