aula-flavivirus-15-04-18

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Flaviviridae 
Disciplina: Virologia III 
Curso: Medicina Veterinária 
Profa. Rita de Cássia Nasser Cubel Garcia 
http://www.alamy.com/stock-photo-structure-west-nile-virus-pdb-3iyw-wnv-is-virus-family-flaviviridae-52098402.html 
Flaviviridae Flavivirus 
(flavus = amarelo) 
Pestivirus 
(pestis = peste) 
Hepacivirus 
(heptos = fígado) 
Febre amarela (YFV) 
Encefalite Japonesa (JEV) 
Nilo Ocidental (WNV) 
Peste suína clássica 
Doença de fronteira de ovinos 
Diarreia viral bovina-1 (BVDV-1) 
Diarreia viral bovina-2 (BVDV-2) 
Diarreia viral bovina-3 (Hobi-like) 
Hepatite C (HCV) 
Pegivirus 
FAMÍLIA GÊNERO VIRUS 
Árvore filogenética 
(gene RdRp) 
https://www.researchgate.net/figure/The-family-Flaviviridae-Phylogenetic-
tree-based-on-the-analysis-neighbour-joining-of_fig1_264115069 
Estrutura e organização genômica 
Flores, E.F. Virologia Veterinária, 2007 
Família: Flaviviridae 
ADSORÇÃO 
Vírus – Célula 
hospedeira 
via 
 receptor 
celular 
CITOPLASMA 
MONTAGEM 
do 
nucleocapsídeo 
Diminuição do pH 
 
 
Fusão da membrana 
do vírus 
Ptn E sofre mudança 
conformacional 
 Nucleocapsídeo é 
liberado no 
citoplasma 
 
DESNUDAMENTO 
 
ssRNA(+) 
genômico 
ssRNA(+) 
TRADUÇÃO 
CITOPLASMA 
poliproteína 
Proteínas 
Não-estruturais 
Proteínas 
Estruturais 
Proteases virais 
e celulares 
 
RNA polimerase 
RNA-dependente 
 
Progênies de 
ssRNA (+) 
Síntese de molde 
de ssRNA (-) ENDOCITOSE 
MORFOGÊNESE 
VIRAL 
Ocorre no 
RER LIBERAÇÃO 
Via secretora 
do Complexo 
de Golgi 
Replicação 
Cedido por Flavia Barreto dos Santos, Lab. de Flavivirus, Fiocruz 
Exocitose 
Família: Flaviviridae 
 Partículas virais esféricas (40-60nm de diâmetro) 
https://viralzone.expasy.org/39?outline=all_by_species 
M protein 
 Envelope com 2 ou 3 glicoproteínas: Flavivirus: gp E 
 Pestivirus: gp Erns /E1/E2 
 Capsídeo: simetria icosaédrica 
 Genoma: RNA fita simples, polaridade positiva (infeccioso) 
Família: Flaviviridae 
Gênero: Flavivirus 
Vírus do Nilo Ocidental (West Nile virus, WNV) 
http://www.westnile.ca.gov/wnv_faqs_basics.php 
Em 2014, um trabalhador de área rural do Estado do Piauí apresentou sinais 
clínicos de encefalite aguda. 
Em seguida, amostras de material biológico (sangue, líquido 
cefalorraquidiano e fezes) foram colhidas e enviadas ao Instituto Evandro 
Chagas. 
Após análises, confirmou-se o primeiro caso de WNV em humanos no Brasil. 
Vírus da Diarreia Viral Bovina 
(BVDV) 
Responsável por perdas econômicas importantes em rebanhos de corte e leite 
 redução da produção de leite 
 queda da performance reprodutiva 
 retardo do crescimento dos bezerros 
 Família: Flaviviridae 
 Gênero: Pestivirus 
Vírus da Diarreia Viral Bovina (BVDV) 
BVDV-1 (17 subgenótipos: 1a a 1q) 
BVDV-2 ( 2 subgenótipos: 2a e 2b) 
BVDV-3 (“HoBi”) 
amostra de soro fetal bovino - Brasil 
Genótipos: 
Árvore filogenética da sequência 5´NCR de isolados brasileiros de BVDV 
(Weber et al 2014. Virus Res 191:117-124) 
1a 
2b 
1b 
5’ 
 
