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Aluna: Raissa Filgueira Macedo MÉTODOS DE COLETA E AVALIAÇÃO DE EMBRIÕES • Método não cirúrgico- lavagem uterina • Bovinos e equinos são as principais espécies que a biotecnologia é utilizada em larga escala em todo mundo • Bovinos é utilizado de superovulação • Como vai superovular: libera FSH para que tenha maior crescimento, Suplementar FSH antes da divergência folicular • Pq não consegue superovular a égua: fossa de ovulação, a parte medular ta para fora, não consegue ovular muito, não passa muito, a égua não responde a esses protocolos de superovulação por questões hormonais. BOVINOS (SICRONIZAÇÃO DAS RECEPTORAS) • Prostaglandinas e observação de cio • Protocolos semelhantes aos IATF- transferência- transferência de embrião em tempo fixo (TETF) • A transferência do embrião deve ser realizada em receptoras 6 a 8 dias após o estro • D6, D7, D8- relaciona a progesterona, o útero delas vai estar compatível com a da femea que foi retirada o embrião • O estágio do embrião deve ser compatível com a condição uterina • Certificar se a receptora tem o corpo lúteo • D0- inicio da ovulação • Embrião do mesmo lado do corpo lúteo. MATERIAS PARA COLETA E TRANSFERÊNCIA • Sonda de Foley estéril • Mandril para sonda • Sonda formato de Y estéril • Filtro de coleta estéril • 5 litros de ringer lactato • Luva de palpação (estéril) • Gel estéril PASSO A PASSO PARA A COLETA • Contenção do animal no tronco • Tranquilização do animal e anestesia epidural • Palpação retal e avaliação do CL • Higienização da vulva e períneo da femea • Realizar a passagem da sonda + mandril pela cérvix ➢ A sonda pode ser posicionada cranial a cérvix ou no corno ipsilateral aos CLs ➢ Inflar o balão (30 cm de ar) • Preencher o útero com o ringer lactato • Retornar o fluído observando a descida no filtro • O útero deve ser palpado durante a coleta ➢ Sentir se ele está repleto de fluido ➢ Auxiliar a saída do fluido • Avaliar a coloração do fluido no filtro NO LABORATÓRIO • Avaliação dos embriões • Estagio de desenvolvimento ➢ Mórula ➢ Blastocisto inicial ➢ Blastocisto ➢ Blastocisto expandido ➢ Grau de qualidade • Grau de qualidade ➢ Grau 1- excelente ➢ Grau 2- regular ➢ Grau 3-a qualidade ruim Aluna: Raissa Filgueira Macedo ➢ Grau 4- degenerados (colocar dentro do útero) • Equinos: fez lavagem e encontra um oocito não fecundado, pois foi seguindo o fluxo • Envase do embrião na palheta • Montagem de inovulador PASSO A PASSO DA TRANSFERÊNCIA 1. Conter a receptora no tronco 2. Tranquilização do animal 3. Com 25 dias ver com ultrassom EQUINOS (TE) • Estima-se que é necessário realizar 3 coletas para obtermos um gestação (índices de 33%) • Mas o resultado do programa de reprodução depende de 3 fatores ➢ Égua doadora ➢ Sêmen do garanhão ➢ Égua receptora • Podemos chegar a índices próximos 100% quando trabalhamos com animais com boa eficiência reprodutiva SELEÇÃO DE RECEPTORAS PARA PROGRAMA DE REPRODUÇÃO • Éguas entre 3 a 12 anos de idade • Saudáveis (nenhum problema observado) • Escore corporal bom • Temperamento dócil (manejo constante e aplicação de medicação) • Sistema reprodutor sem nenhuma alteração ➢ Não ter presença de liquido, swab uterino negativo, cérvix sem laceração • Boa aptidão materna e produção de leite ACOMPANHAMENTO REPRODUTIVO DA DOADORA • Acompanhamento ultrassonográfico diário • Indução da ovulação (análogos de GnRH, hCG) • Inseminação artificial ➢ Sêmen fresco/refrigerado ( IA 24h após a indução) ➢ Sêmen congelado (IA peoxima de movimento ovulação) • Confirmação da ovulação COLETA DE EMBRIAO • Realizada entre o D7 e D9 após ovulção ➢ Depende da idade, raça, tipo de sêmen utilizado • Lavagem uterina ➢ Entrada e saída do fluido por gravidade em um sistema fechado ➢ 1 litro ringer lactato lavagem ➢ Repetir até 5 vezes ou até recuperar o embrião no filtro • A utilização de tranquilizantes é opcional • Após o termino da coleta realizar aplicação de PGF2alfa na égua • Qual o local onde o cunf da sonda de lavagem uterina vai ser inflado? Depois da cérvix NO LABORATÓRIO • Lavagem do filtro • Busca do embrião no estereomicroscópio • Lavagem do embrião na placa com poços • Meio de manutenção especifico para embrião • Avaliação e classificação do embrião TRANSFERENCIA DE EMBRIAO • D4 a D6 dias após a ovulação • Útero limpo
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