microbiologia

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UNIVERSADADE PAULISTA - UNIP 
 
 
 
 
 
 
RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS 
 
 
 
 
 
 
CURSO: Farmácia 
DISCIPLINA: MICROBIOLOGIA 
 
ALUNO: Marivalda dias sousa 
 
 
R.A:055280 
POLO: Campinas - Centro 
 
 
 
DATA:30/05/2022
 
 
 
 
Introdução 
os microrganismos estão presentes no dia a dia , trazendo benefícios ou 
prejuízo a saúde . 
Quando se fala de “alimentos”, são consideradas substâncias processadas, 
semiprocessadas ou em seu estado natural. Também estão inclusas bebidas, goma 
de mascar e as demais substâncias utilizadas em sua elaboração, preparo ou 
tratamento, exceto os cosméticos, o tabaco e as substâncias utilizadas unicamente 
como medicamentos. 
Contaminações na cadeia de produção.Os microrganismos, especialmente as 
bactérias, estão espalhados por toda parte. Eles podem estar presentes no ar, água, 
solo, superfícies de plantas, boca e intestinos de animais e humanos. 
 
Além disso, matérias-primas, insumos e embalagens também podem ser fontes 
de contaminação. Ainda que os processamentos, para a redução ou eliminação de 
micro-organismos, sejam conduzidos de formas adequadas, a recontaminação pode 
ocorrer. Tanto nas indústrias quanto nos nossos lares e estabelecimentos comerciais. 
Vale ressaltar que, como cadeia de produção entendem-se as seguintes fases: 
 
Matéria-prima e insumos alimentares; 
Transporte; 
Processamento; 
Transporte de alimentos; 
Armazenagem de alimentos 
Transporte; 
Comercialização; 
Transporte; 
Consumo. 
Os produtos de microbiologia 
 
Importância das análises na microbiologia de alimentos.Sem dúvida, são as 
análises a principal forma de identificar microrganismos indesejados e focos de 
contaminação. Desse modo, é possível buscar a redução e o combate deles, em 
qualquer ponto da cadeia alimentar, através de estudos e pesquisas.(GVS) 
Microrganismos deteriorantes 
São os microrganismos causadores de alterações químicas, resultando no que 
chamamos de deterioração microbiana, promovendo alteração da cor, sabor, odor, 
textura e aspecto do alimento. ( br.quality) 
Microrganismos patogênicos 
São microrganismos que podem representar riscos à saúde tanto do homem 
como de animais, promovendo as Doenças Transmitidas por Alimentos (DTA). A 
maioria dos surtos de DTA é decorrente da manipulação e preparação inadequada 
dos alimentos. Os principais microrganismos patogênicos transmitidos pelos 
alimentos são: Salmonella sp, Listeria monocytogenes, Clostridium botulinum, 
Clostridium perfringens, Bacillus cereus e Staphilococcus aureus. ( br.quality) 
A deterioração de alimentos é o processo em que um produto alimentar se torna 
impróprio para ingestão pelo consumidor. A causa de tal processo é devido a muitos 
fatores externos como um efeito colateral do tipo de produto que é, bem como o 
produto é embalado e armazenado. Devido à deterioração dos alimentos, um terço 
dos alimentos produzidos no mundo para o consumo humano é perdido todos os anos. 
( Mauricio ) 
 
 
Aula 1- roteiro 1 
Determinação de alguns fatores intríseco em alimentos 
 
Objetivo: Observar dois fatores intrínsecos muito determinantes para a 
caracterização de um alimento: a atividade de água e a presença de substâncias 
naturalmente microbianas. 
Fatores intrínsecos são as características físico químicas do alimento, a 
atividade da água influencia diretamente no crescimento dos microrganismos, pois a 
água livre presente no alimento realiza as reações metabólicas e modular suas 
reações químicas que ir ao gerar o ácido lático. 
Começou se realizando a pesagem em vidros relógios com 5g de farinha de 
trigo em 3 Becker 50ml e adicionou-se no primeiro cloreto de potássio, a segunda 
acetato de sódio e na terceira cloreto de sódio e acrescentou-se uma quantidade 
pequena de água e 1 Becker com 50g de farinha de trigo e uma pequena quantidade 
pequena de alho macerado em vidro relógio e colocamos no dessecador. 
Na semana seguinte de incubação, notamos as seguintes reações: 
 
- Alho - se apresentou no estado de dessecamento e o trigo com os seguintes 
reagentes apresentou: 
- Acetato de Sódio- maior umidade, formou grumos. 
- Cloreto de Sódio-maior ativo de água, adesão nas paredes do Becker. 
- Cloreto de Potássio- apresentou leve adesão nas paredes do Becker. 
 
