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FACULDADE ESTÁCIO DO AMAZONAS CURSO DE BIOMEDICINA DISCIPLINA DE IMUNOLOGIA RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA Docente: Prof. MSc. Alexander Leonardo Silva Junior Aluna: ÁQUILA SUIANE S. DE M. AQUINO MANAUS-AM 2023 Sumário Sumário de figuras 2 1 Tipagem sanguínea 3 1.1 Metodologia 4 1.2 Correlação clínica 5 1.3 Resultados obtidos 5 2 Compatibilidade 7 2.1 Metodologia 7 2.2 Correlação clínica 7 2.3 Resultados obtidos 7 3 Teste de HIV 8 3.1 Introdução 8 3.2 Metodologia 9 3.3 Correção clínica 11 3.4 Resultado obtido 11 Referencial bibliográfico 12 Sumário de figuras Figura 1: Tipagem sanguínea Rongel 5 Figura 2: Teste rápido de HIV 7 1 Tipagem sanguínea 1.1 Introdução 2 A tipagem sanguínea consiste na determinação dos grupos sanguíneos que se caracterizam pela presença ou ausência de determinados antígenos na membrana. Os tipos A, B e AB consistem, respectivamente, da presença exclusiva das aglutininas A, B, em ambos, respectivamente; enquanto o tipo sanguíneo O é resultante da ausência de ambos os antígenos A e B. Já para o sistema Rh, o tipo Rh+ é identificado pela evidenciação do fator Rh nas células sanguíneas, enquanto o tipo Rh-, pela ausência (DANIELS & BROMILOW, 2010) Essa identificação é determinante para a classificação correta de tipo sanguíneo. Esta análise é normalmente realizada em um laboratório por meio de técnicos treinados, a partir de testes de aglutinação de glóbulos vermelhos contra anticorpos anti-A, anti-B e anti-Rh. Queremos analisar se ocorrerá aglutinação nas misturas dos reagentes com a amostra. 1.1 Metodologia Materiais Utilizados Luvas descartáveis; · Jaleco para proteção individual; · Touca; · Máscara; · Tubo de EDTA; · Seringa; · Algodão; · Álcool; · Garrote; · 3 Tubos de vidro dois para grupo sanguíneo A, B e um para fator rh D; · 1 Tubo para água; · Racks; · Caneta (para marcação nos tubos); · Pipeta; · Reagente anti-A; · Reagente anti-B; · Reagente anti-D; · Recipiente para descarte de material biológico; Procedimento 1. Separa o material para coleta que são: tubo EDTA, garrote, seringa, algodão, álcool; 2. Após encontra a veia do paciente apalpando com o dedo indicador calmamente, em seguida, irar garrotear o braço a 10cm do local que irar fazer a coleta, verificar novamente a veia, esterilize o local com algodão e álcool em movimentos circulares de dentro para fora e em seguida fazer a coleta de sangue na seringa; 3. Transferir em seguida a amostra para o tubo de EDTA; 4. Separe os 3 tubos de vidro para cada tipo de sangue que será testado, e coloque no rack; 5. Separe também os reagentes anti-A, anti-B e anti-D; 6. Identifique corretamente cada tubo de vidro para cada tipo de reagente que irar ser posto neles por exemplo (A, B e D); 7. Adicione uma gota (50ml) de cada reagente nos tubos de vidro cada um nos locais identificados corretamente; 8. Adicione 1 gota (50ml) da amostra com a pipeta e adicione em cada tubo, evitando de encosta a ponteira nos reagentes para evitar o risco de contaminação; 9. Faça uma leve homogeneização na amostra; 10. Programe a centrífuga 2 min a 5 min por 1500 RPM; 11. Leve os tubos para a centrífuga respeitando o balanceamento em cruz para isso utilize o quarto tubo com água; 12. Após a espera, mexa levemente os tubos e verifique quais tubos reagiram com os reagentes; Correlação clínica - Se ocorrer aglutinação no tubo identificado A, o sangue consecutivamente é A; - Se ocorrer aglutinação no tubo identificado B, o sangue consecutivamente é B; - Se ocorrer aglutinação no tubo A e tubo