Npro C E0 E1 E2 NS2-3 NS4A NS4B NS5A NS5B 
3’ 
Vírus citopático (cp): 
 proteína é clivada 
 
p125 
p54/NS2 p80/NS3 
Vírus não citopático (ncp): 
proteína não é clivada 
 
p80 é associada à citopatologia 
Proteínas não estruturais (NS): 
 A maioria das amostras de 
BVDV isoladas a partir dos 
casos clínicos são ncp. 
 Infecção aguda de animais não-prenhes: 
 infecção inaparente 
 enfermidade gastroentérica 
 enfermidade respiratória 
 síndrome hemorrágica (Nova Iorque) 
 Infecção aguda de fêmeas prenhes 
 Infecção persistente 
 Bovinos são os hospedeiros naturais 
 Transmissão por: 
 contato direto: focinho-focinho, coito, mucosa-mucosa 
 contato indireto: placenta/feto abortado, secreções/excreções 
 iatrogênica: agulhas ou material cirúrgico contaminado, luvas de palpação, tatuadores 
 transplacentária, sêmen (inseminação artificial) 
Vírus da Diarreia Viral Bovina (BVDV) 
https://www.slideshare.net/trufflemedia/dr-julia-ridpath-
whats-new-in-bovine-viral-diarrhoea-bvd-research 
Manifestações 
clínicas 
diarreia Secreção mucopulurenta salivação intensa 
animal PI 
hemorragia 
aborto 
Amostra NCP 
Imunotolerância 
0 40 120 280 
Dias de gestação 
Animal persistentemente infectado (PI) 
 
soronegativo para a variante que o infectou 
Consequências da infecção de fêmeas 
bovinas prenhes pelo BVDV 
Reabsorção fetal 
Retorno ao cio 
Bezerros saudáveis e 
soropositivos 
Fêmea prenhe 
soronegativa 
https://www.slideshare.net/trufflemedia/dr-julia-ridpath-whats-new-in-bovine-viral-diarrhoea-bvd-research 
Adivinhem quem é o PI? 
Bovinos da mesma idade (Lee et al., CVJ 38:29) 
Animais PI  Disseminação do vírus no rebanho 
Etiopatogenia da Doenças das Mucosas (DM) 
6 meses a 2 anos 
Flores, E.F. Virologia Veterinária, 2007 
 As cepas cp são originadas a partir de mutações da cepa ncp 
 Amostras ncp + cp em animais acometidas da DM. 
 Isolamento em Cultura de Células MBDK  detecção do antígeno viral na cultura 
de células (com ou sem CPE) por Imunofluorescência 
BVDV : Diagnóstico laboratorial 
Para confirmar DM: amostras cp e ncp isoladas do mesmo animal 
Amostras clínicas: Fezes, exsudatos nasais, leite, sangue e tecidos coletados durante a 
necropsia e fetos abortados. 
Detecção de vírus: Métodos clássicos 
 Detecção do genoma viral: 
- RT-PCR convencional  BVDV-1  BVDV-2 
diagnóstico do animal 
detecção do vírus nas amostras de (bulk tank milk) 
www.scielo.br 
BVDV : Diagnóstico laboratorial 
 Elisa para detecção de Ag: 
 triagem do rebanho 
 Imunohistoquímica: detecção do vírus em tecidos 
 (identificar animais PI) 
Detecção de vírus: Métodos rápidos 
 Detecção de anticorpo: ELISA indireto 
Amostra 
clínica: 
soro 
Sensibilização 
da placa: Ag 
conjugado: 
anti-Ig 
marcada com 
enzima 
BVDV : Diagnóstico laboratorial 
- determinar o status imune do animal e prévia exposição ao vírus 
Prevenção e Controle - BVDV 
 
 Prevenção da entrada de animais PI 
 Identificação e remoção de animais PI 
 Controle com Vacina: 
 rebanhos com: - alta rotatividade de animais 
 - sorologia positiva 
 - história de doença clínica ou reprodutiva 
 - confirmação laboratorial da infecção por BVDV 
 
 Controle sem Vacina: 
 rebanhos: - fechados, sem ingresso frequente de animais 
 - com sorologia negativa e cujo ingresso de animais seja raro ou 
eventual