Parte 02- Presença de substancias antimicrobianas naturais. 
 
Em uma placa de petri identificada em seis radiais com os seguintes 
antimicrobianos: 
Açafrão, canela, orégano, cravo moído, pimenta do reino e alho, 
Com o auxílio do bico de Bunsen para esterilizar a abertura do tubo de ensaio 
contendo a bactéria Staphylococcus áureos, estriamos sobre uma placa de Petri 
grande com o auxílio de Swab , em seguida acrescentamos os seis tipos de 
antimicrobianos . 
A placa foi entubada a uma temperatura de 35°C por 24 - 48 horas. 
Observou as seguintes reações: 
Antimicrobianos naturais Ação 
 
Alho Maior efeito inibitório antibacteriano 
Açafrão Efeito moderado antibacteriano 
Canela Efeito inibitório antibacteriano 
Orégano Crescimento bacteriano, inibição fúngica 
Pimenta Crescimento bacteriano, inibição fúngica 
Cravo Inibição bacteriana 
Questões para fixação do conteúdo: 
 
1). Explique a relação entre Aa dos alimentos e a propensão ás 
contaminações microbianas. 
R- Se armazenarmos um alimento de baixa Aa, ou seja, baixa UR, em um 
ambiente com alta UR, a Aa do alimento aumentará, pois o alimento tenderá a 
absorver a água daquele ambiente. O contrário também ocorre, ou seja, o 
armazenamento de um alimento de alta Aa (alta UR) em um ambiente seco (baixa 
UR), fará com que esse alimento dessorva água, ou seja, libere água para a atmosfera 
na tentativa de atingir o equilíbrio (umidade relativa de equilíbrio – URE) e, portanto, 
tenderá ao ressecamento. 
 
2). Se a atividade de água de um determinado alimento é menor que a do 
ambiente de armazenamento, a tendência é ocorrer a desidratação do produto 
ou seu intumescimento? Porque? 
R - Se a Atividade de água de um determinado alimento é menor que a do 
ambiente de armazenamento a tendência é ocorrer a desidratação do produto. A 
Atividade de água determina a água que se encontra disponível para o crescimento 
microbiano e o avanço das diferentes reações enzimáticas. 
3). Explique porque alguns alimentos utilizados nesta prática inibiram o 
crescimento da cepa indicadora utilizada? 
R- Alguns alimentos utilizados em aula prática contém óleos essenciais, por 
este motivo podem apresentar compostos capazes de inibir direta ou indiretamente os 
sistemas enzimáticos bacterianos, mesmo que a maioria dos microrganismos seja 
ainda desconhecida. 
 
 
Aula 1 Roteiro 2 
Produção de iogurte 
 
Objetivo: observar o processo de fermentação (nomenclatura usada na 
indústria de fermentação: mosto, inóculo, vinho, uso ou não de oxigênio). Discutir a 
fermentação Lática. 
 
Efetuou se o cálculo proporcional de açúcar para acrescentar no iogurte. 
170__100% 
X ____2% X=3,4g 
 
