HEMOTERAPIA E BANCO DE SANGUE (FINAL)

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UNIVERSIDADE PAULISTA
INSTITUTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE
CURSO DE BIOMEDICINA
ROTEIRO PARA AULAS PRÁTICAS 
DISCIPLINA: 
HEMOTERAPIA E BANCO DE SANGUE
	
Instituto de Ciências da Saúde
	Curso: BIOMEDICINA 
Disciplina: Coleta de Materiais Biológicos
Título da Aula: Venopunção com sistema a vácuo 
	AULA 1
ROTEIRO 1
OBJETIVO: 
Treinamento de Venopunção em braço de borracha. Passos para coleta com seringa e agulha descartável e tubos a vácuos. Essencial conhecer o tipo de amostra necessária para cada tipo de análise. Amostra deve ser coletada em um recipiente específico para cada tipo de análise (sequencia correta de tubos para a coleta de venopunção) 
PROCEDIMENTO:
O aluno deverá realizar os passos de uma coleta de venupunção , com sistema a vácuo e com o auxílio do professor, tanto no procedimento como no resultado, explicando as implicações para este procedimento.
	MATERIAIS
	QUANTIDADE (Por grupo/turma)
	Luvas descartáveis, Avental 
	
	Sistema a vácuo: suporte, tubo e agulha descartável
	Suficiente para 1 grupo
	Álcool etílico a 70%
	
	Recipiente rígido e próprio para desprezar material pérfucortante
	
	Tubos indicados para o tipo de amostra a ser colhida
	4 tubos por grupo
	Estante 
	1 por grupo
	Algodão hidrófilo
	
	garrote
	1 por grupo
	Cadeira reta com braçadeira regulável ou maca
	
	EQUIPAMENTOS
	QUANTIDADE
	Braço de Borracha
	1 por bancada
PROCEDIMENTO:
1- Enrosque a agulha no adaptador. Não remova a capa protetora de plástico da agulha. 
2º Oriente o paciente quanto ao procedimento. 
3º Ajuste o garrote e escolha a veia. 
4º Faça a anti-sepsia do local da coleta com algodão umedecido em álcool 70% 
5º Faça a punção e após introduza o tubo no suporte, pressionando-o até o limite. 
6º Solte o garrote assim que o sangue começar a fluir no tubo. 
7º Separe a agulha do suporte com a ajuda do frasco desconectador ou com uma pinça e descarte-a no recipiente adequado para material pérfurocortante. 
8º Oriente o paciente a pressionar com algodão a parte puncionada, mantendo o braço estendido, sem dobra-lo. 
O volume de sangue aspirado varia de acordo com a altitude, a temperatura ambiente, a pressão barométrica, a validade do tubo, a punção venosa e a técnica de enchimento do tubo. Tubos com um volume de aspiração menor do que as dimensões indicadas (tubos de aspiração parcial) podem encher-se mais lentamente do que os tubos de igual tamanho com um volume maior de aspiração. 
Tubos com volume insuficiente ou com excesso de sangue alteram a proporção correta de sangue/aditivo e podem gerar resultados incorretos ou desempenho precário do produto.
Descarte do material utilizado conforme Normas Internacionais de Segurança:
As soluções presentes nos tubos deverão ser desprezadas na pia, com água corrente.
Descarte a seringa no recipiente específico para perfurocortante, não ultrapassando 2/3 do limite da capacidade. 
	
Instituto de Ciências da Saúde
	Curso: BIOMEDICINA
Disciplina: Hemoterapia e Banco de Sangue
Titulo da Aula: Tipagem ABO 
	AULA 1
ROTEIRO 2
OBJETIVO: 
A Tipagem Sanguínea é um teste muito importante saber o tipo de sangue antes de se fazer uma transfusão sanguínea, pois pode haver incompatibilidade entre o doador e o receptor e, em casos de emergência, pode haver necessidade desta transfusão.
	
	
PROCEDIMENTO:
O aluno deverá receber a bula de instruções do fabricante dos kits de tipagem ABO (direta), e com o auxílio do professor, interpretá-la: tanto no procedimento como no resultado.
	MATERIAIS
	QUANTIDADE por grupo
	Kit de tipagem ABO direta
	1 
	Tubos de hemólise
	8 unidades
	Papel absorvente
	1 rolo
	Pipetas automáticas
	Capacidade para 1mL, 100µL
	Estante
	2 
	Cronômetro
	1
	Caneta marca tubo
	1
	EQUIPAMENTOS
	QUANTIDADE
	Centrífuga
	1 
	
Instituto de Ciências da Saúde
	Curso: BIOMEDICINA
Disciplina: Hemoterapia e Banco de Sangue 
Titulo da Aula: Tipagem Rh
	AULA 1
ROTEIRO 3
OBJETIVO: 
A Tipagem Sanguínea é um teste muito importante saber o tipo de sangue antes de se fazer uma transfusão sanguínea, pois pode haver incompatibilidade entre o doador e o receptor e, em casos de emergência, pode haver necessidade desta transfusão.
	
