Baixe o app para aproveitar ainda mais
Prévia do material em texto
tipos basicos de Células PROCARIÓTICAS: exemplo: bactéria (e. coli) sem núcleo unicelulares não possuem citoesqueleto/organelas citoplasmáticas) simples DNA circular são menores ribossomos dis- persos no citoplasma função dos mesos- somos = respiração celular Diferentes formas das bacterias: EUCARIÓTICAS: exemplos: plantas e animais possuem núcleo uni/pluricelulares possuem citoesqueleto e diferentes organelas citoplas- máticas complexas DNA linear são maiores material genético = separado do citoplasma função da mitocôndria: respiração em outras células possuem diferentes formas e tamanhos ESTRUTURA: NÚCLEO:contém a informação genética da célula (dna é a maior organela com exceção na célula vegetal = vacúolo ORGANELAS CITOPLASMÁTICAS: formam comparti- mentos, onde se localizam as diferentes atividades meta- bólicas = cada organela tem sua função linear) = proteção do dna CITOESQUELETO: rede de filamentos que se estende pelo citoplasma = fornece a estrutura das células responsável pelo transporte celular Tecnicas de biologia celular: TÉCNICAS LABORATORIAIS:estudam a estrutura e funções das células MICROSCÓPIA ÓPTICA (1965): permitiu a crescente visualização de detalhes da estru- tura celular hoje: ampliação em até 1000x = 👀 células, organelas maiores (mitocôndrias, núcleos) e citoplasma 👀 e as células são: 1) coradas (coloração) = aumentar o contraste 2) tratadas com fixadores = preservar suas estruturas UNIDADES DE MEDIDAS ATUAIS: limite do olho humano: 100 µm limite do microscópio óptico: 100 nm limite do microscópio eletrônico: 0,1 nm células: 10 µm bactérias: 1 µm COMPONENTES MECÂNICOS: Base/Pé: peça que dá sustentação ao microscópio Braço: é um suporte para as demais peças do micros- cópio, além de permitir o transporte dele para outros lugares Tubo/Canhão: utilizado como suporte para as lentes oculares Charriot: permite o movimento da lâmina sobre a platina Revólver: peça giratória que suporta as lentes objetivas Lentes Objetivas: ampliam a imagem da lâmina observa- da (4 objetivas de aumento 4x, 10x, 40x e 100x) Lentes Oculares: ampliam a imagem formada pelas len- tes objetivas Platina/Mesa: local onde se apoia a lâmina para obser- vação da amostra Pinças: ajudam a fixar a lâmina que vai ser observada Fonte de Luz: lâmpada que reflete luz, possibilitando a visibilidade da lâmina Parafuso Macrométrico: altera a altura da platina, atra- vés de grandes movimentos, auxiliando o ajuste do foco Parafuso Micrométrico: altera a altura da platina, sutil- mente, fornecendo o ajuste final do foco o aumento total do objeto observado é calculado como: VALOR DA OBJETIVA X VALOR DA OCULAR MICROSCOPIA ELETRÔNICA (1930-1940): o microscópio eletrônico apresenta maior poder de reso- lução, permitindo um aumento de mais de 100 x na ca- pacidade de resolução do microscópio ótico, pois utiliza um feixe de elétrons usada em pesquisas TIPOS: MICROSCOPIA ELETRÔNICA DE TRANSMISSÃO: similar ao microscópio ótico, mas com maior poder de resolução MICROSCOPIA ELETRÔNICA DE VARREDURA: dá uma imagem tridimensional da célula (3D) utiliza os elétrons que são emitidos da superfície de amostra a amostra é: fixada, desidratada e coberta com uma camada fina de metal pesado = varrida por um feixe de elétrons : Etapas de preparacao de estudo: A preparação do material que se deseja observar deve o- bedecer às seguintes etapas de confecção: 1) fixação 2) inclusão e etapas precedentes 3) microtomia 4) coloração ou contrastação MAIORIA USA: • fixação • coloração FIXAÇÃO: 1ª etapa da histotécnica assegura a preservação das estruturas morfológicas das células/tecidos usam-se meios fixadores químicos (+ indicados) e físi- cos (aquecimento/resfriamento) exemplo: formaldeído, ácido cético evita autólise impede a atividade/proliferação de bactérias endurece a célula para que resista as próximas etapas AMOSTRA DE TECIDO MINERALIZADO (ósseo) PRECISA SER DESCALCIFICADO PARA PERMITIR A FIXAÇÃO (tirar o cálcio) INCLUSÃO E ETAPAS PRECEDENTES: As etapas que seguem têm por objetivo proceder com a infiltração de substâncias endurecedoras nos fragmen- tos dos órgãos, para permitir a obtenção dos cortes ex- tremamente delgados etapas rigorosamente sequenciais e obrigatórias se fo- rem mal executadas = má qualidade do material para a- nálise 2.1 DESIDRATAÇÃO: é retirada a água da peça utilizando álcoois graduados. para microscopia eletrônica é usado acetona 2.2 DIAFANIZAÇÃO: é retirado o álcool da peça, tornan- do-a transparente. utiliza uma substância chamada “xilol” MICROTOMIA: microscópio óptico microscópio eletrônico é a obtenção de cortes (delgados) (micrótomo) após serem cortados, são coletados em lâminas de vidro para o microscópio óptico Micrótomos que cortam tecidos em parafina = navalha de aço Micrótomos que cortam tecidos em resina = navalha de vidro/ diamante COLORAÇÃO: (microscópio óptico) maioria das estruturas celulares/teciduais = transparen- tes, incolores e com índice de refração muito próximo dificultam a observação utilização de corantes histológicos é associado o caráter básico ou ácido do corante a ser utilizado ao do material a ser evidenciado Moléculas ácidas (DNA/RNA) = corantes básicos Moléculas básicas (proteínas citoplasmaticas) = corantes ácidos OUTRAS TÉCNICAS: FRACIONAMENTO SUBCELULAR: Centrifugação Diferencial: estuda as funções dos vários componentes das células com base em seus tamanhos e densidades 1ª ETAPA = ruptura da membrana plasmática 2ª ETAPA = fracionamento através de centrifugações 3ª ETAPA = sedimentação ISOLAMENTO DE MACROMOLÉCULAS: O grau e tipo de interação com a matriz da coluna é variável: Interação de troca iônica = matriz com carga + ou - Interação hidrofóbica = partículas - superfície hidrofóbica Interação por afinidade = separação de moléculas que in- teragem com alto grau de especificidade (antígeno e anticorpo) CULTURA DE CÉLULAS ANIMAIS: Cultivo de Células: estudo do crescimento e da diferencia- ção celular; manipulação genética 1ª ETAPA = isolamento das células a partir de pedaços de tecido 2ª ETAPA = as células são adicionadas em placas de cul- tivo com meio de cultura 3ª ETAPA = trocas de meio de cultura :
Compartilhar