Pesou se 3,4 de açúcar, em um Becker de 250ml e despejou-se 1 pode de 
iogurte de 170g, homogeneizando e levou-se para a estufa a 37°C por 1 hora, em 
seguida acrescentou-se 850ml de leite com auxílio de uma bureta em um Becker de 
2 litros e levou-se para aquecimento sobre um tripé com tela de amianto em 
aquecimento com bico de Bunsen até atingir 80°C por 15min acompanhando a 
temperatura com o termômetro. 
Após esses 15min, levou-se o leite para um banho de água fria por 5 min, pois 
a água não estava tão gelada para pasteurização, em seguida separou-se uma 
pequena porção de leite (100Ml) ainda quente para dissolver 5g de gelatina, 
adicionou-se também sacarose a 10% (75g). 
Adicionou-se cerca de 40g de iogurte ativado (inóculo) quando a temperatura 
estava próxima de 40°C. 
Cobriu-se o recipiente com papel alumínio e incubou-se em estufa a 37°C 
durante no mínimo 1 e no máximo 2 dias. 
Observou-se que o leite passou de estado liquido para um estado consistentede um flam por conta da adição da gelatina, ocorreu a fermentação latica, , as 
bactérias fazem a fermentação através do lactato, através da desnaturação da 
proteína do leite, ocorrendo a coagulação, a gelatina traz melhoras na textura do 
iogurte. 
O processo ocorreu na fermentação da lactose onde as bactérias transformam 
o Ácido lático e coagulam a caseína, alterando a textura do iogurte, deixando- o mais 
consistente. 
As bactérias saíram da fase Lab e através da inclusão de sacarose e o tempo 
em temperatura a 37 °C, levou as bactérias para a fase exponencial, levando ao seu 
crescimento e ação. 
A fermentação e um processo metabólico que acontece na ausência de 
oxigênio 
Depois de pronto foi possível identificar a mudança no sabor, odor e textura 
Sabor não foi realizado.Efetuamos o cálculo proporcional de açúcar para 
acrescentar no iogurte. 
170-100% 
X-2% = 3,4g 
 
Pesou-se 3,4 de açúcar, em um Becker de 250ml e despejamos 1 pode de iogurte de 
170g, homogeneizando e levamos para a estufa a 37C por 1 hora, em seguida 
despejou-se 850ml de leite com auxílio de uma bureta em um Becker de 2 litros e 
levamos para aquecimento sobre um tripe com tela de amianto em aquecimento com 
bico de busch até atingir 80C° por 15min acompanhando a temperatura com o 
termômetro. 
Após esses 15min, levamos o leite pata um banho de água fria por 5 min, pois a água 
não estava tão gelada para pasteurização, em seguida,enquanto se esperava o 
resfriamento do leite, colocou-se uma pequena porção de iogurte natural em uma 
lâmina com azul de metileno, e observamos ao microscópio para encontrarmos as 
bactérias. Foi possível observar a presença de “cocos” e “bacilos”, 
 
Questões para a fixação do conteúdo: 
1). Quais são os principais produtos metabólicos produzidos em uma 
fermentação lática? 
R- Na fermentação lática, o NADH transfere seus elétrons diretamente para o 
piruvato, gerando ácido lático (C3H6O3) como subproduto. Esse tipo de fermentação 
é realizado por bactérias que fermentam o leite, gerando produtos como iogurtes, que 
tem o sabor levemente azedo devido ao ácido lático 
2). Explique o princípio do processo de pasteurização para o controle de 
microrganismos. 
R- Este método foi desenvolvido por Louis Pasteur em 1846. Consiste em 
aquecer o produto em uma determinada temperatura, por um certo tempo e logo após, 
resfriá-lo. Este processo reduz o número de microorganismos, mas não assegura sua 
esterilização. 
3). Explique porque os produtos lácteos não podem ser esterilizados em 
autoclave (vapor úmido sob pressão). 
R- Nessas condições ocorre a desnaturação das enzimas e proteínas 
estruturais, levando à morte das células microbianas. A autoclavagem é um método 
de esterilização muito eficiente, porém não pode ser utilizada para materiais sensíveis 
ao calor ou umidade, uma vez que pode danificá-los 
Aula 2- roteiro 1 
Destilação de garapa fermentada 
Objetivo: Entender o processo de fermentação alcoólica. Comparar as várias 
fermentações alcoólicas: álcool combustível, pinga, vinho e cerveja. 
 
Foi realizada a diluição do melaço de cana. 
A diluição foi feita de (1:1)330g de melado/330ml de água destilada. 
Nesse experimento podemos observar a atividade das bactérias. 
Realizou-se a fermentação do melaço de cana, onde o produto final é o etanol 
e se transforma em cachaça. 
O processo de fermentação e realizado por leveduras, pois as bactérias são 
produtoras de ácidos. 
O processo que será realizado é de destilação. 
Em 600ml da diluição, adicionou-se 15g de levedura e sulfato de amônio (ponta 
de espátula), que será fonte de nitrogênio para as leveduras, e colocou-se, dividindo 
300ml em dois balões volumétricos de 1 litro, vedados com auxílio de luvas de látex e 
fitas para lacrar para que não houvesse vazamento de ar e colocou-se de repouso 
para que pudéssemos observar a reação da amostra. 
 