	
PROCEDIMENTO:
O aluno deverá receber a bula de instruções do fabricante dos kits de tipagem ABO (direta e reversa), e com o auxílio do professor, interpretá-la: tanto no procedimento como no resultado.
	MATERIAIS
	QUANTIDADE por grupo
	Kit de tipagem ABO direta
	1 
	Kit de tipagem ABO reversa
	1
	Tubos de hemólise
	8 unidades
	Papel absorvente
	1 rolo
	Pipetas automáticas
	Capacidade para 1mL, 100µL
	Estante
	2 
	Cronômetro
	1
	Caneta marca tubo
	1
	EQUIPAMENTOS
	QUANTIDADE
	Centrífuga
	1 
	
Instituto de Ciências da Saúde
	Curso: BIOMEDICINA
Disciplina: Hemoterapia e Banco de Sangue 
Titulo da Aula: Teste Coombs direto e indireto
	AULA 2 
ROTEIRO 1
OBJETIVO: 
O teste de Coombs direto é um método que permite a identificação da presença de anticorpos fixados sobre as hemácias. Tecnicamente, baseia-se no fato de que os anticorpos que recobrem as hemácias podem ser identificados pela adição de anticorpos antigamaglobulina humana. O teste de Coombs indireto permite a identificação de anticorpos anti-eritrocitários no soro. 
PROCEDIMENTO:
Teste Coombs direto:
Preparar uma suspensão de hemácias a 3% em PBS.
Em um tubo limpo (10x75mm) adicionar uma gota de suspensão celular.
Lavar as hemácias 3 vezes em PBS, tendo o cuidado de eliminar o sobrenadante completamente e ressupender o glóbulo de células depois de cada lavagem.
Adicionar gotas de soro antiglobulina humana poliespecífico ao glóbulo celular seco. Misturar bem e centrifugar 3500rpm em centrífuga sorológica durante 20 segundos.
Ressuspender as células agitando suavemente e ler macroscopicamente. Uma agitação forte pode provocar desaparecimento de uma aglutinação fraca.
Teste Coombs indireto:
Em um tubo (10x75mm) adicionar 2 gotas do soro do a ser analisado.
Adicionar uma gota de suspensão a 3% de hemácias que tenham sido lavadas 3 vezes e ressuspendidas em PBS. Misturar e incubar a 37ºC por 45 minutos.
Lavar as hemácias 3 vezes em PBS, tendo o cuidado de eliminar o sobrenadante completamente e ressupender o glóbulo de células depois de cada lavagem.
Adicionar gotas de soro antiglobulina humana poliespecífico ao glóbulo celular seco. Misturar bem e centrifugar 3500rpm em centrífuga sorológica durante 20 segundos.
Ressuspender as células agitando suavemente e ler macroscopicamente. 
	MATERIAIS
	QUANTIDADE por grupo
	Soro anti-IgG-C3d
	1 frasco conta gotas 
	Tampão PBS pH7,45 
	20mL
	Tubos de hemólise
	4 unidades
	Papel absorvente
	1 rolo
	Pipetas automáticas
	Capacidade para 1mL, 100µL
	Estante
	2 
	Cronômetro
	1
	Caneta marca tubo
	1
	EQUIPAMENTOS
	QUANTIDADE
	Centrífuga
	1 
	
Instituto de Ciências da Saúde
	Curso: BIOMEDICINA
Disciplina: Hemoterapia e Banco de Sangue 
Titulo da Aula: Discussão de Caso Clínico
	AULA 2 
ROTEIRO 2
CASO CLÍNICO 1
Paciente oncopediátrica do sexo feminino, 04 anos, A positivo, PAI negativo, diagnosticada com neuroblastoma e transfundida com uma alíquota de 170 mL de CHFI em um serviço ambulatorial. Após 48h, a paciente foi admitida em outro hospital com a prescrição de uma alíquota de CHFI. Embora a amostra ainda estivesse dentro do prazo estabelecido pela legislação vigente de 72h e a bolsa-mãe disponível, por precaução, nova amostra foi coletada. Durante os testes pré-transfusionais foi constatado presença de hemólise na amostra, PAI negativo com prova de compatibilidade positiva. Paciente foi transfundida com outra unidade sem intercorrência. Após 120h da primeira transfusão, o banco de sangue foi notificado em relação à reação transfusional hemolítica, com os seguintes sintomas relatados: febre, urina escura, mal estar, náuseas e vômitos, icterícia, dor abdominal e queda do nível inicial de Hb. A partir da ciência da reação transfusional, até o momento desconhecida pelo banco de sangue, as três amostras da paciente foram submetidas à repetiçãodos testes imuno-hematológicos (tipagem ABO/RhD, PAI, prova de compatibilidade, teste direto da antiglobulina e retipagem ABO/RhD do hemocomponente). Após investigação laboratorial, constatamos ausência de anticorpo irregular nas três amostras e prova de compatibilidade positiva somente na amostra intermediária (48h após transfusão). Na amostra coletada após 120h não foram encontrados indícios de reação transfusional, inclusive com o título do anticorpo indetectável, sendo assim, consequentemente a prova de compatibilidade da bolsa em questão também estava negativa.
Para Discussão:
Descreva os eventos associados, discuta as hipótese para as situações descritas e as condutas a serem adotadas para diagnóstico e acompanhamento do caso
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