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Capítulo 4 • Estrutura e função das proteínas 157 variedade de funções biológicas. As células utilizam essas máquinas proteicas pe- los mesmos motivos que nós, humanos, criamos máquinas elétricas e mecânicas: para qualquer trabalho, o emprego de processos coordenados espacial e temporal- mente é muito mais eficiente do que o uso sequencial de ferramentas individuais. COMO AS PROTEÍNAS SÃO ESTUDADAS Compreender como uma proteína funciona exige análises bioquímicas e estrutu- rais detalhadas – e ambas requerem grandes quantidades de proteína na forma pura. No entanto, isolar um único tipo de proteína a partir de milhares de ou- tras proteínas presentes na célula não é uma tarefa trivial. Por muitos anos, as proteínas foram purificadas diretamente de suas fontes − os tecidos em que eram expressas em maior quantidade. Essa técnica era bastante inconveniente, exi- gindo, por exemplo, viagens diárias a abatedouros. Ainda de maior importância, a complexidade dos tecidos intactos e dos órgãos é uma grande desvantagem no processo de purificação de moléculas específicas, pois uma longa série de etapas cromatográficas se faz necessária. Esses procedimentos não apenas requerem semanas para a sua realização, como também apresentam rendimento de pou- cos miligramas de proteína purificada. Hoje, as proteínas são frequentemente isoladas de células cultivadas em la- boratório (ver, p. ex., Figura 1-38). Essas células costumam ser alteradas para a produção de grandes quantidades de uma dada proteína, utilizando técnicas de engenharia genética descritas no Capítulo 10. Essas células modificadas permi- tem, com frequência, a obtenção de grandes quantidades de proteína pura em apenas poucos dias. Nesta seção, descrevemos como as proteínas podem ser extraídas e purifi- cadas a partir de células em cultura e outras fontes. Descrevemos como essas proteínas são analisadas para a determinação da sua sequência de aminoácidos e da sua estrutura tridimensional. Por fim, discutimos como os avanços técnicos permitem que as proteínas sejam analisadas, catalogadas, manipuladas e mes- mo planejadas a partir de uma sequência linear de aminoácidos. Proteínas podem ser purificadas a partir de células e tecidos Seja a partir de um pedaço de fígado, ou a partir de uma cultura de células, de bactérias, leveduras, ou células animais modificadas para produzir uma proteína de interesse, a primeira etapa de qualquer procedimento de purificação é o rompi- + + ATP ATP ATP ATP ADP ADP Pi Pi ADP Pi ADP Pi QUESTÃO 4-8 Explique por que as proteínas hipo- téticas da Figura 4-47 apresentam uma grande vantagem no processo de abertura do cofre se exercerem suas funções em conjunto na forma de um complexo proteico, em com- paração a exercerem suas funções de modo individual, de maneira se- quencial mas independente. Figura 4-47 “Máquinas proteicas” podem desempenhar funções complexas. Essas máquinas proteicas são compostas por proteínas individuais que colaboram en- tre si para desempenhar uma tarefa específica (Animação 4.11). O movimento des- sas proteínas em geral é coordenado pela hidrólise de um nucleotídeo ligado, como o ATP. Mudanças conformacionais desse tipo são particularmente úteis para a célula, se ocorrerem em um complexo proteico em que a atividade de diversas proteínas diferentes possa ser coordenada pelos movimentos do complexo. Alberts_04.indd 157Alberts_04.indd 157 16/01/2017 09:25:0616/01/2017 09:25:06
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