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MATERIAL COMPLEMENTAR Histologia Profa. Dra. Cintia Milani Biópsia (fragmento de tecido) Preparação do tecido » corte histológico Coloração Estudo de tecidos ao microscópio de luz (também chamado de microscópio óptico) Estudo dos tecidos do corpo e de como esses tecidos se organizam para constituir órgãos. Introdução Lâmina de vidro Fatia delgada de tecido preparado Lamínula de vidro (delgada lâmina de vidro) Fonte: https://giphy.com/gifs/grey-flecha-cinza-5WhD3FZrd9mApOHSUG O que é uma preparação histológica? A primeira etapa no preparo de uma amostra de tecido ou órgão é a fixação, necessária para preservar a sua estrutura: Fixação química: Formaldeído 4%. Em uma segunda etapa, o espécime é preparado para inclusão ou embebição na parafina para possibilitar a obtenção de cortes histológicos. Preparação de amostras (espécimes) para análise microscópica 1) Desidratação banhos de álcool de 70 a 100% 2) Solvente orgânico com afinidade ao álcool Xilol 3) Inserção em parafina 56 a 60 ºC 4) Corte do tecido 1 a 10 micrômetros 5) Aderência do tecido em lâmina parafinaxilol Álcool 70% » Álcool 100% Fonte: https://repositorio.unesp.br/bitstream/handle/11449/118256/000785452.pdf?sequence=1 Microtomia: corte dos tecidos e interpretação tridimensional Nº 2 – Corte longitudinal Corte longitudinal Corte transversal Fontes: https://deevesacb.files.wordpress.com/2015/10/tc 3a9cnicas-histolc3b3gicas.pdf ALBERTS, Bruce. Biologia molecular da célula. 6. ed. Disponível em: Minha Biblioteca. Grupo A, 2017. http://mol.icb.usp.br/index.php/1-14-conceitos- basicos/ http://mol.icb.usp.br/index.php/1-11-conceitos- basicos/ http://mol.icb.usp.br/index.php/1-12-conceitos- basicos/ Nº 3 – Corte oblíquo Nº 1 – Corte transversal Movimento do braço do micrótomo Amostra revestida por cera ou resina Lâmina fixa Secções obtidas Secções sobre uma lâmina de vidro, coradas e montadas sob uma lamínula 1 2 3 Hematoxilina (corante básico) – corando em azul ou violeta as estruturas ácidas das células, como os núcleos e porções do citoplasma, ricas em RNA. Eosina (corante ácido), que deixará o colágeno e o citoplasma com tonalidades mais rosadas. Coloração: dupla coloração » hematoxilina e eosina (HE) Fonte: https://giphy.com/gifs/u maspotocas-facdigital- sedacrs- dOsCXHq54lumLa7rVS Citoplasma Citoplasma NúcleoNúcleo Hepatócitos Hepatócitos Fonte: https://mol.icb.usp.br/index.php/1-4-conceitos-basicos/ Núcleo: cromatina e nucléolo Nucléolo Hepatócitos Núcleo: cromatina frouxa Hepatócitos Seta amarela Outro tipo celular Cromatina densa Fonte: https://mol.icb.usp.br/index.php/1-6-conceitos-basicos/ Epitélio pavimentoso estratificado queratinizado (pele) Estrato córneo – consiste em inúmeras células pavimentosas anucleadas (perdem organelas), preenchidas com filamentos de queratina. São as células mais diferenciadas da pele (queratina abundante). Estrato basal – camada única, mais profunda e em contato com a derme, queratinócitos pouco diferenciados, forma cúbica ou colunar baixa, se multiplicam incessantemente. Saiba mais: Albinismo/ Fotoenvelhecimento Estrato granuloso – é a camada situada entre o estrato espinhoso e a camada mais superficial da porção não queratinizada da pele. A espessura dessa camada varia de uma a três células. DERME = células + matrix extracelular E P ID E R M E Melanócito Fontes: Livro-texto e http://mol.icb.usp.br/index.php/2-23-tecido-epitelial-de- revestimento-2/ Estrato espinhoso – formada por várias células (queratinócitos) maiores que exibem numerosos prolongamentos citoplasmáticos. O sistema circulatório abrange o sistema vascular sanguíneo e o sistema vascular linfático. O sistema vascular sanguíneo é composto pelas seguintes estruturas: coração, artérias, vasos capilares e veias. A circulação sanguínea é um sistema fechado com volume