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UNIVERSIDADE FEDERAL DA GRANDE DOURADOS FACULDADE DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS GRADUAÇÃO EM BIOTECNOLOGIA- BACHARELADO BIOLOGIA CELULAR Acadêmica: Hanallybia Bretas Rocha - P2 TÉCNICA E MANUSEIO NO USO DO MICROSCÓPIO DE LUZ Relatório da disciplina de Biologia Celular para registro da aula prática do Curso de Biotecnologia, da Universidade Federal da Grande Dourados, sob a orientação do Prof.º Marcos Gino Fernandes. DOURADOS 2024 INTRODUÇÃO Este trabalho procura explorar e entender o funcionamento do microscópio óptico para observar substâncias invisíveis a olho nu. Os fatos discutidos neste documento são de suma importância para a formação intelectual do leitor, visto que a compreensão de todo o equipamento leva ao estudo da microscopia, que visualiza micro-organismos e estruturas de diferentes perspectivas (CENTRO DE ESTUDOS DO GENOMA HUMANO) Os microscópios são ferramentas de trabalho ricas e complexas que sua manipulação se tornou uma atividade totalmente especializada. Sendo assim, a microscopia tornou-se ferramenta multidisciplinar e indispensável em vários campos do conhecimento. Atraí físicos, químicos, biólogos e outros profissionais que se encantam pelas possibilidades da área. (DOUGLAS MIQUITA; UFMG 2012) Outro exemplo da importância do microscópio é na medicina, que o utiliza para estudos em amostras de sangue e tecidos para diagnosticar doenças. Logo, o uso do microscópio em tratamentos possibilita a detecção de canais que normalmente não seriam reconhecidos e tratados na ausência de uma ampliação aprimorada (DE PAULA, CRISTIANE COIMBRA, ET AL). O microscópio possui diversas ferramentas manejáveis para melhor observação do item, tais como: a base a qual serve de suporte, a coluna que está interligada a base que possui o macrométrico e o micrométrico (Responsáveis por regular a imagem), a platina a qual contém uma lâmina onde é ajustada pela pinça para melhor visualização do elemento, o revólver que faz a troca das lentes, os oculares (Lentes que ajudam na ampliação de imagem) , o condensador e o diafragma, onde distribuem e normalizam a intensidade da luz (CENTRO DE ESTUDOS DO GENOMA HUMANO). De acordo com as aulas práticas, ao utilizar o microscópio de luz deve-se realizar um preparo minucioso antes de observar o produto, sendo assim, utiliza-se a lâmina, a lamínula e a água destilada, em seguida o item é posto para observação. O material utilizado neste documento para análise foi o recorte de uma letra de jornal que foi ampliado em 40 vezes, 100 vezes, 400 vezes e por fim 1000 vezes. OBJETIVO: > Aprender a manusear o microscópio de luz e conhecer suas principais partes e funções. MATERIAIS: • Microscópio óptico; • Letras de jornal recortadas; • Lâmina e lamínula; • Tesoura; • Pinça de ponta fina; • Pipeta; • Água destilada; • Papel filtro; PROCEDIMENTO: 1. Para a prática foi recortado uma pequena letra de aproximadamente 0.5 cm de um jornal para visualização. 2. Sendo assim, foi posto uma gota de água destilada em uma lâmina com o auxílio de uma pipeta e depois a letra do jornal recortada. 3. Em seguida, inseriu-se a lamínula inclinada cautelosamente a fim de evitar bolhas de ar. 4. Se houver excesso de água fora da lamínula deve-se retirá-la com papel toalha ou outro absorvedor. 5. Ao colocar a lâmina na pinça foram feitas as etapas de focalização ao item, como: ligar a fonte luminosa, movimentar o condensador e o diafragma de forma que obtenha uma boa iluminação e olhando pelas lentes oculares ajustar o macrométrico e micrométrico para conseguir nitidez. 6. Primeiro foi utilizado o aumento de 40x, depois de 100x, em seguida de 400x e por fim 1000x que foi utilizado uma gota do óleo de imersão para visualização na lâmina. 7. Após a prática, a lâmina e lamínula foram colocadas em béqueres com água destilada para limpeza, a lente de aumento para 1000x que estava no óleo de imersão foi limpa e o papel foi descartado. 