Diagnóstico HIV

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HIV Diagnóstico 
quarta-feira, 6 de outubro de 2021 16:31 
Leitura recomendada: 
UM BREVE HISTÓRICO: 
1981: 
• Primeiros relatos reportados nos jornais do CDC 
• Doença que estava acometendo homossexuais 
• Mortes por bactérias que até então não matavam -> aumentava as chances de contrair
doenças 
 
1983: 
• Aumento do número de casos 
• Isolamento do HIV pelo grupo do instituto Pasteur 
• Agente causador da AIDS 
 
1984; 
• Marco do HIV descoberto 
• Mostrou a importância do receptor CD4 em linfócitos T 
○ Entrada do vírus HIV possibilitando a infecção 
1985: 
• Sequenciamento do genoma do HIV 
 
 
• Em menos de 5 anos conseguimos tudo isso e o número de infectados crescia ano a ano 
• Foi um dos primeiros sequenciamentos genômicos 
• Por que foi importante sequenciar o genoma? 
○ Conhecendo o seu genoma, possibilitou-se o diagnóstico do HIV por PCR 
○ Identificar a carga viral do paciente 
○ Seguiu como modelo para outras infecções, como o zica e o sarscov 2 
 
Atualmente estamos na terceira geração de sequenciamento genômico 
 
1994: 
Tratamento com AZT -> terapia antiretroviral 
Alvo para o tratamento: ciclo de replicação 
 
 
• HIV-1: presente no brasil e na maior parte do mundo 
• Precisa do receptor CD4 + outros receptores como CCR5 
• Impregnação do genoma do vírus no genoma humano 
○ Processo de recombinação -> RNA para cDNA (transcriptase reversa) 
○ Transcrição utilizando a maquinaria da célula humana 
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• Alvo: inibidores de transcriptase reversa e protease 
 
Timothy Brown: 
• Primeiro a ser curado pelo HIV; 
• Carga viral não detectável 
• Transplante de medula óssea e conseguiu ser curado de um paciente que tinha uma
mutação no receptor CCR5, não ocorrendo a entrada do vírus na célula 
• CISPR CAS 9 -> mutação proposital para ocorrer a cura espontânea 
 
Nos anos 90: 
• Fazia uma grande campanha de uso de preservativos 
• Naquela época não tinha uma perspectiva de tratamento 
• Atualmente tem-se a AIDS como uma doença crônica e não uma fatalidade 
 
A infecção por HIV 
• Não causa apoptose nos linfócitos, e sim piroptose -> liberação de citocinas pró-
inflamatórias -> chama mais linfócitos para serem infectados 
• Caspase-1: sinalização de citocinas pró-inflamatórias 
○ Utilização como estratégia de tratamento. 
 
 
GENOMICA: 
• Diferença entre o HIV 1 e 2 
• GP46 alvo de diagnóstico 
 
DIAGNÓSTICO: 
• Molecular: PCR quantitativo -> real time 
○ Consigo acompanhar ciclo a ciclo de amplificação da reação 
○ Fase plateau: não se aumenta mais a qtde de cópias 
○ Fase linear: não é ainda o dobro de cópias 
○ Exponencial: o dobro de cópias 
○ Threshold: o ponto de interseção da linha conseguimos identificar o número de ciclos 
• CT: ciclo de threshold -> eixo X é o número de ciclos 
○ Kits de detecção de PCR-RT: Abbott 
• Sensibilidade de 40 cópias por mL: ensaio muito sensível 
 
• Imunológico: manual técnico para o diagnóstico pelo HIV 
○ 4 marcadores: 
• RNA -> PCR RT molecular 
• P24 antígeno 
• Imunoglobulina IgM 
• IgG 
○ ELISAS: 
• Indireto de primeira geração: 
• No fundo da placa: antígeno -> HIV cultivado em células 
• Detecção de IgG anti HIV 
• 6 a 8 semanas de soroconversão 
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• ELISA DE SEGUNDA GERAÇÃO 
• Peptídeo sintético -> não mais o vírus 
• Quanto mais epitopos imunodominantes mais sensível 
• Soroconversão de 28 a 30 dias 
 
• ELISA SANDUICHE - TERCEIRA GERAÇÃO: 
• Detecta IgG e IgM 
• Antígeno na placa + antígeno conjugado 
• Soroconversão do vírus: 20 a 30 dias 
 
• ELISA SANDUICHE - QUARTA GERAÇÃO: 
• Mudança: detecção de antígeno (p24) e anticorpo 
• Anticorpo anti p24 
• Tempo de 15 dias 
•
• TESTES RÁPIDOS: 
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• WESTERN BLOT: 
 
• Tira com antígenos espalhados por ela 
• Anticorpos do paciente 
• Anticorpos conjugados + reagente 
• Queima do filme fotográfico 
• Descobrir a quais proteínas do vírus o paciente desenvolveu 
• Para dizer que o resultado foi positivo, deve ter pelo menos duas dessas: 
• P24 
• Gp41 
• Gp 120 e gp 160