circulatório em regime estacionário. Dois circuitos distribuem o sangue no corpo: a circulação sistêmica e a circulação pulmonar. Sistema circulatório Fonte: adaptado de: https://giphy.com/gifs/healthy-corazon-vida-saludable-TFPPoyqGxa7RajjtfU Artérias pulmonares Veias pulmonares Átrio esquerdo Valva aórtica (Baixa pressão) Átrio direito Valva mitral (ou bicúspide) Veias cavas Valva tricúspide Valva pulmonar Ventrículo direito (Alta pressão) Ventrículo esquerdo Aorta Vasos da macrocirculação: artérias e veias de médio e grande calibres. Vasos da microcirculação: arteríolas, capilares e vênulas pós-capilares. Vasos da macrocirculação e vasos da microcirculação Fonte: adaptado de: JUNQUEIRA, Luiz C. U.; CARNEIRO, José. Histologia básicaI: texto e atlas. 13. ed. Disponível em: Minha Biblioteca. Grupo GEN, 2017. cap. 11. ROSS, M.; PAWLINA, W. Histologia: texto e atlas. Correlações com biologia celular e molecular. 7. ed. Disponível em: Minha Biblioteca. Grupo GEN, 2016. Túnica íntima Túnica média Túnica adventícia VEIAS Veia de grande calibre ARTERIAS Artéria de grande calibre (elástica) Veia de calibre médio Artéria de calibre médio (muscular) Válvula Capilares Anastomose AV linfático Capilar Células musculares lisas Vênula Arteríolas Túnica Íntima Túnica Média Túnica Adventícia Padrão geral dos vasos sanguíneos Exemplo: artéria muscular de médio calibre Fonte: adaptado de: JUNQUEIRA, Luiz C. U.; CARNEIRO, José. Histologia básica: texto e atlas. 13. ed. Disponível em: Minha Biblioteca. Grupo GEN, 2017. Adventícia Média Íntima EndotélioLâmina basal Lâmina elástica interna Endotélio Subendotélio: Tecido conjuntivo (colágeno) Fibras elásticas Células musculares lisas Obs.: Artérias → membrana limitante elástica interna Túnica íntima Túnica íntima – observe núcleos de células endoteliais (setas em azul-escuro). Lâmina elástica interna – limite entre íntima e média (setas em vermelho). Túnica média – lâminas elásticas (setas em azul-claro). Fonte: https://mol.icb.usp.br/index.php/11-10-sistema-circulatorio/ Células musculares lisas em grande quantidade Fibras elásticas Fibras reticulares Poucos fibroblastos Túnica média Túnica adventícia Tecido conjuntivo: fibras colágenas fibras elásticas células musculares lisas Vasa vasorum: nutrição dos vasos maiores Sintetizadas por células musculares lisas Saiba mais: Aterosclerose Fonte: adaptado de: JUNQUEIRA, Luiz C. U.; CARNEIRO, José. Histologia básicaI: texto e atlas. 13. ed. Disponível em: Minha Biblioteca. Grupo GEN, 2017. Endotélio Subendotélio Íntima Lâmina elástica interna M é d ia A d v e n tí c ia Vasa vasorum Como distinguir artérias e veias? Fontes: adaptado de: JUNQUEIRA, Luiz C. U.; CARNEIRO, José. Histologia básica: texto e atlas. 13. ed. Disponível em: Minha Biblioteca. Grupo GEN, 2017. cap. 11. https://mol.icb.usp.br/index.php/11-4-sistema- circulatorio/ DIFERENÇAS ESTRUTURAIS ENTRE AS TÚNICAS DE ARTÉRIAS E VEIAS Íntima Média Adventícia VeiaArtéria Capilares Veia artériaPequena Tecido adiposo Características da circulação sanguínea e a estrutura dos vasos Fonte: adaptado de: JUNQUEIRA, Luiz C. U.; CARNEIRO, José. Histologia básica: texto e atlas. 13. ed. Disponível em: Minha Biblioteca. Grupo GEN, 2017. cap. 11. Pressão Permeabilidade Material elástico Músculo Área total Artéria de grande calibre Artéria de médio calibre Arteríola Capilar Vênula Veia INTERVALO Célula muscular esquelética: Tem a forma de longos cilindros. É multinucleada. Os núcleos se situam na periferia da fibra, junto à membrana plasmática. A glicose é o principal substrato metabólico. Provém da circulação geral, bem como da degradação do glicogênio. Tecido muscular esquelético Miofibrilas miosina II + actina Núcleo periférico Corte longitudinal Corte transversal Perimísio Endomísio Saiba mais:Distrofia Muscular de Duchenne Note as bandas A, coradas em