Bioquimica clinica 3- glicose (1)

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Universidade Federal do Amazonas 
Faculdade de Ciências Farmacêuticas 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 Doseamento da glicose de forma manual 
 
 
 
 
 
 
 
 Raíssa Ribeiro Monte- 21601655 
 
 
 
 
Manaus 
2021 
1- Fundamento do método 
A glicose na presença de oxigênio e água, sofre ação da enzima glicose oxidase (GOD), 
formando ácido Glucônico e peróxido de hidrogênio. O peróxido de hidrogênio reage 
com o 4-Aminofenona e o 4-hidroxibenzoato, os quais são oriundos do reagente do 
trabalho. Este peróxido é quebrado pela peroxidase (POD) e acaba propiciando ainda mais 
a reação com o 4-Aminofenona e o 4-hidroxibenzoato, gerando um cromógeno de 
coloração vermelha. 
 
Glicose + O2 + H2O Ácido Glucônico + H2O2 
 
H2O2 + 4-AF + 4-hidroxibenzoato coloração vermelha 
 
2- Procedimento experimental 
1- Os tubos do branco, padrão e das amostras foram identificados; 
2- Pipetou-se 1 mL do reagente de trabalho em todos os tubos; 
3- Pipetou-se 10 µl do padrão e 10 µl de cada amostra para os seus respectivos tubos 
identificados, os quais foram devidamente homogeneizados após a adição de cada 
conteúdo; 
4- Os tubos foram levados para o banho maria a uma temperatura de 37 °C durante 
15 minutos; 
5- Após esse período, eles foram retirados e levados para o espectrofotômetro para 
a leitura da absorbância; 
6- O comprimento de onda foi ajustado para 505 nm e os conteúdos dos tubos foram 
transferidos para as cubetas e postas dentro do equipamento; 
7- O espectrofotômetro foi zerado e as leituras de cada cubeta foram feitas; 
8- Os valores das absorbâncias foram anotados. 
 
3- Resultados 
 
 
 
 
 
 
Tubo Absorbância Valor da glicose calculado 
Padrão 0.404 -- 
Amostra 1 0.670 166 mg/dL 
Amostra 2 0.707 175 mg/dL 
Amostra 3 0.309 76mg/dL 
Amostra 4 0.265 66mg/dL 
GOD 
POD 
4- Cálculos 
 
Primeiramente, foi necessário encontrar o valor do f, que nada mais é que o 
resultado encontrado da divisão da concentração do padrão (100mg/dL) pela sua 
própria absorbância (0.404), representada pela letra P como mostrada na fórmula 
abaixo: 
 
 f= 100 (mg/dL) / P 
f= 100 (mg/dL) / 0.404= 247,52 
 
Este resultado obtido foi de 247,52 e foi utilizado como uma constante para se 
encontrar os valores da glicose das amostras 1,2,3 e 4, a partir da seguinte fórmula: 
 
Glicose (mg/dL) = D × f 
Onde D é o valor da absorbância de cada amostra e f a constante calculada 
anteriormente. 
 
Amostra 1 Amostra 2 
Glicose (mg/dL) = 247,52×0.670 Glicose (mg/dL) = 247,52×0.707 
Glicose (mg/dL) = 165,83 ≅166mg/dL Glicose (mg/dL)= 174,99≅175 mg/dL 
 
 
Amostra 3 Amostra 4 
Glicose (mg/dL) = 247,52×0.309 Glicose (mg/dL) = 247,52×0.265 
Glicose (mg/dL) =76,48≅76mg/dL Glicose (mg/dL)= 65,6 ≅ 66mg/dL 
 
5- Conclusão 
Os pacientes das amostras 1 e 2 apresentaram valores muito elevados de glicose, 
podendo constatar que possivelmente estão diabéticos, já que os valores excedem 
ao de uma glicemia normal e estão dentro do parâmetro para pessoas 
diagnosticadas com essa doença (igual ou acima de 126 mg/dL), mas faz-se 
necessário a realização de outros exames para confirmação desse diagnóstico (ex. 
hemoglobina glicada). Também há possibilidade desses dois pacientes já terem 
sido diagnosticados com diabetes e esse ser apenas um exame de rotina, ficando 
nítido que seus hábitos alimentares e estilo de vida continuam errados e não há 
um bom controle da glicemia com os antidiabéticos usados ou até mesmo o uso 
incorreto dos mesmos. O paciente da amostra 3 apresenta um valor dentro do 
considerado normal (até 99mg/dL). E por fim, a amostra 4, que indica um estado 
de hipoglicemia por este paciente, podendo ser ocasionado principalmente por 
aquelas pessoas portadoras de diabetes do tipo 1, que sofrem com esses episódios 
de diminuição drástica da glicose no sangue.