Aula de citologia

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Prof.ª Dra. Camila Alves
camilaalvesmendes@hotmail.com
Citologia clínica
EMENTA
CONTEÚDO PROGRAMÁTICO
Introdução a citopatologia
A citopatologia é a ciência que estuda as doenças através das modificações celulares, 
considerando as suas características citoplasmáticas e nucleares. 
Essa ciência desenvolveu-se através da aquisição de inúmeros conhecimentos científicos e à 
introdução de novas tecnologias, desde a invenção do microscópio óptico convencional às técnicas 
de processamento e coloração dos espécimes, propiciando melhor detalhamento e estudo das 
estruturas celulares. 
• Métodos de análise celular automatizada, técnicas de biologia molecular e sistemas 
computacionais são aplicadas ao exame citológico tradicional, ampliando as suas indicações e 
confiabilidade diagnóstica. 
CITOPATOLOGIA – Desde 1.931, com o
advento do Decreto Lei nº. 20.377, o exercício da
citopatologia ou da citologia clínica foi
reconhecido como atribuição do farmacêutico-
bioquímico, o que, hoje, se estende também aos
biomédicos. Portanto, é certo que historicamente
o farmacêutico-bioquímico realiza, em todos os
níveis, a citopatologia ou a citologia clínica.
Sir Julius Vogel (1843)
Histórico da citopatologia
Henri Lebert (1845) 
Registrou o aspecto morfológico de células aspiradas 
de tumores. 
Primeiro relato quanto à aplicação da citologia como meio 
diagnóstico.
- Identificou células malignas de um tumor mandibular.
Lambl de Praga (1850)
Descreveu células malignas em escarro e urina.
Firmou a citopatologia como ciência.
Graduação (Grécia) / Doutorado (Alemanha) / Carreira (EUA)
1914 – Cornell Medical School, Nova Iorque 
Pesquisador assistente do Instituto do câncer, renomeado Instituto 
de Pesquisa de Câncer Papanicolau.
- Estudos iniciais com esfregaços vaginais de animais e depois, de 
mulheres: Conhecer os efeitos hormonais sobre a mucosa vaginal.
Encontro acidental de células malignas chamou atenção, para que 
fosse uma técnica de rotina do diagnóstico precoce do câncer.
Dr. George Papanicolaou (1883-1962)
Patologista romeno, publicou 
“Diagnóstico do câncer do colo uterino 
por esfregaços.”
Os avanços no processamento e na coloração das secções histológicas trouxe 
atenção para a citologia, que antes era tida como “mera curiosidade”.
Aurel Babes (1928)
Monografia, “Diagnóstico de câncer uterino pelo 
esfregaço vaginal”, com a colaboração de Herbert Traut.
Introduziu a técnica de diagnosticar câncer uterino e 
lesões precursoras pela citologia –
Pap teste, em homenagem ao próprio Papanicolau.
Atlas de citologia esfoliativa
Marco importante para o
desenvolvimento da citopatologia, foi a
modificação da técnica de colheita das
amostras citológicas:
Para raspar diretamente as células do 
colo (Ernest Ayre), ao invés de colheita 
de secreções vaginais espontâneas 
(Papanicolau).
O sucesso do teste de
Papanicolau se deve:
 Baixo custo;
 Simplicidade técnica e
diagnóstica;
 Método de eleição no
rastreamento no câncer
cervical.
Foi introduzido em uma época
em que o câncer de colo uterino
representava a principal causa
de morte relacionada ao câncer
em mulheres nos EUA.
Tipos de descamação celular
Urina e 
escarro
Espontânea 
ou natural
As células são 
removidas com a 
utilização de algum 
instrumento.
Artificial
Acontece no teste de Papanicolau
As amostras citológicas são obtidas 
através do raspado da ectocérvice e 
do escovado da endocérvive.
- Espátula de Ayre
- Escovinha
As células viáveis, que 
são traumaticamente 
esfoliadas, são menores 
e com menor grau de 
maturação que as 
células descamadas 
naturalmente. 
Objetivos e limitações do exame citopatológico
 Identificação de doenças não
suspeitas clinicamente;
 Confirmação de doenças
clinicamente suspeitas;
 Acompanhamento da
evolução ou resposta ao
tratamento de determinada
doença.
Procedimento 
diagnóstico não 
invasivo sem 
complicações para 
a paciente.
Limitações:
 Tempo excessivamente
longo na interpretação das
amostras;
 A natureza algo sugestiva
da interpretação;
 A impossibilidade de
assegurar a invasão ou
extensão da invasão no
caso de lesão maligna.
