Exercícios de microbiologia clínica

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UNIVERSIDADE ESTADUAL DA PARAÍBA CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E DA SAÚDE CURSO: FARMÁCIA
COMPONENTE CURRICULAR: MICROBIOLOGIA CLÍNICA DOCENTE: 
DISCENTES (GRUPO 1): BEATRIZ MARIA
CARLOS ERON
ATIVIDADE DE IDENTIFICAÇÃO DE BACTÉRIAS COM O PERFIL BIOQUÍMICO APRESENTADO EM CADA TUBO
CAMPINA GRANDE - PB
12 de Maio de 2021
GRUPO 1
Meio de cultura TSI (Triple Sugar Iron)
Produção de gás elevada a partir da glicose, fazendo com que haja o levantamento do meio de cultura. A cor original do meio de cultura TSI é vermelho. Após o semeio da bactéria e da incubação, o meio encontra-se amarelado. Isso implica que a bactéria fermentou a lactose e sacarose.
Meio de cultura SIM
Verifica-se que a bactéria é móvel e produz indol. Para saber se a bactéria é produtora de indol, é necessária a utilização do reagente de kovacks (dimetilaminobenzaldeído), onde o adiciona o reagente na superfície do meio. Neste caso, as bactérias produzem a enzima que degradam o aminoácido triptofano (pelo fato de o reagente ficar vermelho) dando origem ao indol. Então é indol positivo.
Meio de Ureia
Neste caso não ocorreu alcalinização do meio, ou seja, a bactéria não utilizou a ureia para seu metabolismo. Logo, a bactéria não produz a enzima urease. Sendo assim é ureia negativa.
Meio de Lisina Descarboxilase (LIA)
Neste caso a bactéria é produtora da enzima lisina descarboxilase, houve a liberação de CO2 e descarboxilação da lisina com produção de cadaverina. Isso se explica pelo fato de o meio encontrar-se na cor roxa. Então, lisina positiva.
 Meio Citrato de Simmons
Neste caso a bactéria não utiliza o Citrato como fonte de carbono. Isso explica o fato de que o meio continua verde. Caso a bactéria utilizasse o Citrato, o meio estaria azulado devido à alteração do PH. Então, Citrato negativo.
Meio de Fenilalanina
Neste caso, é necessário a utilização do reagente cloreto férrico a 10%. Não houve mudança na cor do meio, então essa bactéria não é produtora da enzima fenilalanina desaminase. Logo é fenilalanina negativa.
	IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS
	
