WEB 01 - Imunologia Clínica - Profa Dra Juliana Gonçales

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WEBAULA 01
Imunologia Clínica
P rofa . D ra . Ju l i a n a G o n ç a l e s
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Força de Ligação – Ag+AC
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Conjunto de reações fracas que estabilizam a ligação 
entre moléculas de antígenos e de anticorpos:
• Pontes de hidrogênio;
• Ligações iônicas;
• Forças hidrofóbicas;
• Forças de Van der Waals.
Interferentes na Ligação
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➢ Especificidade dos anticorpos;
➢ Afinidade dos Ac;
➢ Avidez dos Ac;
➢ Concentração dos Ac e antígenos;
➢ Classe dos anticorpos envolvidos;
➢ Pureza dos antígenos utilizados;
➢ pH do meio da reação;
➢Temperatura da reação;
➢Tempo da reação;
➢ Efeito pró-zona.
Afinidade
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“Força de ligação resultante do total de forças não-covalentes 
entre um único sítio de ligação do Ac e um único epítopo do 
antígeno. Depende do grau de complementariedade entre as 
duas moléculas’’
✓ Alta afinidade – ligações mais fortes e duradouras;
✓ Baixa afinidade – ligam-se fracamente tendendo a se 
dissociar com facilidade;
Afinidade
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Avidez
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“Força resultante de interações múltiplas entre uma molécula 
de anticorpo e os epítopos de um antígeno complexo”
✓ Quanto maior a avidez, melhor o efeito biológico;
✓ Baixa afinidade pode ser compensada por uma alta avidez.
Quanto mais sítio de ligação, maior será a avidez – Fração FAB<IgG 
monomérica<dímero<pentâmero
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Conceitos Básicos dos Testes Sorológicos
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• Título;
• Teste de referência;
• Sensibilidade ;
• Especificidade;
• Falso-positivo/falso-negativo; 
• Valores preditivos;
• Reação cruzada;
• Precisão;
• Acurácia ou exatidão;
• Reprodutibilidade;
• Limiar de reatividade (cut off);
• Efeito pró-zona.
Título
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➢Máxima diluição na qual um teste continua dando reação positiva;
➢ Quando dizemos que um soro deu um título de 1:20 em um teste de 
VDRL para sífilis, isso significa que mesmo diluindo 20 vezes o teste 
ainda continua positivo;
➢ Uma reação para o mesmo antígeno em teste diferentes irão resultar 
em títulos diferentes, uma vez que depende do limiar de detecção de 
cada teste. 
Teste de Referência
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“Teste conhecido e já realizado, a qual qualquer nova
metodologia deve ser comparada durante sua padronização
– Conhecido como Teste Padrão-Ouro”
Sensibilidade (S= a/a+c)
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✓ Teste com alta sensibilidade tem maior quantidade de Falsos-Positivos – teste para triagem.
➢ Porcentagem de resultados positivos na população
sabidamente doente, isto é, a proporção de resultados
positivos verdadeiros;
➢ Falso Positivo – são reações positivas em indivíduos
sabidamente sadios;
➢ Sensibilidade de um teste sorológico – é o limiar de
detecção ou seja a quantidade mínima de Ac detectável.
Especificidade (E= d/b+d)
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✓ Teste com alta especificidade tem pouca quantidade de Falsos-Positivos – teste 
para diagnóstico
➢ Porcentagem de resultados negativos em pacientes
sabidamente sadios, isto é, à proporção de resultados
verdadeiramente negativos;
➢ Falso Negativo – são reações negativos em indivíduos
sabidamente doentes;
Valor preditivo positivo (VPP= a/a+b)
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✓ Porcentagem de verdadeiro positivos entre todos os
indivíduos com teste reagente (positivo);
✓ Probabilidade de um paciente com teste reagente de ter a
doença
Valor preditivo negativo (VPN= d/c+d)
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✓ Porcentagem de verdadeiro negativos entre todos os
indivíduos com teste não reagente (negativo);
✓ Probabilidade de um paciente com teste não reagente de
não ter a doença
Doença
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verdadeiro
positivo
falso 
positivo
falso 
negativo
verdadeiro
negativo
TE
ST
E
S= a/a+c
E= d/b+d 
a b
c d
VPP= a/a+b
VPN= d/c+d 
Reação Cruzada
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➢ É o resultado da similaridade tridimensional entre
duas moléculas de antígenos diferentes;
➢ Sendo assim, um Ac de um determinado Ag pode
reagir com outra, mesmo sendo uma ligação de
baixa afinidade;
Precisão
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➢ Concordância dos resultados obtidos após várias
repetições e traduz a possibilidade de erro
acidental do método;
➢ Quanto maior a precisão de um determinado teste,
menor será a influência que ele sofre das condições
durante a execução – pH, tempo, manuseio...
Acurácia
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• Capacidade do teste fornecer resultados muito
próximos do valor verdadeiro do que está sendo
medido – detecta a tendência de desvio.
Reprodutibilidade
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➢ Obtenção de resultados iguais no mesmo teste e
com a mesma amostra, porém, por pessoas e locais
diferentes.
Limiar de Reatividade ou “Cut-off”
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➢ É o ponto de corte de um determinado teste, ou seja,
valor acima do qual se deverá considerar positivo;
➢ Apesar do cut-off, sempre vão existir amostras em
zona duvidosa.
Efeito pró-zona
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➢ Quantidade exacerbada de anticorpos na amostra teste (pura),
sendo desproporcional em relação ao antígeno teste;
➢ Formação de pequenos imunocomplexos.
Efeito pró-zona
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PRÓXIMA 
AULA
AGLUTINAÇÃO
ELISA
“Primeira lei do estudante: Todo 
indivíduo em repouso tende a 
permanecer em repouso a não ser que 
uma força chamada “dia de prova” 
atue sobre o mesmo” 
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