 
1). Explique o mecanismo de funcionamento de um destilador. 
R- É um método de separação utilizado para separar um líquido que possui um sólido 
dissolvido. A separação ocorre porque apenas o líquido passa pelo processo de 
vaporização durante o aquecimento. Após a montagem do sistema de destilação 
(mostrado no item a), ocorre o seguinte: 
 Adiciona-se a mistura ao balão de destilação; 
 Logo em seguida, aquece-se a mistura no balão e, com isso, o líquido começa 
a se transformar em vapor; 
 O vapor chega até o condensador e é condensado (passa do estado de vapor 
para líquido); 
 Por fim, o líquido é recolhido no frasco coletor. 
 
2). Quando a solução. Sendo destilada, atinge a temperatura de 100°C, 
deve-se parar a destilação. Por que? 
 R-Porque o ponto de ebulição da água (100°C) e do álcool (78,4°C). A mistura 
dos dois apresenta ponto de ebulição variável em função do grau alcoólico. Assim, o 
ponto de ebulição de uma solução hidroalcoólica é intermediário entre a água e o 
álcool 
3). Explique como é possível determinar a graduação alcoólica do produto 
obtido na destilação da garapa fermentada. 
R- por meio dessa técnica, obtém-se o álcool comum a 96 ºGL (graus Gay-Lussac), o 
que significa que ele possui 96% de etanol e 4% de água 
Para medir a pureza do álcool fabricado, costuma-se utilizar um alcoômetro, que é um 
aparelho com as graduações na parte externa de seu tubo de vidro e com chumbo na 
parte inferior que fica submerso em um líquido. A graduação igual a 0ºGL corresponde 
ao valor da água pura, e a graduação de 100ºGL, ao etanol puro. 
 
Aula 3 Roteiro 1 
Análise microbiológica da água: Contagem padrão de bactérias heterofóbicas 
por pour plate 
Objetivo: realizar o método de contagem microbiana, precisamente as 
bactérias aeróbicas mesófilas, em água utilizando-se o de técnicas de semeadura em 
profundidade (pour plate), além de saber interpretar os resultados obtidos , levando-
se em consideração os parâmetros nacionais para a potabilidade de água. 
Para visualizamos bactérias mesófilas e patogênicos. 
A água é um veículo muito utilizado para lavagem e formulações alimentares. 
Em um Becker de150ml adicionou-se 100ml de água coletada da torneira e 
0,1ml de tiossulfato de sódio com auxílio de uma pipeta automática 
Em sequência transferiu-se 1ml da amostra para uma placa de petri e foi 
adicionado o meio de cultura PCA até altura mediana da placa de Petri. 
Homogeneizou-se o conteúdo da placa em movimentos circulares moderados 
em torno dez vezes consecutivas. 
Quando23 o meio de cultura se solidificou incubou-se em posição invertida a 
35°C +- durante 48 horas. 
Analisamos aspectos das colônias, cor, forma, textura, borda e relacionamos o 
número de colônias com a origem da amostra, forma de coleta e onde coletou em uma 
garrafa plástica. 
A placa se apresentou incontável, pois ultrapassou o limite de contagem de bactérias 
presentes. 
Realizamos a contagem das colônias, dividimos em quatro partes e e uma parte 
resultou em 75 colônias e multiplicando por 4 partes, totalizou em 300 colônias na 
amostra. 
Analisamos os seguintes aspectos: 
Cor- presença de colônias brancas e amarelas, opacas e brilhantes. 
Quantidade de colônias- identificamos três tipos de colônias 
Borda- Lisa 
Textura – Lisa 
As bordas demonstram as diversidades das colônias presentes. 
Houve contaminação externa, constatou -se que o crescimento não foi somente da 
contaminação da água e não há tolerância para crescimento de coliforme fecais. 
A água foi coletada da torneira da faculdade em uma garrafa plástica, sabemos que 
houve contaminação externa também. 
Garrafa banheiro- menos de 100 colônias, presença de colônias menores no meio. 
Garrafa bebedouro polo- mais de 200, apresentou mais diversidade de colônias, 
crescimento do meio, mas em relação aos outros, apresentou menor crescimento na 
superfície. 
Garrafa de água da estação- uso contínuo e apresentou menos de 200 colônias. 
Becker da torneira com água do Laboratório multidisciplinar- mais 200 colônias e maiorcrescimento meio. 
 
