Questões - técnicas assépticas e meio de cultura

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QUESTÕES DE APROFUNDAMENTO DE CONTEÚDO 
AULA SEMEADURA E MEIOS DE CULTURA 
1. Ao realizar as técnicas assépticas deve-se trabalhar por trás do fogo e na zona de esterilização.
2. Cite tipos de semeios realizados no laboratório de bacteriologia clínica. 
- Semeio em picada ou profundidade
- Semeio por esgotamento
- Semeio para urocultura
- Semeio na superfície do ágar inclinado
- Semeio em picada ou profundidade e na superfície do ágar inclinado
- Semeio com swab
3. O microrganismo Staphylococcus aureus tem identificação presuntiva pelo ágar manitol salgado.
4. O que ocorre para que esta identificação seja possível?
O meio por ser muito salgado não permite que outros microrganismos além do Staphylococcus aureus cresçam, com exceção de Enterococcus. O meio ágar manitol salgado, originalmente rosado, na presença dessa bactéria sofre viragem para um meio amarelo, devido à degradação do manitol com formação de ácido. Outras espécies de Staphylococcus podem fazer viragem de meio, e nesse caso é feito o teste da coagulase, já que o Staphylococcus aureus é o único da espécie que é coagulase positiva.
5. Qual meio de cultura é utilizado para identificação do grupo sorológico D (Enterococcus)? Determine o fundamento desta identificação.
Ágar bile esculina. Na presença de bile, o Enterococcus hidrolisa a esculina, produzindo esculetina e glicose. Essa esculetina reage com o ferro do meio, originando uma coloração negra.
6. Quais as características do meio E M B? Quais os carboidratos presentes, inibidores e indicadores?
O meio E M B é um meio seletivo e diferencial que inibe bactérias gram positivas e diferencia fermentadores de lactose de não fermentadores. Os carboidratos presentes são lactose e sacarose; os inibidores e indicadores são eosina e azul de metileno.
7. O que indica uma coloração de colônia vermelha no meio MacConkey?
Bactéria gram negativa que fermenta lactose. Nesse caso, Escherichia coli.
8. O que indica colônias incolores nos meios E M B e MacConkey?
Bactérias gram negativas que não fermentam lactose, como Proteus spp., Salmonella spp. e Shigella spp.
9. Colônias pequenas, secas com brilho metálico e grandes, mucoides geralmente com centro escuro e bordas mais claras indicam respectivamente as características dos micro-organismos Escherichia coli e Klebsiella spp.
10. Quais as hemólises que podem ser observados no meio ágar sangue? 
Alfa-hemólise (hemólise parcial; halo verde), beta-hemólise (hemólise total; halo transparente) e gama-hemólise (não tem hemólise).
11. Qual o gênero que tem especial importância na identificação desta hemólise?
Streptococcus.
12. O meio SIM é utilizado rotineiramente para determinação de: motilidade, produção de H2S e indol.
13. Explique o que ocorre para que o indol seja detectado no meio SIM.
As bactérias que possuem a enzima triptofanase degradam o triptofano existente no meio de cultura, produzindo indol, piruvato e amônia. Após a adição pdimetilaminobenzaldeído (reativo de kovacs) há uma formação de anel rosa pink na superfície do tubo, indicando a formação de indol.
14. Explique o que ocorre para que o H2S seja detectado no meio SIM.
Se a bactéria produzir a enzima tiossulfato redutase, o tiossulfato de sódio do meio SIM é degradado, formando H2S. Esse H2S reage com o sulfato ferroso, formando um precipitado preto de sulfeto ferroso, o qual indica a presença do H2S.
15. Qual a estrutura da célula bacteriana que é responsável pela motilidade?
Os flagelos.
16. Determine se os micro-organismos abaixo possuem motilidade:
Strept. Pyogenes não (cocos)
Staphyl. Aureus não (cocos)
Enterococcus não, mas às vezes são móveis por flagelos delicados (exceção dos cocos)
Bacillus subtilis: sim (bacilo)	
Klebsiella não (exceção dos bacilos)
Escherichia coli sim (bacilo)
Salmonella sim (bacilo)
Shigella não (exceção dos bacilos)
17. Qual a utilidade do meio tioglicolato, o fundamento do teste e as possíveis leituras?
O meio Tioglicolato verifica o requerimento de oxigênio, já que o oxigênio possui dificuldade de atravessar o ágar devido à sua viscosidade. Anaeróbicos obrigatórios crescem no fundo do tubo, aeróbicos obrigatórios crescem na superfície do tubo e anaeróbios facultativos crescem em toda a extensão do tubo.
18. Como se comportam os micro-organismos abaixo no meio tioglicolato:
Staphyl. Aureus: Anaeróbio facultativo (crescimento em toda extensão)
Enterococcus: Anaeróbio facultativo (crescimento em toda extensão)	
Bacillus subtilis: Anaeróbio facultativo (crescimento em toda extensão) ou só na superfície (aeróbio)
Klebsiella: Anaeróbio facultativo (crescimento em toda extensão)
Escherichia coli: Anaeróbio facultativo (crescimento em toda extensão)
Salmonella: Anaeróbio facultativo (crescimento em toda extensão)
Shigella: Anaeróbio facultativo (crescimento em toda extensão)
Pseud. Aeroginosa: Aeróbios obrigatórios (crescimento só na superfície)
Clostridium: Anaeróbicos obrigatórios (crescimento no fundo)
	
19. No meio ágar sangue Staphylococcus aureus formam colônias amareladas podendo ou não apresentar Beta hemólise.
20. Quais as características das colônias Streptococcus pyogenes no meio ágar sangue?
Colônias puntiformes e translúcidas com beta hemólise.
21. Quais as características das colônias Enterococcus no meio ágar sangue?
Colônias puntiformes e translúcidas podendo apresentar os 3 tipos de hemólise (beta, alfa ou gama).