roteiro dosagem de bilirrubina

Prévia do material em texto

INSTRUÇÕES GERAIS
1. Neste experimento, você irá aprimorar seus conhecimentos sobre a avaliação da dosagem de bilirrubina por meio do sistema de calorimetria.
2. Utilize a seção “Recomendações de Acesso” para melhor aproveitamento da experiência virtual e para respostas às perguntas frequentes a respeito do VirtuaLab.
3. Caso não saiba como manipular o Laboratório Virtual, utilize o “Tutorial VirtuaLab” presente neste Roteiro.
4. Caso já possua familiaridade com o Laboratório Virtual, você encontrará as instruções para realização desta prática na subseção “Procedimentos”.
5. Ao finalizar o experimento, responda aos questionamentos da seção “Avaliação de Resultados”.
LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA CLÍNICA
DOSAGEM DE BILIRRUBINA
10
RECOMENDAÇÕES DE ACESSO
PARA ACESSAR O VIRTUALAB
ATENÇÃO:
O LABORATÓRIO VIRTUAL DEVE SER ACESSADO POR COMPUTADOR. ELE NÃO DEVE SER ACESSADO POR CELULAR OU TABLET.
O REQUISITO MÍNIMO PARA O SEU COMPUTADOR É UMA MEMÓRIA RAM DE 4 GB.
SEU PRIMEIRO ACESSO SERÁ UM POUCO MAIS LENTO, POIS ALGUNS PLUGINS SÃO BUSCADOS NO SEU NAVEGADOR. A PARTIR DO SEGUNDO ACESSO, A VELOCIDADE DE ABERTURA DOS EXPERIMENTOS SERÁ MAIS RÁPIDA.
1. Caso utilize o Windows 10, dê preferência ao navegador Google Chrome;
2. Caso utilize o Windows 7, dê preferência ao navegador Mozilla Firefox;
3. Feche outros programas que podem sobrecarregar o seu computador;
4. Verifique se o seu navegador está atualizado;
5. Realize teste de velocidade da internet.
Na página a seguir, apresentamos as duas principais dúvidas na utilização dos Laboratórios Virtuais. Caso elas não se apliquem ao seu problema, consulte a nossa seção de “Perguntas Frequentes”, disponível em: https://algetec.movidesk.com/kb/pt-br/
Neste mesmo link, você poderá usar o chat ou abrir um chamado para o contato com nossa central de suporte. Se preferir, utilize os QR CODEs para um contato direto por Whatsapp (8h às 18h) ou para direcionamento para a central de suporte. Conte conosco!
PERGUNTAS FREQUENTES
1) O laboratório virtual está lento, o que devo fazer?
a) No Google Chrome, clique em “Configurações” -> “Avançado” -> “Sistema” -> “Utilizar aceleração de hardware sempre que estiver disponível”. Habilite a opção e reinicie o navegador.
b) Verifique as configurações do driver de vídeo ou equivalente. Na área de trabalho, clique com o botão direito do mouse. Escolha “Configurações gráficas” e procure pela configuração de performance. Escolha a opção de máximo desempenho.
Obs.: Os atalhos e procedimentos podem variar de acordo com o driver de vídeo instalado na máquina.
c) Feche outros aplicativos e abas que podem sobrecarregar o seu computador.
d) Verifique o uso do disco no Gerenciador de Tarefas (Ctrl + Shift + Esc) -> “Detalhes”. Se estiver em 100%, feche outros aplicativos ou reinicie o computador.
2) O laboratório apresentou tela preta, como proceder?
a) No Google Chrome, clique em “Configurações” -> “Avançado” -> “Sistema” -> “Utilizar aceleração de hardware sempre que estiver disponível”. Habilite a opção e reinicie o navegador. Caso persista, desative a opção e tente novamente.
b) Verifique as configurações do driver de vídeo ou equivalente. Na área de trabalho, clique com o botão direito do mouse. Escolha “Configurações gráficas” e procure pela configuração de performance. Escolha a opção de máximo desempenho.
