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SUB 1. Uma empresa desenvolveu uma cutivar de arroz(monocotiledônea).Este transgênico deve ser resistente a um herbicida por um método indireto( vetor para levar 1 gene - e o método é por Agrobacterium- eficiente para dicotiledôneas). Promotor CAMV35s (promotor constitutivo pra dicotiledôneas- expresso em todos os tecidos da planta)- gene de interesse 5 – enol- piruvinil-chiquimato(S)-fosjato(PH)-sintase. Com base nas características desse cassete gênico,responda: a. Em que local da planta o gene vai ser expresso? Em toda a planta. b. Que tipo de promotor é o CAMV35s? É um promotor constitutivo expresso em dicotiledôneas. c. Como é chamado a (sigla) 5 – enol- piruvinil-chiquimato(S)-fosjato(PH)-sintase? EPSPS d. Esse gene é insensível a qual herbicida? Ao glifosato. e. Qual a vantagem de usar o gene GLP na análise dos tecidos? Ele permite monitorar a expressão da planta in vivo. f. Essa planta transgênica vai apresentar característica de 1° ou 2° geração? De 1° geração. g. Com base na análise acoma, o método de transformação escolhido será eficiente?por que? Não,porque Agrobacterium é ineficiente ou pouco eficiente para monocotiledôneas. h. Com base no cassete gênico há um fator que possa prejudicar a obtenção do transgênico? Sim, o promotor é específico para dicotiledôneas. i. Se um pesquisador resolvesse obter uma cultivar de arroz com esta mesma resistência a partir de uma polinização in vitro.Essa planta seria considerado um transgênico/OGM de acordo com a legislação? Não pode ser um produto transgênico(OGM,só é transgênico)OGM, pela legislação, se houver transferência de material genético com o auxílio de técnicas de engenharia genética.A polinização é natural. 2. Fases da micropropagação: a. Durante este estágio, o objetivo é otimizar a taxa de multiplicação. Fase:Multiplicação in vitro. Nesse sentido é necessário estimular para o desenvolvimento de gemas laterais . Qual é o hormônio regulador? Citocinina. Quais são as classes? Citocinina= Divisão celular, auxina=enraizam, auxina e giberelina=estimuladores, giberelina=alongamento, etileno=amadurecimento, etileno e ácido abscísico=inibidores, ácido abscísico=fecham estômatos. Exemplo de regulador. BAP(benzil aminopurina), zeatina, ZIP(isopentenil adenina). b. O ideal nessa fase é manter as plantas em locais controlados e realizar alguns tratamentos ,para controlar e prevenir doenças.A termoterapia é uma alternativa eficiente para a ação de doenças virais. Fase: Preparação da planta matriz e escolha do explante e escolha do explante. Que outros produtos são utilizados para o controle fitossamitário? Bactericida,fungicida,antibiótico. c. O emprego de estufas,túneis plásticos, sist.de.nebuliz. deve ser considerado para cada tipo de planta,tendo em vista, que as plantas, neste estágio normalmente, não apresentam estômatos funcionais e suas folhas tem reduzida capacidade de formação de cutículas serosas. Fase:Aclimatação. Na fase anterior a esta, há uma técnica de enraizamento que auxilia na redução das perdas dessa fase .Que técnica é essa? Enraizamento ex vitro. Para estimular o enraizamento ,usa-se que hormônio? Auxina. d. São objetivos deste estágio a definição do tipo de explante a ser utilizado e a isenção na cultura de contaminantes. Fase: Estabelecimento de uma cultura asséptica. Com relação ao explante ,espécies lenhosas em geral apresentam grande quantidade de compostos fenólicos.Que técnica foi aplicada para reduzir a quantidade de enzimas envolvidas na produção de compostos. Coloca no escuro para as peroxidases, não agirem na produção de compostos fenólicos.Manutenção no escuro. Quais são os principais agentes contaminantes durante o estabelecimento? Fungos,bactérias. e. Neste estágio ,busca-se o alongamento , a indução e a iniciação radicular.E de hetero pra autotrófico. Fase:Enraizamento in vitro ou ex vitro. Qual o regulador efetivo nessa fase? Auxina. Cite um exemplo. AIB-ácido indol butílico ANA-naftaleno acético AIA-ácido indol acético Por que nessa fase é importante manter as gemas apicais dos explantes? Porque na gema apical há a produção de auxina que é fundamental para enraizamento. 3. Para a obtenção de machos homozigotos (super macho). Cultura de antera e pólen.
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