B, o sangue consecutivamente é AB; - Se não ocorrer nenhuma aglutinação, o sangue é tipo O; - Em relação ao RHD, se a amostra com o reagente aglutinar, o sangue é positivo - E se o RHD não aglutinar, o sangue será negativo; 1.3 Resultados obtidos Tipagem sanguínea do dia 03/04/2023 Amostra de sangue: Voluntário Rongel; Tubo A – Não aglutinou; Tubo B – Não aglutinou; Tubo D – Aglutinou; Na imagem abaixo observamos que não houve aglutinação no tubo A e nem no B mas ocorreu aglutinação no tubo D. Logo a amostra é O positivo. Figura 1: Tipagem sanguínea Rongel Fonte: Autor próprio (2023) Tipagem sanguínea do dia 22/05/2023 Amostra de sangue: Desconhecido; Tubo A – Aglutinou; Tubo B - Não aglutinou; Tubo D – Aglutinou; A imagem abaixo observamos a aglutinação no tubo A e D e sem reação no tubo B, determinasse que a amostra é A positivo. Fonte: Autor Próprio (2023) Figura 2: Tipagem sanguínea 2 Compatibilidade 2.1 Metodologia A compatibilidade tem a finalidade de diagnosticar a possibilidade do indivíduo com o tipo sanguíneo x receber o grupo sanguíneo y, saber se o sangue do doador não irá reagir com o sangue o recebedor, para isso fazemos um teste com uma pequena quantidade de ambos os sangues para a detecção de antígeno e anticorpos. Materiais usados 1 Tubos de vidro vazio 1 Tubo com água 1 Tubo de amostra de sangue do doador 1 Tubo de amostra de sangue do paciente Centrífuga Pipeta 200 e 100 microlitros Pincel permanente Grade Ponteira Procedimento 1. Separar as amostras do doador e recebedor e identificar os tubos; 2. Leve as amostras para centrífuga por 5 minutos para fazer a separação do plasma e as hemácias; 3. Separar o tubo vazio para realização do teste; 4. Colete com a pipeta 200 microlitros de plasma sanguíneo do recebedor e adicione no tubo vazio; 5. Com a pipeta coletar 100 microlitros do concentrado de hemácias do doador e adicione no vidro que está com plasma; 6. Leve a mistura junto com um tubo de vidro com água, para fazer o balanceamento na centrífuga, por 5 minutos; 7. Após o término analise a amostra; 2.2 Correlação clínica - Se glutinar: Incompatível para doação - Se não aglutinar: Compatível para doação 2.3 Resultados obtidos 3 Teste de HIV 3.1 Introdução O vírus da imunodeficiência humana (HIV), pertence à família lentivírus dos retrovírus humanos, é o vírus que pode levar à síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS), diferente de outros vírus o HIV não conseguimos nos curar pois ele acata o sistema imunológico que é responsável por defender o organismo de doenças. O tratamento para o HIV é denominado comumente de terapia antirretroviral –TARV, age com a diminuição de chances de transmissão a outras pessoas e de uma mãe para o seu filho na gravidez ou amamentação juntamente com os preservativos, não compartilhando seringas contaminadas. Sem o devido cuidado pode tornar o sistema imunológico insuficiente para que o próprio corpo se defenda e responda a doenças oportunistas. O teste pode ser realizado por o teste rápido como o do HIV 1/2 da Bio Manguinhos, cujo dispositivo existe 1 linha de teste (azul) e outra de controle (verde). A linha verde de controle nos possibilita identificar a veracidade do teste já a linha azul de teste serve para se dar o resultado positivo ou negativo, se a amostra não reagir com o dispositivo e tiver ausência de linha então o resultado será negativo, se a amostra reagir e aparecer a linha teste, resultado é positivo 3.2 Metodologia Materiais utilizados Teste rápido cujo vem os seguintes materiais: Suportes DPP® HIV com antígenos de HIV-1/2 Tampão de