Obs.: Os atalhos e procedimentos podem variar de acordo com o driver de vídeo instalado na máquina.
c) Verifique se o navegador está atualizado.
DESCRIÇÃO DO LABORATÓRIO
MATERIAIS NECESSÁRIOS
· Béquer de 50 mL;
· Caneta marcadora;
· Cubetas;
· Espectrofotômetro;
· Kit para determinação de bilirrubina;
· Micropipeta de 1000 µL;
· Pera;
· Pipeta graduada 5 mL;
· Ponteira para micropipeta;
· Recipiente de descarte;
· Suporte para micropipeta;
· Suporte para pipeta graduada;
· Suporte para tubo de coleta;
· Suporte para tubo de ensaio;
· Tubo de coleta com amostra de soro;
· Tubo de ensaio.
	PROCEDIMENTOS
	
1.	SEGURANÇA DO EXPERIMENTO
Higienize as mãos na pia. Coloque os equipamentos de proteção individual localizados
no “Armário de EPIs.
	
2. IDENTIFICANDO OS TUBOS
Identifique o primeiro tubo de ensaio com a sigla “BrD”, segundo tubo de ensaio com a letra “B” e o terceiro tubo de ensaio com a sigla “BrT”. Identifique a primeira cubeta com a sigla “BrD”, a segunda cubeta com a letra “B” e a terceira cubeta com a sigla “BrT”.
	
3. PREPARANDO A AMOSTRA
Ajuste o volume da micropipeta de 1000 µL para 200 µL e pipete 200 µL da amostra de soro e transfira para o tubo de ensaio B. Repita o processo anterior, pipete 200 µL da amostra e transfira para os tubos de ensaio BrD e BrT. Descarte a ponteira. Pipete 200 µL do reativo sulfanílico e transfira para o tubo de ensaio B. Descarte a ponteira. Pipete 200 µL do diazorreativo e transfira para o tubo de ensaio BrD. Descarte a ponteira. Repita o processo anterior, pipete 200 µL do diazorreativo e transfira para o tubo de ensaio BrT. Descarte a ponteira. Utilizando a pipeta graduada, transfira 2,4 mL de água destilada para o tubo B. Limpe a pipeta graduada. Utilizando a pipeta graduada, transfira 2,4 mL de água destilada para o tubo BrD. Limpe a pipeta graduada. Utilizando a pipeta graduada, transfira 2,4 mL de acelerador para o tubo
BrT. Limpe a pipeta graduada. Homogeneíze os tubos por inversão por 20 segundos.
	4. REALIZANDO A LEITURA
Ligue o espectrofotômetro e configure o espectrofotômetro para o comprimento de onda de 530 nm. Ajuste o volume da micropipeta para 1000 µL. Pipete 1000 µL do tubo de ensaio B e transfira para a cubeta B. Descarte a ponteira. Abra o espectrofotômetro, mova a cubeta para o equipamento e feche o equipamento. Zere o equipamento. Abra e retire a cubeta B do espectrofotômetro. Aguarde 5 minutos. Pipete 1000 µL do tubo de ensaio BrD e transfira para a cubeta BrD. Descarte a ponteira. Mova a cubeta para o equipamento e feche. Realize a leitura. Abra e retire a cubeta BrD do espectrofotômetro. Realize o cálculo, utilizando a fórmula bilirrubina direta (mg/dL) = ABD (Absorbância da bilirrubina direta) x 25,31. Aguarde 15 minutos. Pipete 1000 µL do tubo de ensaio BrT e transfira para a cubeta BrT. Descarte a ponteira. Mova a cubeta para o equipamento e feche. Realize a leitura. Abra e retire a cubeta BrT do espectrofotômetro. Realize o cálculo, utilizando a fórmula bilirrubina total (mg/dL) = ABT (Absorbância da bilirrubina total) x 25,31. Preencha o laudo com o resultado encontrado.
	
5. AVALIANDO OS RESULTADOS
Siga para a seção “Avaliação dos Resultados”, localizada na página 08 deste roteiro, e responda de acordo com o que foi observado no experimento, associando também com os conhecimentos aprendidos sobre o tema.
