Familia Enterobacteriacea

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Bacilos Gram Negativos 
Fermentadores 
Professora Dra Eulália Azevedo Ximenes
Doutora em Bacteriologia pela Universidade de 
Montpellier I – França 
Família 
Enterobacteriaceae 
•Introdução
•Características Bioquímicas:
*Fermentação da Glicose 
*Ausência da citocromo-oxidase 
*Redução de nitrato a nitrito
Cadeia respiratória simplificada das bactérias 
oxidase positivas 
Cadeia respiratória simplificada das bactérias 
oxidase negativas
•Cultura- 24 horas de incubação 
•Reativo = Cloridrato de tetrametil para-fenilenodiamina 
Detecção da enzima Citocromo–oxidase 
Reação positiva Reação negativa 
Referência http://users.stlcc.edu/kkiser/biochem.html
Reação de Redução de Nitratos a Nitritos 
Reação de Redução de Nitratos a Nitritos 
Continuação
Reação de Redução de Nitratos a Nitritos 
Reação positiva 
Reação positiva depois da 
reação com o zinco 
Referência 
http://users.stlcc.edu/kkiser/biochem.html
*Fermentação da Lactose 
*Determinação da lisina descarboxilase 
*Determinação da ornitina descarboxilase 
*Determinação da arginina di-hidrolase 
*Utilização de citrato como fonte de carbono
*Produção de Urease 
*Produção do H2S
*Produção de Indol
*Reação do vermelho de metila 
*Reação de Voges-Proskauer = Produção do 
acetil metil carbinol 
*Motilidade 
*Atividade da ortonitrofenil-galactosidase
*Produção de fenilalanina desaminase 
Características bioquímicas diferenciais de 
membros da família Enterobacteriaceae
Penetração da lactose na célula bacteriana 
Reação positiva para a lactose 
Microrganismos semeados em meio Mac Conkey 
Referência 
http://www.mc.maricopa.edu/~johnson/labtools/Dbiochem/3mac.jpg
As descarboxilases e o sistema arginina dihidrolase
As descarboxilases e o sistema arginina 
dihidrolase
As descarboxilases
* Cultura do microrganismo – 18- 24 horas 
* Meio contendo o aminoácido: Lisina, ornitina ou arginina 
* Indicador Púrpura do Bromocresol
* Fonte de carbono = Glicose
* Incubação num ambiente de anaerobiose 
Referência : http://users.stlcc.edu/kkiser/biochem.html
Provas bioquímicas de identificação
Utilização fermentativa do Citrato 
Provas bioquímicas de identificação
Produção de gás sulfídrico 
Provas bioquímicas de identificação
Produção de urease
Provas bioquímicas de identificação bacteriana 
Meio de citrato de Simmons Meio Ureia de Chistensem
Referência : http://users.stlcc.edu/kkiser/biochem.html
Produção do Indol 
Referencia : http://users.stlcc.edu/kkiser/biochem.html
Atividade da orto-nitrofenil-beta-D-galactopiranosidase 
http://biology.clc.uc.edu/fankhauser/Labs/
Cell_Biology/Lactase_pH_Optimum/pH_O
ptimum.htm
GLICOSE 
ÁCIDO PIRÚVICO 
ACETIL METIL 
CARBINOL 
BUTILENOGLICOL
COMPOSTOS
DIACETILADOS 
COMPLEXO VERMELHO 
Prova Voges-Proskauer
Positiva 
FERMENTAÇÃO 
ÁCIDO-MISTA
REAÇÃO
POSITIVA PARA O 
VERMELHO DE METILA
Reação de Voges-Proskauer 
VERMELHO DE METILA VOGES-PROSKAUER 
Diferentes produtos de reações de desaminação 
Referencia : http://users.stlcc.edu/kkiser/biochem.html
Prova para verificação de motilidade
TSI - Triple Sugar Iron 
Reação Fermentado 
Carboidrato
Micro-organismo
A/A/gás+ H2S- Fermentação da 
glicose,sacarose,
lactose
com produção de gás
Escherichia,Klebsiella
Enterobacter
Alc/A/gás+/ H2S+ Fermentação da glicose 
com produção de gás. 
Lactose e sacarose não 
fermentadas.