A avaliação histopatológica é essencial no diagnóstico definitivo das lesões pré-
cancerosas e malignas do colo uterino, detectadas pelo exame citológico.
É aconselhável a realização do exame de Papanicolaou a 
partir do início da atividade sexual.
Inca, o exame 
deve ser 
priorizado para 
mulheres com 
atividade sexual e 
idade entre 25 e 
60 anos.
Indicada a 
realização anual, 
após dois exames 
anuais com 
resultados 
negativos, a cada 
três anos.
A partir dos 64 anos 
de idade, a 
realização do exame 
pode ser 
interrompida, desde 
tenha 2 resultados 
seguidos, nos 
últimos 5 anos.
Em pacientes que 
apresentam lesões 
pré-cancerosas, o 
seguimento 
citológico será 
semestral.
Procedimentos técnicos e laboratoriais
Normas de colheita das amostras 
cervicovaginais
 Não estar menstruada;
 Não realizar duchas vaginais e
não usar drogas intravaginais
(creme, óvulo) nas 48 horas
que antecedem o exame;
- Esfregaços citológicos encaminhados por outros 
serviços devem ser acompanhados pela ficha de 
solicitação do exame.
Na recepção as amostras devem 
ser rejeitadas se:
- Ausência ou erro na 
identificação da lâmina e/ou 
do frasco;
- Identificação da lâmina e/ou 
do frasco não coincidente 
com a do formulário;
- Lâmina danificada ou 
ausente.
Preenchimento de ficha da paciente
Antes da colheita das amostras citológicas é fundamental o preenchimento de ficha com os
dados da paciente, que incluem:
• Dados pessoais: nome completo, idade, endereço, telefone
e número do documento de identificação se corresponder a
exame do SUS.
• Dados do médico que solicitou o exame: nome completo e
telefone. No caso de exame do SUS, às vezes só há a
identificação do profissional que colheu a amostra citológica,
devendo constar na requisição do exame.
• Dados clínicos da paciente.
- Data da última menstruação;
- Paridade;
- Queixas clínicas, especialmente sangramento vaginal anormal;
- Uso de contraceptivos;
- Referência a terapia de reposição hormonal;
- Data do último exame preventivo;
- Resultados de exames citopatológicos e histopatológicos do colo/vagina prévios
- Procedimentos terapêuticos anteriores (cauterização, cirurgia, quimio e/ou
radioterapia);
• Dados macroscópicos da vagina/colo e colposcópicos se forem disponíveis.
Colheita das amostras citológicas
Antes da colheita, devem ser disponibilizadas lâminas de vidro 
identificadas com as iniciais e/ou número de registro da paciente 
(extremidade fosca da lâmina), previamente limpas e 
desengorduradas com gaze umedecida com álcool. 
Ainda são necessárias espátula de Ayre para a colheita das amostras 
da ectocérvice e da vagina através de “raspados” e escovinha para a 
colheita da endocérvice. 
Devem ser acessíveis ainda tubos de plástico contendo etanol a 
95% para acondicionar os esfregaços e obter a sua fixação 
imediata.
A parede do colo do útero é formada por duas 
camadas, sendo elas: a endocérvice e a 
ectocérvice. 
A ligação da ectocérvice e da endocérvice recebe
o nome de junção escamocolunar (JEC), podendo
ter sua localização modificada de acordo com o
estado hormonal, gestacional, parto vaginal e/ou
trauma.
A endocérvice é uma camada mucosa, constituída
por um epitélio colunar simples mucossecretor,
que é responsável pela produção do muco cervical;
A ectocérvice é constituída por um epitélio
escamoso estratificado não queratinizado, que se
assemelha ao da vagina.
 A colheita do fundo de saco posterior da vagina é
particularmente importante nas mulheres peri e pós-
menopausadas;
• Colheita vaginal é também de interesse para a identificação
de micro-organismos patogênicos.
A chamada colheita tríplice foi preconizada há longos anos e 
nessa modalidade de colheita, as amostras obtidas do fundo 
de saco posterior da vagina, da ectocérvice
e da endocérvicesão distribuídas na mesma lâmina. 
Necessário um treinamento adequado para garantir a boa qualidade dos 
espécimes, evitando artefatos de esmagamento e dessecação do material!
O espéculo vaginal sem lubrificante (para 
evitar contaminação da amostra) é 
introduzido para a visualização do colo. 
Depois de remover com algodão o excesso de muco, 
secreção ou sangue, a espátula de Ayre é apoiada no 
canal endocervical, 
sendo executado um raspado na junção 
escamocolunar (JEC) 
através de movimento de rotação de 360º.