escuro, e as bandas I, claras. Fonte: adaptado de: https://mol.icb.usp.br/index.php/8-4-tecido-muscular/ Músculo cardíaco em corte longitudinal. Célula muscular Possui um ou eventualmente dois núcleos situados no centro. No coração, as fibras se organizam em feixes de diferentes direções. Músculo estriado cardíaco Núcleo central da fibra muscular cardíaca Disco intercalar da fibra muscular cardíaca Fonte: adaptado de: http://uel.br/ccb/histologia/portal/pages/arquivos/Atlas%20Digit al%20de%20Histologia%20Basica.pdf Inervação motora: junção neuromuscular Saiba mais: Toxina botulínica Fonte: adaptado de: ROSS, M.; PAWLINA, W. Histologia: texto e atlas. Correlações com biologia celular e molecular. 7. ed. Disponível em: Minha Biblioteca. Grupo GEN, 2016. cap. 11. Lâmina externa Vesícula com ACh ACh AChE Citoplasma da célula de Schwann Terminal axônico Lâmina externa Célula muscular Vesículas sinápticas Pregas juncionais da célula muscular Fenda sináptica Propagação do potencial de ação Receptor nicotínico de ACh A As células musculares lisas são fusiformes e afiladas. Possuem um núcleo central. Tecido muscular liso Útero Corte longitudinal Corte transversal Laminário – acervo próprio Fonte: https://mol.icb.usp.br/index.php/8-10-tecido-muscular/ Tecido muscular liso x tecido conjuntivo Tecido muscular liso Tecido conjuntivo denso não modelado Fonte: https://mol.icb.usp.br/index.php/8-14-tecido-muscular/ O tecido ósseo é visto sob a forma de trabéculas ósseas (rosa forte). Repare que essas trabéculas se fundem com outras e têm um trajeto irregular. Muito importante: A matriz extracelular do tecido ósseo é eosinófila ou acidófila e se cora em vermelho ou rosa após HE. Portanto, as porções alongadas de diferentes tamanhos, coradas em rosa e ressaltadas são trabéculas de tecido ósseo. Tecido ósseo Fonte: Laminário – acervo próprio. A B C D O que está sendo representado? Fonte: https://giphy.com/gifs/grey-flecha-cinza- 5WhD3FZrd9mApOHSUG A B C D O que está sendo representado? Tecido ósseo (calota craniana) A – osteócito B – matriz óssea ou trabécula óssea C – osteoblasto D – tecido conjuntivo frouxo Em vermelho – vasos sanguíneos Fonte: https://giphy.com/gifs/grey-flecha-cinza- 5WhD3FZrd9mApOHSUG Observe que existem osteoblastos cúbicos (A) e osteoblastos achatados (B). Os primeiros estão ativamente secretando matriz orgânica óssea, enquanto que os achatados estão em atividade mais reduzida. Tecido ósseo Trabécula óssea Vaso sanguíneo Fonte: http://mol.icb.usp.br/index.php/7-5-tecido-osseo/ matriz óssea osteócitos Os osteoclastos são células de grandes dimensões, originadas pela ___________________(qual célula o origina). Estão apoiadas sobre a superfície óssea e agem ___________ (qual função) de tecido ósseo. Possuem citoplasma acidófilo escuro, corando-se em vermelho após HE. São _________________ (uni ou multinucleadas). Às vezes, é possível observar que na interface entre o osteoclasto e a superfície óssea há um delgado espaço, ligeiramente côncavo, denominado lacuna de Howship. Tecido ósseo: osteoclastos LOCALIZE A LACUNA DE HOWSHIP Fonte: adaptado de: http://mol.icb.usp.br/index.php/7-5-tecido-osseo/ Matriz óssea Os osteoclastos são células de grandes dimensões, originadas pela fusão de macrófagos. Estão apoiadas sobre a superfície óssea e agem na reabsorção de tecido ósseo. Possuem citoplasma acidófilo escuro, corando-se em vermelho após HE. São multinucleadas. Às vezes, é possível observar que na interface entre o osteoclasto e a superfície óssea há um delgado espaço, ligeiramente côncavo, denominado lacuna de Howship (ressaltado em cinza e apontado por uma seta na figura). Tecido ósseo: osteoclastos LACUNA DE HOWSHIP Osteoblasto Saiba mais: Osteoporose BMP-7 (proteína osteogênica) Fonte: adaptado de: http://mol.icb.usp.br/index.php/7-6-tecido-osseo/ Matriz óssea ATÉ A PRÓXIMA!