	MEIO
	E.COLI
	
	
	SACAROSE
	(+)
	+
	LACTOSE
	(+)
	+
	GLICOSE (GÁS)(+)
	+
	INDOL
	(+)
	+
	UREIA
	(-)
	-
	LISINA
	(+)
	+
	CITRATO
	(-)
	-
	FENILALANINA (-)
	-
Echerichia Coli
Agar EMB (Eosina Metileno Blue)
EXERCÍCIO SOBRE UROCULTURA
COLÔNIAS SEM COR
1- Qual a contagem de colônias desta placa?
Aproximadamente 84 unidades formadoras de colônia.
2- A contagem deveria ser realizada no ágar EMB ou CLED?
Ágar CLED
2- As Colônias são lac + ou lac -?
Lac -
3- Quais	os	testes	laboratoriais	que	devem	ser	realizados	para Identificação destas colônias?
Teste de Gram, MTS, TSI, Fenilalanina, SIM, Urease, teste de descarboxilase, teste de citrato.
4- Qual gênero/espécie bacteriana pode se tratar essa Cultura? Explique.
É uma bactéria Gram -, devido ao fato de que cresceu em ágar EMB. Proteus vulgaris.
5- Como poderia ser o sedimento desta urina? De uma paciente grávida e outra não grávida?
No sedimento, pode ter células epiteliais, cristais, hemácias, fungos, leucócitos, cilindros e bactérias. Nas grávidas em função da baixa imunidade, pode haver ITU, SEM piúria. Isso também pode ocorrer com crianças, idosos e imunodeprimidos em geral. Daí a importância da cultura.
6- Como seria a pesquisa de nitrito na fita de urina?
A fita é submergida na urina e é esperada a mudança de cor, caso seja
identificada uma cor rosa escuro, identifica-se a presença de nitrito.
7- Qual a característica morfo-tintorial destas colônias bacterianas?
Aparece macroscopicamente em uma cultura sólida como anéis de crescimento concêntricos que surgem de uma colônia individual ou do inóculo inicial. Essa forma de crescimento se deve à diferenciação das células no meio líquido, que uma vez que entram em contato com um meio sólido, como o ágar, mudam de tamanho, alongam sua forma e aumentam a síntese de flagelina. Suas colônias aparecem na cor cinza.
COLÔNIAS COM COR
1- O semeio do EMB está correto?
Não. É necessário fazer um traço dividindo o meio da placa e depois passa semeando fazendo estrias laterais.
2- As colônias são lac + ou Lac-?
Ambas são Lac +
3- Qual a contagem das colônias?
Pega 0,1 ml da solução que foi diluída (1:10.000 / 1:100.000) x pela quantidade de colônias que há na placa x 10
Utiliza a alça calibra de 0,01 e multiplica por 100 cada colônia ou utiliza a alça de 0,001 e multiplica por 1000 cada colônia
4- Cite 2 bactérias que poderiam ter essas características de utilização de lactose na placa
Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli.
5- Qual a provável contagem de piócitos deste paciente?
Leucócitos, bactérias e fungos. Acima de 8 piócitos no campo.
6- A contagem de piócitos poderia ser diferente. Por quê?
Pode ocorrer presença de leucocitúria, leucócitos na urina, com um resultado de urocultura sendo negativa, neste caso pode ser uma glomerulonefrites exsudativas ou proliferativas, nefrites túbulo intersticiais, pós-operatórios de prostatectomia, quadros febris na infância, calculose das vias urinárias, infecção por clamídia, rejeição de enxerto renal e tuberculose de vias urinárias.
Como existe uma certa dificuldade de coleta, pode realizar o processo de cultura por semeio, ao invés do método de sedimento.
1- Cite uma bactéria que poderia estar causando Infecção de acordo com esta urocultura.
Staphylococcus aureus
2- Cite 2 testes de identificação que poderiam ser realizados para esclarecer qual a bactéria presente na placa.
Coagulase livre e Staphytest
3- Qual a característica morfo-tintorial desta bactéria?
São cocos gram-positivos, pois houve crescimento apenas no Ágar CLED, e não no EMB.
4- Qual o resultado do teste de nitrito na fita de urina, neste caso?
Bactérias gram-positivas não transformam nitrato em nitrito, por tanto é muito provável que o teste se apresente negativo para nitritos.
Observe o Agar Manitol salgado demonstrado nesta atividade.
Pergunta-se:
1- Este meio de cultura é destinado ao crescimento de quais bactérias apenas? Por quê? (0,5)
Meio de cultura seletivo para a bactéria Staphylococcus aureus, pela contração de NaCl.
2- As bactérias crescidas neste meio, faz com que se suspeite de qual bactéria? Explique por que elas crescem com esta cor no meio de cultura (0,5).
Staphylococcus aureus. Pois fermenta manitol e produz colônias grandes e formam uma zona amarela. A degradação do manitol junto a produção de ácido muda a cor do meio de rosado para amarelo.
3- Cite 2 testes laboratoriais que permitam confirmar esta suspeita (0,5).
Novobiocina, DNAse, Staphytest, coagulase, catalase.
4- Caso tivesse crescido nesta placa uma bactéria apresentando outra coloração, qual seria a outra coloração? Nesse caso, de qual (is) bactéria(s) (gênero e espécie) poderia se tratar? (0,5)
Os Staphylococcus não-patogênicos produzem colônias pequenas e rodeadas de uma zona vermelha. Os Staphylococcus epidermidis produzem colônias brancas.
5- A bactéria crescida nesta placa poderia crescer também em outro meio de cultura. Qual o meio e como ela cresceria? (0,5)
Ágar sangue. Cresceria como colônias puntiformes, podendo haver hemólise beta ao redor da mesma.
6- Cite a bactéria, o teste laboratorial e o seu RESULTADO relacionado com:(0,25 cada; 2 pontos)
a- Bactérias que crescem no agar manitol salgado e causam infecções urinárias em mulheres jovens:
BACTÉRIA: Staphylococcus saprophyticus.
TESTE E SEU RESULTADO: Resistência à novobiocina. Se apresentar halo maior ou igual a 16mm, apresenta resistência.
b- Cocos Gram-positivos, que não crescem neste meio, catalase negativa que podem causar septicemia em neonatos:
BACTÉRIA: Streptococcus agalactiae.
TESTE: Teste de CAMP. Quando positivo, apresenta formação de seta ou meia-lua convergindo para o S. aureus, na interseção do crescimento das duas bactérias, pelo fato das cepas produzirem o fator CAMP, que atua com a beta- hemolisina produzida pela bactéria em questão.
c- Uma bactéria catalase negativacom hemólise alfa. BACTÉRIA Streptococcus pneumoniae.
TESTE: Teste de solubilidade em bile, apresenta-se positivo e identifica a espécie em questão, caso o tubo teste apresente turvação visivelmente menor que o tubo controle ou se estiver límpido.
d- Cocos Gram-positivos, que não crescem em agar manitol salgado capazes de serem isolados a partir das fezes:
BACTÉRIA: Enterococcus spp.
TESTE: Teste de bile esculina e teste em NaCl 6,5%.
Bile esculina positivo: Cor preta no meio, o que indica a hidrólise da esculina.
NaCl positivo: acidificação do meio, com variação da cor púrpura para amarelo, indicando crescimento bacteriano e teste positivo, indicam que é uma bactéria do gênero Enterococcus.
7- Como saber se a bactéria presente nesta placa poderia ser uma cepa temida no ambiente hospitalar? No caso de se tratar da bactéria hospitalar, como ela é designada? (0,5)
Se a bactéria for MRSA, que são os Staphylococcus aureus resistentes à meticilina, ela faz parte das bactérias temidas no ambiente hospitalar, ou seja, as superbactérias, que possuem resistência a vários antibióticos. A fim de descobrir suas resistências, é feito o antibiograma, para que sejam avaliados quais antibióticos apresentam ou não resistência.