Questões para a fixação do conteúdo: 
 
1). Comente sobre a gravidade da detecção de coliformes fecais em água 
e em alimentos. 
R- A presença desses micorgsanismos podem causar febre tifóide,febre paratifóide, 
desinteria bacilar,cóleracolite hemorrágica,com diarreia sanguínea, cólicas 
abdominais graves (náuseas, vômitos), febre rara, síndrome urêmico-hemolítica 
(HUS) – toxinas no sangue, doença renal. Podendo ser fatal em jovens e idosos em 
risco. 
2). Analisando o método anterior, comente sobre a sua especificidade. 
Os Coliformes fecais são capazes de fermentar a lactose com produção de gás, 
em 24h a 44,5-45,5o C. Esse grupo inclui três gêneros, Escherichia, Enterobacter e 
Klebsiella, sendo a cepas de Enterobacter e Klebsiella de origem não fecal. Por isso 
que E. coli é a mais conhecida, sendo seu habitat o trato gastrintestinal ela é a 
indicadora de contaminação fecal, em alimentos processados (SILVA,1997 p.31). 
3). Existe o risco de resultados falso-positivos? Explique. 
Sim, existe falso positivo por isso preciso conhecer a origem da amostra , o 
material de coleta pode está com alguma contaminação externa. 
 
 Aula 3 Roteiro 2 
Análise microbiológica da água: detecção de coliformes fecais 
Objetivo: mostrar ao aluno a técnica de detecção de amostras de coliformes 
fecais em água. 
Não há tolerância para a presença de coliforme fecais na água ,a presença de 
gás no tubo de Durham, indica teste presuntivo positivo. 
Analisou-se os tubos e notamos a presença de bolhas de gás, constatando a presença 
de bactérias fermentadoras e a presença de coliforme nas amostras. 
Algumas amostras se apresentaram turvas. 
É a formação de gás dentro do tubo de Durham que indica a presença de coliforme 
fecais. As amostras foram montadas antecipadamente na faculdade, para atingir o 
tempo de 48 horas. A seleção e feita através da temperatura na primeira triagem 37°C 
para separar as espécies e na segunda triagem a 44,5°C para identificarmos os 
termos resistentes e em seguida e levado para as placas 
Para a análise foi inoculado uma série de 3 tubos de ensaio contendo 10ml (concentração 
dupla), 9ml e 9,9ml do meio Caldo Lauril Triptose com, respectivamente, 10ml, 1ml e 0,1ml 
da amostra, a 37ºC por 48h. A presença de gás no tubo de Durham indica um teste 
presuntivo positivo. 
O limite de coliformes em água de abastecimento é até 4000 coliformes em 100ml 
de H2O em 80% das amostras. 
 
Questões para a fixação do conteúdo 
1). Descreva a importância da detecção e do controle da presença de 
coliformes fecais na água. 
R- Principalmente por ser veículo de transmissão de bactérias, coliformes totais 
e termotolerantes, protozoários, vírus e fungos causadores de inúmeras doenças ao 
homem. 
2). Comente as condições em que podem ocorrer a contaminação da 
água. 
R- Aquecimento global, desmatamento, atividades industriais agrícolas e pecuárias, 
lixos e efluentes de águas fecais, tráfego marítimo, derramamentos de combustível. 
 
3). Descreva a importância dos microrganismos indicadores. 
R- Os microrganismos indicadores são grupos ou espécies que, quando 
presentes em um alimento, podem fornecer informações sobre a ocorrência de 
contaminação de origem fecal, sobre a provável presença de patógenos ou sobre a 
deterioração potencial do alimento, além de poderem indicar condições sanitárias 
inadequadas. 
 
Aula 4- Roteiro 1 
Análise microbiológica de leites 
 
Objetivo: Realizar a determinação de bactérias mesófilas em leite pasteurizado 
utilizando a técnica de semeadura de superfície. 
A determinação do número de bactérias mesófilas em leite pasteurizado 
utilizando a técnica de semeadura de superfície. As bactérias mesófilas predominam 
em situações de higiene deficiente e ausência de resfriamento do leite. Dessa forma, 
bactérias dos grupos dos lactobacilos, estreptococos, lactococos e enterobactérias 
podem se multiplicar rapidamente resultando em acidez aumentada do leite. 
 