Salmonella, Proteus 
Citrobacter
Alc/A/ H2S- Fermentação da Glicose 
sem produção de gás 
Lactose e sacarose não 
fermentadas 
Shigella, Providencia 
Serratia, Escherichia coli 
anaerogênica 
Alc/Alc/ H2S- Nenhuma fermentação Pseudomonas
Alcaligenes etc
A/A/gás+/ H2S+ Fermentação da glicose 
com produção de gás e 
fermentação da 
sacarose,lactose
Citrobacter freundii
Referência : 
http://users.stlcc.edu/kkiser/biochem.html
Meio de Lisina Ferro Ágar - LIA
Família Enterobacteriaceae 
Tribo I : ESCHERICHIEAE
Gênero: Escherichia
Shigella- Grupos A,B,C
Shigella sonnei
Tribo II: EDWARDSIELLEAE
Gênero : Edwardisiella
Tribo III: SALMONELLEAE
Genero: Salmonella
Tribo IV: CITROBACTEREAE
Gêneros: Citrobacter
Citrobacter freundii
Citrobacter koseri
Tribo V: KLEBSIELLEAE
Gêneros: Klebsiella
Enterobacter
Hafnia, Pantoae, Serratia
Tribo VI: PROTEAE
Gênero: Proteus 
Morganella
Providencia 
Tribo VII: YERSINEAE 
Gênero: Yersinia 
Reações-Chave que devem ser lembradas 
para a identificação de membros da 
família Enterobacteriaceae 
Reação positiva para sulfeto de Hidrogênio 
Edwardisiella tarda
Espécies de Salmonela
Citrobacter freundii
Proteus vulgaris
Proteus mirabilis 
Reação positiva de Voges Proskauer 
Espécies de Klebisiella
Espécies de Enterobacter
Espécies de Hafnia 
Espécies de Pantoae 
Espécies de Serratia 
Reação positiva para a desaminação da fenilalanina
Espécies de Proteus 
Espécies de Providencia 
Espécies de Morganella
Reação positiva para a motilidade 
Espécies de Shigella
Espécie de Yersinia
Tribo Edwardsielleae
Gênero Edwardisiella 
Espécie tipo Edwardsiella tarda
Edwardsiella tarda- Isolado de animais de sangue frio: 
repteis,peixes de aquário etc.
Características bioquímicas 
* Produtora de sulfeto de hidrogênio
* Não fermenta a lactose 
* Distingue-se da Salmonella por ser indol positivo
Patogenicidade – Infecções do trato gastrintestinal, abscesso e 
feridas associadas a traumas ou acidentes em ambientes aquáticos 
Tribo Citrobactereae
• É Composto pelo gênero Citrobacter e 11 espécies.
• Espécies associadas as infecções são: 
•Citrobacter freundii- mais comum das espécies – Isoladas de todos 
os sítios corpóreos, exceto fezes.
•Citrobacter koseri- Fezes, abscessos cerebrais, Trato urinário e 
respiratório, meningite 
• Características Bioquímicas: 
Diferenciação entre Citrobacter freundii e outras citrobactérias é a 
produção de sulfeto de hidrogênio.
Principais diferenças entre Citrobacter e Salmonella são: 
* Ausência da lisina descarboxilase e hidrólise do ONPG 
Tribo Klebsielleae
* Inclui 5 gêneros : 
Klebsiella, Enterobacter, Hafnia, Serratia, Pantoae
•Gênero Klebsiella 
Descrito pela 1ª vez por – Edwin Klebs 
Carl Friedlander- Pneumonia
•Espécie tipo deste gênero K. pneunoniae 
•Habitat- Natureza, trato gastrintestinal de humanos e animais
*Características morfológicas: 
Colônias grandes e mucoides 
Fermentam a lactose = difusão do pigmento e produção de ácidos. 
Cuidado! Nem todas as cepas de Klebsiella são mucoides. 
Características bioquímica do gênero Klebsiella 
* São imóveis;
* ausência para a ornitina descarboxilase- Exceto para 
a K. ornithinolytica ;
* Indol negativas 
* LDC positiva,
* Hidrolisam lentamente a uréia.
Klebsiella pneumoniae
* 1 a 6 % dos seres humanos normais possuem nas 
vias aéreas superiores e no trato gastrintestinal.
* Pacientes imuno comprometidos, diabetes, doença 
pulmonar crônica, alcoolismo --------- Pneumonia 
* 0,5 a 5% Pneumonias primárias são devido a 
Klebsiella pneumoniae que é caracterizada por uma 
necrose extensa, hemorragia, escarro espesso, 
mucoide e de coloração vermelha 
•Infecções extra-pulmonares 
Meningites, enterites, infecções urinárias e 
septicemias.
Outras espécies: K. oxytoca , K. ozaenae, K. rhrinoscleromatis
K. oxytoca 
* Patologia semelhante a K pneumoniae 
* Menos frequente
* São naturalmente resistente à ampicilina e carbenicilina 
K. ozaenae
* Rinite atrófica, 
* Infecções purulentas das membranas da mucosa nasal
* fezes, sangue
K. rhrinoscleromatis
* Infecção da mucosa respiratória( orofaringe , do nariz, e dos seios 
paranasais)
Klebsiella planticola
* Perfil semelhante as outras klebsielas, exceto para o indol que 
pode ser variável conforme a cepa e assimilação de metahidroxibenzoato e 
etanolamina.
Klebsiella ornithinolytica 
*Descrita em 1989 
* Era um grupo dentro K. oxytoca que descarboxilam a 
ornitina 
* Elas são LDC,ODC e indol positivas, características 
semelhantesao Enterobacter 
* Isoladas da garganta, escarro, urina, sangue, secreção 
purulenta e fezes e principalmente de alimentos. 
