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CULTURA DE TECIDOS DE PLANTA O QUE É CULTIVO IN VITRO DE PLANTAS? A cultura vegetal in vitro consiste no cultivo de células, tecidos ou órgãos vegetais em recipientes semi-herméticos, sob condições de assepsia, com controle de luminosidade, temperatura, umidade e pH, utilizando meios de cultura artificiais. Cada célula vegetal, por conter informação genética completa do organismo que constitui, tem o potencial para dar origem a uma nova planta. *Em 1902 Haberlandt propôs que uma única célula vegetal poderia ser cultivada, no entanto não teve secesso por falta de hormônios. · 1933 Descoberta dos reguladores de crescimento · 1937 Importância das vitaminas (acido indol acético) · 1943 Trabalhos subsequentes com cultura de tecidos MEIO DE CULTURA: FUNÇÕES 1. Prover H2O 2. Prover minerais 3. Prover vitaminas 4. Prover reguladores de crescimento 5.Prover compostos orgânicos como aminoácidos e carboidratos 6. Proporcionar trocas gasosas 7. Reter metabólitos vegetais EXPLANTE · Porção da planta removida e cultivada in vitro · Contaminações internas são eliminada pelo isolamento de regiões não contaminadas · É mais fácil regenerar explantes de plantas herbáceas do que de plantas lenhosas · A desinfecção de raízes é particularmente difícil devido a elevado índice de contaminação por microrganismos do solo MÉTODOS DE TRANSFORMAÇÃO GENÉTICA · O processo de introdução de sequências (genes) de interesse em organismos chama-se transformação genética; · O gene sendo transferido para o organismo é chamado de transgene; · Organismos com modificações genéticas que recebem um transgene são denominados de transformados ou transgênicos; · Denominação mais ampla = Organismos Geneticamente Modificados (OGM); TRANSFERINDO DNA PARA CÉLULAS DE PLANTAS 1. DNA pode ser transferido para a célula vegetal por meio Agrobacterium) biológico ou (via físico (bombardeamento com micropartículas), 2. DNA deve cruzar várias barreiras, 3. DNA deve se integrar ao cromossomo no núcleo da célula vegetal, 4. Cada célula transformada é única, 5. Número de células transformadas é mínimo MÉTODOS PARA A INTRODUÇÃO DO TRANSGENE NA PLANTA APESAR DE SUA ORIGEM PROCARIOTA, A EXPRESSÃO DOS GENES PRESENTES NO T-DNA SÓ É POSSÍVEL POR SEREM OS SINAIS DE REGULAÇÃO DESSES GENES RECONHECIDOS PELO SISTEMA DE TRANSCRIÇÃO EUCARIOTA VEGETAL!!
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