AVALIAÇÃO DOS RESULTADOS
1. O que é possível avaliar a partir da dosagem dos níveis de bilirrubina?
2. O que é bilirrubina conjugada e não conjugada?
TUTORIAL VIRTUALAB
1. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO
Visualize a pia clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Pia” localizada dentro do painel de visualização no canto superior esquerdo da tela. Se preferir, também pode ser utilizado o atalho do teclado “Alt+1”.
Abra a torneira clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o local indicado.
Visualize o armário de EPIs clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o
nome “Armário de EPIs” ou através do atalho do teclado “Alt+2”.
Abra o armário clicando com o botão esquerdo do mouse sobre as portas.
Selecione os EPIs necessários para a realização do ensaio clicando com o botão esquerdo do mouse sobre eles. Nesse experimento, é obrigatório o uso de jaleco branco, luvas de procedimento e óculos de proteção.
Feche o armário clicando com o botão esquerdo do mouse sobre as portas.
Visualize a bancada clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome
“Bancada” ou através do atalho do teclado “Alt+3”.
2. IDENTIFICANDO OS TUBOS
Identifique os tubos de ensaio clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a canetaindicada.
3. PREPARANDO A AMOSTRA
Ajuste o volume da micropipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a micropipeta e selecione a opção “Reajustar volume”.
Configure o volume para 200 µl utilizando o seu teclado numérico e confirme clicando
com o botão esquerdo do mouse em “Ok”.
LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA CLÍNICA
DOSAGEM DE BILIRRUBINA
14
ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO
CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504
E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br
Pipete 200 µL da amostra de soro clicando com o botão direito do mouse na micropipeta
e selecione a opção “Colocar em amostra de soro”.
Transfira o conteúdo clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione
a opção “Colocar no tubo de ensaio B”.
Repita os procedimentos anteriores, pipete 200 µL da amostra e transfira para os tubos de ensaio BrD e BrT.
Troque a ponteira clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a
opção “Trocar ponteira”.
Pipete 200 µL do reativo sulfanílico clicando com o botão direito do mouse na
micropipeta e selecione a opção “Colocar em reagente sulfanílico”.
Transfira o conteúdo clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a opção “Colocar no tubo de ensaio B”.
Troque a ponteira clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a
opção “Trocar ponteira”.
Pipete 200 µL do diazorreativo clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a opção “Colocar no diazorreativo”.
Transfira o conteúdo clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione
a opção “Colocar no tubo de ensaio BrD”.
Troque a ponteira clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a
opção “Trocar ponteira”.
Repita os processos anteriores, pipete 200 µL do diazorreativo e transfira para o tubo de ensaio BrT.
Troque a ponteira clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a
opção “Trocar ponteira”.
Mova a pipeta clicando com o botão direito do mouse na pipeta e selecione a opção
“Mover para béquer com água”.
Aspire 2,4 mL de água destilada pressionando o botão esquerdo do mouse no botão “S”.
Mova a pipeta clicando com o botão direito do mouse na pipeta e selecione a opção
“Mover para o tubo BrD”.
Despeje o conteúdo pressionando o botão esquerdo do mouse no botão “E”.
Limpe a pipeta graduada clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pipeta.
Repita os procedimentos anteriores, pipete 2,4 mL de água destilada e transfira para o tubo de ensaio B.
Mova a pipeta clicando com o botão direito do mouse na pipeta e selecione a opção
“Mover para acelerador”.
Aspire 2,4 mL de acelerador pressionando o botão esquerdo do mouse no botão “S”.
Mova a pipeta clicando com o botão direito do mouse na pipeta e selecione a opção
“Mover para o tubo BrT”.
Despeje a solução pressionando o botão esquerdo do mouse no botão “E”.
Limpe a pipeta graduada clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pipeta.
Homogeneíze os tubos de ensaio por inversão clicando com o botão direito do mouse
sobre o tubo de ensaio BrD e selecione a opção “Homogeneizar por inversão”.