Realizou-se a diluição das amostras de leite A e B em 1:10 , sendo o,5 ml de 
amostra e 4,5 de solução salina. 
Realizamos 5 soluções sequenciação de cada solução, denominada A e B, em 
seguida foi semeada a diluição 10-4 e 10-5 e levou-se para incubação. 
As placas serão incubadas sob condições anaeróbicas a 45°C em estufa 
bacteriológica, ao final do período de incubação realizar a contagem das colônias 
utilizando o contador de colônias. 
Nas amostras do tubo A, tubo B 10-4 e tubo B 10-5 , não formam encontrados nenhum 
microrganismo. Já na amostra do tubo A 10-5 houve contaminação externa por fungo durante 
a semeadura. 
 
Aula 4- Roteiro 2 
Coloração de Gram 
 
Objetivo: a avaliação da morfologia é muito importante para a execução da 
maior parte dos exames microbiológicos. A coloração de Gram. Também deve ser 
revisada, dada a sua grande importância no diagnóstico clínico das amostras 
microbiológicas. 
Após a técnica bactéria gram negativa bolinha roxa , não tem gran negativo 
Apresentou-se bacilos , cor roxa , positiva . 
Levedura.fungos unicelulares bactericidas 
A avaliação da morfologia é muito importante para a execução da maior parte 
dos exames microbiológicos. A coloração de Gram também deve ser revisada, dada 
a sua grande importância no diagnóstico clínico das amostras microbiológicas. 
 
Questões para a fixação do conteúdo: 
1). Descreva a importância dos métodos de coloração diferencial. 
R- A Técnica da Coloração de gram é uma importante ferramenta laboratorial 
dentro da Microbiologia, auxiliando o laboratório no diagnóstico. A partir de 
características bioquímicas das bactérias as mesmas podem ser classificadas 
como gram positiva ou gram negativas, corando-se de roxo ou rosa respectivamente. 
2). Diante desta identificação, o que podemos concluir com a análise da 
água e do leite? 
R- Concluiu-se que a água apresentou contaminação por microrganismo e no leite 
houve contaminação cruzada durante a semeadura 
 
3). Quais os procedimentos para evitar a contaminação do alimento por 
esses microrganismos? 
 
 manutenção de elevados padrões de higiene 
redução do manuseamento dos alimentos 
o controlo da temperatura. 
Sempre lave as mãos corretamente, especialmente antes de comer e depois de usar 
banheiros 
Evite beber água não tratada 
Não coma carne crua, alimentos marinhos e ovos 
Mantenha-se longe dos animais de estimação se você tiver sistema imunológico fraco 
Mantenha condições sanitárias higiênicas 
Evite leite e outros produtos lácteos não pasteurizados 
Cozinhe alimentos até que estejam bem feitos 
Lavar ou descascar frutas cruas e legumes corretamente 
 
REFERÊNCIAS 
 
BR.QUALITY. Microbiologia Em Alimentos: O Que É E Qual A Sua Importância. 
Disponível em: https://brqualityconsultoria.com.br/microbiologia-em-alimentos-o-que-
e-e-qual-a-sua-importancia//. Acesso em: 25 maio 2022. 
 
 
 
BARUFALDI.MURICIO. Deterioração de alimentos. Disponível em : 
https://www.linkedin.com/pulse/deteriora%C3%A7%C3%A3o-de-alimentos-um-
ter%C3%A7o-dos-produzidos-para-
barufaldi#:~:text=A%20deteriora%C3%A7%C3%A3o%20de%20alimentos%20%C3
%A9%20o%20processo%20em,bem%20como%20o%20produto%20%C3%A9%20e
mbalado%20e%20armazenado. Acesso em 20 de maio de 2022 
 
 
GVS. A importância da microbiologia de alimentos na qualidade dos produtos. 
Disponível em : https://www.gvs.com.br/blog/life-sciences/microbiologia-de-
alimentos/ Acesso em : 32 de maio de 2022 
 
 
Oul. Processo de produção de álcool. Disponível em : Processo de produção de álcool. 
Fabricação e produção de álcool (uol.com.br) : Acesso em: 30/05/2022 
 
 
SILVA , Neusely da. Manual de métodos de análise microbiológica de alimentos. Valéria 
Christina Amstalden - São Paulo : Livraria Varela,1997, p31.