corrida 01 frasco com 3 mL ou 6 mL Frasco para eluição - 1 mL Lancetas estéreis descartáveis Curativo Adesivo Estéril Manual de Instruções de Uso Material Complementar não fornecido: Cronômetro ou relógio Luvas descartáveis Jaleco para proteção individual Touca Máscara Algodão Álcool 70% Recipiente para descarte de material biológico e perfurocortante Figura 3: Teste rápido de HIV Fonte: Site Fiocruz- manual DPP-HIV1/2 Procedimento 1. Separar o material a ser utilizado à temperatura ambiente 2. Retirar o suporte de teste do envelope laminado e identificá-lo com número de identificação da amostra, além do número do lote do kit de onde o teste foi retirado. 3. Identificar o frasco para eluição com o nome do indivíduo ou número de identificação e desenrosque o dosador (parte branca) do frasco mantendo a tampa azul rosqueada no dosador. 4. Perfurar o dedo com a lanceta5. Encostar a alça coletora de 10 µL na amostra a ser testada permitindo que a alça seja preenchida com a amostra. 6. Inserir a alça coletora de 10 µL com a amostra no frasco de eluição identificado de modo que toque no fundo do frasco. Dobre a haste da alça coletora no ponto de quebra a fim de que a extremidade com a amostra permaneça dentro do frasco de eluição 7. Recolocar o dosador no frasco de eluição certificando de que tanto o dosador quanto a tampa azul estão bem fechados e agite levemente por 10 segundos. 8. Retirar somente a tampa azul do dosador e girar o frasco de eluição mantendo na posição vertical (sem inclinar) sobre o poço 1. Adicionar duas gotas da solução, lentamente, ao poço 1 9. Aguardar cinco minutos. Após esse tempo, a linha azul (TESTE) e verde (CONTROLE) da janela devem ter desaparecido. Em caso contrário, descartar o suporte de teste e repetir o procedimento desde o início usando um novo suporte 10. Utilizar o frasco de tampa vermelha, virá-lo na posição vertical (sem inclinação) e despejar no poço 2 com delicadeza 4 gotas do tampão. 11. Deixar passar 10 minutos do último procedimento. 3.3 Correção clínica Resultados detectados no teste · Resultado reagente: Um teste reagente significa que anticorpos para HIV-1 e/ou HIV-2 foram detectados. Então duas linhas roxas/rosas ficaram evidenciadas no teste, podendo variar a intensidade da cor, porém o resultado é considerado positivo · Resultado não reagente: Para este resultado sugere a ausência de anticorpos para HIV-1 e HIV-2 na amostra e não exclui a possibilidade de infecção pelo HIV. Então o teste indicará uma linha roxa/rosa na área de controle (C) e nenhuma linha na área de teste (T). 3.4 Resultado obtido Amostra do voluntário: Alexander Resultado: Negativo Referencial bibliográfico https://educador.brasilescola.uol.com.br/estrategias-ensino/coleta-tipagem-sanguinea.htm#:~:text=Assim%2C%20anticorpos%20anti%2Da%20e,dos%20ant%C3%ADgenos%20a%20e%20b%20no%20sangue. https://www.studocu.com/pt-br/document/universidade-federal-de-pernambuco/imunologia-e-sorologia/relatorio-de-aula-pratica-sistemas-abo-e-rh/4777146/download/relatorio-de-aula-pratica-sistemas-abo-e-rh.pdf https://www.cre5dourados.sed.ms.gov.br/aula-pratica-tipagem-sanguinea/ https://brasilescola.uol.com.br/biologia/sistema-abo.htm 12-Erros-de-tipagem-sanguinea.pdf (ciencianews.com.br) https://telelab.aids.gov.br/moodle/pluginfile.php/22171/mod_resource/content/2/HIV%20-%20Manual%20Aula%209.pdf Você sabe o que é HIV e o que é AIDS? - UNAIDS Brasil HIV e aids | Biblioteca Virtual em Saúde MS (saude.gov.br) Manual de HIV / Aids - Marcia Rachid, Mauro Schechter - Google Livros
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