Repita o procedimento anterior, homogeneíze os tubos de ensaio B e BrT por inversão.
Visualize o espectrofotômetro clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com
o nome “Espectrofotômetro” ou através do atalho do teclado “Alt+4”.
4. REALIZANDO A LEITURA
Ligue o espectrofotômetro clicando com o botão direito do mouse sobre o espectrofotômetro.
Ajuste o comprimento de onda clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o botão indicado.
Configure o comprimento de onda para 530 nm utilizando o seu teclado numérico e
confirme clicando com o botão esquerdo do mouse em “Aplicar”.
Abra o espectrofotômetro clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a tampa.
Visualize a bancada clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome
“Bancada” ou através do atalho do teclado “Alt+3”.
Ajuste o volume da micropipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a
micropipeta e selecione a opção “Reajustar volume”.
Configure o volume para 1000 µl utilizando o seu teclado numérico e confirme clicando
com o botão esquerdo do mouse em “Ok”.
Mova a micropipeta clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione
a opção “Colocar no tubo de ensaio B”.
Mova a micropipeta clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione
a opção “Colocar na cubeta B”.
Troque a ponteira clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a
opção “Trocar ponteira”.
Mova a cubeta clicando com o botão direito do mouse sobre a cubeta indicada e
selecione a opção “Colocar no espectrofotômetro”.
Feche o equipamento clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a tampa.
Zere o equipamento clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o botão indicado.
Abra o equipamento clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a tampa.
Retire a cubeta B clicando com o botão direito do mouse sobre a cubeta indicada e
selecione a opção “Colocar na bancada”.
Aguarde a reação clicando com o botão direito do mouse sobre o tubo de ensaio indicado e selecione a opção “Aguardar reação”.
Aguarde por 5 minutos ou avance o tempo clicando com o botão esquerdo do mouse
em “Avançar”.
Mova a micropipeta clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione
a opção “Colocar no tubo de ensaio BrD”.
Mova a micropipeta clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione
a opção “Colocar na cubeta BrD”.
Troque a ponteira clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a
opção “Trocar ponteira”.
Mova a cubeta clicando com o botão direito do mouse sobre a cubeta indicada e
selecione a opção “Colocar no espectrofotômetro”.
Feche o equipamento clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a tampa.
Realize a leitura clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o botão indicado.
Abra o equipamento clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a tampa.
Retire a cubeta BrD clicando com o botão direito do mouse sobre a cubeta indicada e
selecione a opção “Colocar na bancada”.
Aguarde a reação clicando com o botão direito do mouse sobre o tubo de ensaio indicado e selecione a opção “Aguardar reação”.
Aguarde por 15 minutos ou avance o tempo clicando com o botão esquerdo do mouse
em “Avançar”.
Mova a micropipeta clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione
a opção “Colocar no tubo de ensaio BrT”.
Mova a micropipeta clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione
a opção “Colocar na cubeta BrT”.
Troque a ponteira clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a
opção “Trocar ponteira”.
Mova a cubeta clicando com o botão direito do mouse sobre a cubeta indicada e
selecione a opção “Colocar no espectrofotômetro”.
Feche o equipamento clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a tampa.
Realize a leitura clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o botão indicado.
Abra o equipamento clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a tampa.
Retire a cubeta B clicando com o botão direito do mouse sobre a cubeta indicada e
selecione a opção “Colocar na bancada”.
Visualize o laudo clicando com o botão direito do mouse sobre o painel na lateral direita
da tela e selecione a opção “Laudo”.
Preencha o resultado do laudo clicando com o botão direito do mouse sobre a caixa de
resposta e selecione a opção “Responder”.
5. AVALIANDO OS RESULTADOS
Siga para a seção “Avaliação dos Resultados”, localizada na página 08 deste roteiro, e responda de acordo com o que foi observado no experimento, associando também com os conhecimentos aprendidos sobre o tema.