A amostra do fundo de saco posterior da vagina 
também é obtida através de raspado, com a 
extremidade romba da espátula de Ayre. 
A espátula é deixada em repouso sobre o espéculo e
imediatamente é realizada a colheita do material endocervical.
A escovinha designada 
especialmente para essa finalidade é 
inserida através do orifício cervical 
externo, sendo executada uma 
rotação completa no canal que pode ser 
finalizada com um movimento de vai e 
vem, com cuidado para 
não traumatizar a mucosa, evitando 
sangramento. 
 Dificuldade na colheita das amostras em mulheres pós-
menopausadas devido ao dessecamento das mucosas pela
diminuição fisiológica das secreções glandulares.
 Em mulheres histerectomizadas (remoção do útero), a
colheita das amostras é realizada através do raspado da
cúpula e das paredes vaginais.
 Resultados mais seguros.
 Tempo de rastreamento e de obtenção de resultados 
reduzidos.
 Mais clareza na visualização e interpretação de células de 
importância diagnóstica.
 Alta Produtividade.
Confecção dos esfregaços citológicos
Os espécimes obtidos são espalhados na mesma lâmina de vidro de 
modo delicado e rápido, confeccionando-se esfregaços finos e 
uniformes.
A pressão excessiva na confecção do esfregaço pode resultar 
no esmagamento e na distorção das células.
Por outro lado, a demora na fixação da amostra em etanol a 
95% pode levar à dessecação com alterações celulares degenerativas.
Especial cuidado deve ser tomado com o espécime endocervical, já 
que as células glandulares dessa mucosa são mais frágeis e 
suscetíveis a artefatos técnicos.
É muito 
importante no 
momento da 
colheita e da 
confecção dos 
esfregaços ter 
precaução para 
não 
contaminar as 
lâminas com fios 
de algodão da 
gaze ou talco 
contido nas luvas 
utilizadas durante 
o procedimento.
Fixação dos esfregaços citológicos
 O agente fixador não deve ser
tóxico/volátil e de baixo custo;
 O etanol a 95% é o fixador de rotina
devido a sua eficiência;
 O esfregaço ainda úmido deve ser
imediatamente imerso em etanol ou
fixadas com o spray (15 a 20cm de
distância);
 O tempo de permanência da amostra no
fixador deve ser no mínimo 15 minutos,
recomendando-se não ultrapassar duas
semanas;
• Aerossol – diferentes misturas de álcool, ácido acético,
etilenoglicol ou propileno.
• Sprays - (álcool isopropílico e glicol).
• Líquidos – álcool etílico a 95%, metílico, isopropílico ou três
partes de álcool etílico a 95% e sete partes de álcool butílico
terciário.
A vantagem desses fixadores de cobertura em relação ao
etanol é a facilidade de transporte das amostras quando são
obtidas à distância do laboratório.
Com a aplicação desses fixadores, os esfregaços podem ser
acondicionados em caixas de papelão, evitando os possíveis
transtornos pelo vazamento do etanol durante o transporte e
consequente dano às preparações citológicas.
As lâminas, quando se usa aerossol secam em dez minutos e 
conservam-se, à temperatura ambiente, cerca de quinze dias ou 
devem ficar no fixador líquido quinze minutos até sete ou dez dias.
A demora na fixação ou a utilização de etanol em
concentração inferior à preconizada pode levar a alterações
celulares importantes, dificultando ou mesmo
impossibilitando a avaliação oncológica.
Os seguintes efeitos podem ser encontrados nas amostras
dessecadas (exposição prolongada no ar):
 Aspecto opacificado, turvo, dando a impressão de que a
amostra está fora do campo de visão.
 Aumento da eosinofilia citoplasmática.
 Aumento nuclear (de quatro a seis vezes maior ao verificado
nas amostras fixadas imediatamente) e perda dos detalhes
da estrutura cromatínica.
Após a fixação as lâminas devem ser remetidas ao laboratório o mais 
brevemente possível, acompanhadas de informação clínica e devidamente 
rotuladas!
Erros comuns:
1. Colheita de material é insuficiente;
2. Material inadequadamente espalhado;
3. Material colhido do local errado;
4. Uso de lâminas que estão insuficientemente limpas ou 
desengorduradas;
5. Secagem antes da fixação ou durante a coloração;
6. Fixação insuficiente;
7. Coloração incorreta.
A coloração de Papanicolaou é composta de uma sequência de três soluções 
corantes e fases de hidratação, coloração e desidratação da amostra.