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Bases Biológicas 1 PRÁTICA 1 Extração de DNA Vegetal OBJETIVO O objetivo dessa atividade prática foi identificar o DNA extraído a partir de material vegetal em solução de lise. METODOLOGIA Essa atividade prática foi desenvolvida por etapas ETAPA 01 - Coloquei ¾ de água (natural) no copo, acrescentei uma colher de detergente líquido incolor (sem mexer muito para não espumar) e uma colher de chá de sal de cozinha e misturei bem com o auxílio de uma colher. Essa é a solução de lise que vamos utilizar para extrair o DNA do material vegetal; ETAPA 02 - Piquei o material vegetal (cebola) em pequenos pedaços – quanto menor eles forem, melhor, e coloquei tudo dentro do recipiente (copo) com a solução de lise. Misturei tudo vagarosamente para evitar a formação de bolhas devido a presença de detergente na solução e cobrir com plástico filme o copo; ETAPA 03 - Coloquei o copo com o material em água já aquecida (Banho Maria no fogo baixo) por 20 minutos. 2 PRÁTICA 1 Extração de DNA Vegetal OBJETIVO O objetivo dessa atividade prática foi identificar o DNA extraído a partir de material vegetal em solução de lise. METODOLOGIA Essa atividade prática foi desenvolvida por etapas ETAPA 04 - Retirei o copo com material de dentro da água quente e filtrei o material utilizando o coador de café com papel filtro em um outro copo, colocando até a metade do copo; ETAPA 05 - Cobrir com papel filme o copo com material coado e dei banho de gelo e deixei esfriar por cerca de 5 minutos. ETAPA 06 - Retirei o copo do gelo e adicionei o álcool gelado (coloquei no congelador um dia antes, não congela) com muito cuidado e pela parede do recipiente. O volume de álcool adicionado deve ser aproximadamente o mesmo do material filtrado, até encher o copo e deixei descansar um pouquinho. ETAPA 07 - Observei o DNA precipitando como uma nuvem esbranquiçada na divisa entre a água e o álcool, levou de 5 a 10 minutos para o DNA ficar visível, finalizando assim a extração de DNA. 3 PRÁTICA 1 Extração de DNA Vegetal Figura 01 Materiais utilizados Figura 02 Material vegetal cebola na solução Lise Figura 03 Copo com o material em água já aquecida (Banho Maria no fogo baixo) 4 PRÁTICA 1 Extração de DNA Vegetal Figura 04 Material sendo filtrado Figura 05 Banho de gelo e deixei esfriar por cerca de 5 min Figura 06 Retirei o copo do gelo e adicionei o álcool gelado 5 PRÁTICA 1 Extração de DNA Vegetal RESULTADOS E DISCUSSÃO Você pode observar na figura ao lado o DNA precipitando como uma nuvem esbranquiçada na divisa entre a água e o álcool, levou uns 5 minutos para o DNA ficar visível, finalizando assim a extração de DNA. Foram utilizados os seguintes materiais para essa experiencia: 1 Cebola grande ; Faca de cozinha 2 ; Copos; 1 Colher sopa; 1 Colher de chá; 1 Filtro de café; 1 Coador de café; 1 Tábua de corte; Água; Plástico filme; Detergente incolor; Sal de cozinha; Panela com Água (Banho Maria); Descanso de panela; Álcool 92% (gelado); 1 par de Luvas de Procedimento (látex) Figura 07 - DNA precipitando 6 PRÁTICA 1 Extração de DNA Vegetal CONCLUSÕES No decorrer das etapas, pude observar os resultados acontecendo e por fim o DNA da cebola se precipitando. Fiz o passo a passo com disciplina e foi muito importante para atingir o meu objetivo. Precisei substituir apenas o descansador de panelas no banho maria, não tinha de metal, mas o de bambu também funcionou. PRÁTICA 2 Desnaturação de Proteínas OBJETIVO O objetivo dessa atividade foi observar as alterações sofridas nas proteínas do ovo (albumina) e do leite (caseína) submetendo elas a diferentes tratamentos para que o processo de desnaturação acontecesse, ou seja, a estrutura de uma proteína sendo mudada. METODOLOGIA - A desnaturação da Albumina (proteína da clara do ovo) Etapa 1 - Peguei 3 ovos, quebrando reservei apenas a clara adicionei uma clara em cada copo totalizando 3 copos com clara (ou recipientes transparentes). Etapa 2 - No primeiro copo já com a clara adicionei 2 colheres de água fervente; Etapa 3 - No segundo copo com a clara adicionei 2 colheres de vinagre; Etapa 4 - E no terceiro copo com a clara adicionei 2 colheres de álcool; Etapa 5 - Observei a proteína desnaturando em cada copo com a mistura do material, após alguns minutos foi possível; observar a diferença na textura e foi ficando esbranquiçada, a clara do ovo sofre uma alteração que é visível. . 8 PRÁTICA 2 Desnaturação de Proteínas OBJETIVO O objetivo dessa atividade foi observar as alterações sofridas nas proteínas do ovo (albumina) e do leite (caseína) submetendo elas a diferentes tratamentos para que o processo de desnaturação acontecesse, ou seja, a estrutura de uma proteína fosse mudada. METODOLOGIA - A desnaturação da Caseína (proteína do leite) Etapa 1 - Coloquei 50 ml de leite integral em 2 copos (ou recipientes transparentes). Etapa 2 - No primeiro copo já com os 50 ml de leite, adicionei 15 ou 20 gotas de suco de limão. Etapa 3 - No segundo copo já com os 50 ml de leite, adicionei 1 colher de vinagre. Etapa 4 - Posteriormente aguardei alguns minutos e observei que o leite coalhou, formando um resíduo que se separa do líquido e ao filtrar consegui observar mais claramente, a desnaturação desta proteína. . 9 PRÁTICA 2 Desnaturação de Proteínas A desnaturação da Albumina (proteína da clara do ovo) Figura 01 - clara em cada copo Figura 02 – claras sofridas a Desnaturação 10 PRÁTICA 2 Desnaturação de Proteínas A desnaturação da Caseína (proteína do leite) Figura 01 – 50 ml de leite em cada recipiente Figura 02 – Desnaturação do leite Com o vinagre Figura 03 – Desnaturação do leite Com o limão 11 PRÁTICA 2 Desnaturação de Proteínas RESULTADOS E DISCUSSÃO Foi possível observar que o leite coalhou, formando um resíduo que se separa do líquido e ao filtrar consegui observar mais claramente, a desnaturação da proteína. Foram utilizados os seguintes materiais para essa experiencia: 3 copos ou recipiente de vidro transparente; 3 Ovos; Álcool; Vinagre; Água fervente; 100 ml Leite Integral; 1 Limão; Vinagre; 1 copo medidor; 1 colher de sopa; 01 peneira; 1 par de Luvas de Procedimentos (látex) Figura 04 – Desnaturação da proteína do leite PRÁTICA 2 Desnaturação de Proteínas CONCLUSÕES No decorrer das etapas, pude observar os resultados esperados. Fiz o passo a passo com disciplina e foi muito importante para atingir o meu objetivo. Achei bastante interessante a desnaturação da clara do ovo com o álcool, parecia que tinha sido cozida. O experimento como todo foi fácil de se realizar, mesmo sendo feito em casa.
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