Klebsiella -------- Plasmídio que codifica beta-lactamase de 
amplo espectro EBLS. 
Gênero Enterobacter 
* Este gênero possui 16 espécies
• 4 não são patogênicas para o homem
* E. intermedius 
* E. dissolvens 
* E. nimipressuralis
* E. pyrinus
* Mais comuns, participa da microbiota entérica 
* E. aerogenes 
* E. cloaceae
• Estas espécies estão associadas a infecções oportunistas das vias urinárias, trato 
respiratório, feridas, septicemias.
• Perfil semelhante ao das klebsielas exceto a motilidade. 
• O gênero Enterobacter são móveis . 
E. sakazaki- Semelhante Enterobacter cloacae com pigmento amarelo após 
incubação a 25°C 
* Causa menigite, septicemia ----- Altamente virulenta 
E. gergoviae 
* Agente etiológico de infecções urinárias, do trato 
respiratório.
* Isolada do sangue, secreções, urina 
* Bioquimicamente é semelhante a espécie E. aerogenes
exceto para as provas de descarboxilação de lisina, ornitina, 
urease positivas e reação negativa para a fermentação de 
adonitol, inositol, sorbitol.
E. cancerogenus = Enterobacter taylorae
* Agente etiológico de infecções urinárias, do trato 
respiratório, osteomielite
* Característica macroscopia- No meio Mac Conkey 
aparece com o centro da colônia púrpura 
Identificação das espécies de Enterobacter 
Gênero Pantoea 
1989- Este gênero foi criado 
Espécie tipo – Pantoea agglomerans
Características bioquímicas importantes 
* São negativos para todas as descarboxilases diferindo de Enterobacter 
Gênero Hafnia
* Hafnia alvei é a única espécie do gênero 
* Anteriormente era denominada Enterobacter hafniae 
* Características bioquímicas 
Não produz ácido a partir de lactose ou sacarose 
* Patogenicidade 
Agente etiológico de gastrinterites agudas, abscessos, infecções 
urinárias 
Algumas cepas possuem um gene eaeA que codifica uma proteína 
associada à virulência e a adesão às células epiteliais .
Foi isolada em associação com E. coli enteropatogênica 
Gênero Serratia 
• Espécies de interesse médico 
Serratia marcescens
É um microrganismo oportunista com propriedades invasoras e resistentes a vários 
antimicrobianos. 
Grupo Serratia liquefaciens
É formada por diversas espécies separadas somente por técnicas de biologia 
molecular 
•Características morfológicas e bioquímicas
Serratia – Possuem três enzimas : lipase, gelatinase, DNase. Esta característica 
separa de Hafnia.
Serratia marcescens- Colônias vermelhas
Serratia liquefaciens – fermenta L-arabinose. 
Identificação das espécies de Pantoea Hafnia e Serratia
TRIBO PROTEAE 
• 3 gêneros fazem parte desta tribo:
•Proteus 
•Morganella
•Providencia 
* O gênero Proteus possui 4 espécies: Proteus vulgaris ,Proteus 
mirabilis , Proteus penneri, Proteus myxofaciens
* Diferenças entre Proteus mirabilis e Proteus vulgaris
P. mirabilis – Isolado de infecções urinárias
Indol – negativo 
Cefalosporina sensível 
P. vulgaris - Microrganismo oportunista 
Indol – positivo 
Cefalosporina resistente 
•Gênero Morganella 
• 1978 – Baseado em homologia de DNA foi criado o gênero Morganella 
•Espécie tipo : Morganella morganii
•Jansen – Separou em 3 grupos e 7 sub-grupos 
Separou a espécie em 2 sub espécies: 
M. morganii subs morganii= incapaz de fermentar trealose 
M. morganii subs.sibonii = capazes de fermentar trealose 
* Patogenicidade- Infecções urinárias, feridas, meningites 
Gênero Providencia 
•Este gênero é composto por 5 espécies
•Providencia alcalifaciens 
•Providencia stuartii
•Providencia rettgeri
•Providencia rustigianii
•Providencia heimbache
Característica do gênero 
Todas desaminam a fenilalanina e somente a P. rettgerii hidrolisa a uréia 
Todas as espécies podem ser recuperadas das fezes 
Só Providencia alcalifaciens pode ser associada a doenças diarréicas. 
Tribo Yersineae 
Gênero Yersinia 
Espécies : Yersinia pestis 
Yersinia enterocolitica 
Yersinia pseudotuberculosis 
Carcterísticas morfológicas e microscópica
*Meio Mac Conkey – Pequenas colônias 
* cocobacilos
Características no TSI 
* Coloração amarela a alaranjada em 24 horas de incubação 
* Não são móveis a 37° C 
* Y. pestis é positiva para motilidade a 27°C 
Reação Y. pestis Y. pseudotuberculosis Y.enterocolitica
Motilidade a 
25° C
- + +
Sacarose - - +
Ramnose - + -
Sorbitol - - +
Gênero Yersinia