8. Para guardar corretamente o microscópio a platina foi movida totalmente para baixo, o diafragma de iluminação foi colocado no mínimo, o microscópio desligado e por último enrolou-se o fio para trás e colocou-se a sacola plástica por cima. RESULTADOS: A. 40x B. 100x Fonte: Arquivo pessoal Fonte: Arquivo pessoal C. 400x D. 1000x Fonte: Arquivo pessoal Fonte: Arquivo pessoal OBSERVAÇÕES: Como as lentes do microscópio invertem a imagem, ocorreu o mesmo com a letra a do jornal. O resultado da letra A com a lente objetiva de 4x (A qual foi multiplicada por 10x pelos oculares) tornou-se nitidamente mais clara em comparação com as outras lentes observadas, além do manuseio do micrométrico se tornar mais fácil. A lente objetiva de 10x (Total 100 vezes) ampliou à imagem e foi possível observar a aparição de algumas linhas pretas na imagem. Já a lente objetiva de 40x (Total 400 vezes) aumentou a letra e deixou apenas uma listra preta visível, também foi possível avistar várias linhas, porém, a imagem tornou-se ligeiramente borrada com a tinta preta. No entanto, o caso da lente de 100x (Total 1000 vezes) foi diferente, pois só mostrou uma ilustração borrada acompanhada de linhas pretas pouco perceptíveis. DISCUSSÃO: 1. Quais as etapas de focalização do microscópio óptico (fotônico de luz)? A primeira etapa é movimentar a platina para centralizar o objeto em análise. Em seguida, utilizar o macrométrico para subir a mesa e depois ajustar com o micrométrico. Logo, é preciso deslocar o diafragma para adequar a intensidade luminosa para a melhor visualização. 2. Quais as principais partes de um microscópio óptico? E qual a função de cada uma? Lentes oculares: Sua função é aumentar a imagem formada pela objetiva, que multiplica a visualização em 10 vezes. Tubo binocular: Sua função é ajustar em diferentes espaços entre os olhos de cada observador. Revólver: Sua função é movimentar as lentes objetivas que estão inseridas nele, ocorrendo sempre no sentido da menor objetiva para a maior objetiva. Objetivas: Estas lentes ampliam a imagem do objeto analisado em 4 vezes, 10 vezes, 40 vezes e por fim 100 vezes, na qual é necessária uma gota do óleo de imersão entre a lamínula e a lente para melhor captação da quantidade de luz, evitando também riscos e estrago da lente. Base: É o local de apoio do microscópio. Coluna: É o suporte que sustenta os tubos, a platina, o macrométrico e o micrométrico. Platina/Mesa: Pode ser deslocada para centralizar corretamente o objeto, a qual contém uma pinça para fixar e movimentar a lâmina com o material observado. Pinça: Serve para movimentar a lâmina para localização do campo de observação. Diafragma: Fornece um grande montante de luz que pode ser movimentado para maior ou menor proporção. Condensador: Concentra os raios de luz sobre a lâmina. Ajuste Macrométrico: Movimenta a mesa para cima ou para baixo de forma rápida. Ajuste Micrométrico: Possui a mesma função do macrométrico, porém, o movimento é devagar e preciso para focalizar o material. Ajuste: Ajuda a focalizar o objeto na platina. Luz: Serve como fonte de luz, projetando raios para luminosidade. Fonte: Arquivo pessoal 3. Quais as diferenças no tamanho da imagem e da área do campo de visão em cada objetiva utilizada? Observando as diferentes lentes, nota-se que quanto maior for a ampliação da lente objetiva, menor será o tamanho da imagem e o campo de visão se torna mais estreito. 4. Quais as diferenças observadas, em relação à posição da letra, a olhonu e ao microscópio? Ao observar o objeto através do microscópio, a posição da letra se torna invertida em comparação à observação a olho nu. Isso ocorre devido à forma como as lentes do microscópio retratam a luz para formar a imagem ampliada. 5. Por que é necessária a utilização do óleo de imersão com a lente objetiva de 100x? Ao utilizar o óleo de imersão com a lente objetiva de 100x percebe-se que possui um índice de refração parecido ao vidro da lâmina e das lentes, portanto, minimiza a perda de luz e aumenta a visualização de forma mais nítida. Ademais, evita de estragar ou riscar a lente que entra em contato com a lâmina. 6. Qual o aumento total da imagem ao se observar o objeto nas várias objetivas? O aumento total da imagem é a multiplicação da ampliação de cada objetiva pela ampliação da ocular. Considerando que as lentes oculares possuem uma ampliação de 10x, ocorre um aumento proporcional em todas as objetivas. Dessa forma, a objetiva de 4x resulta em uma ampliação de 40x, a de 10x em 100x, a de 40x em 400x e a de 100x em 1000x. 7. Qual a diferença entre o aumento da imagem e a ampliação acompanhada do poder de resolução do microscópio? O aumento da imagem apenas amplia o objeto observado sem nenhum tipo de nitidez, enquanto o poder de resolução do microscópio consegue distinguir detalhes precisos na imagem. CONCLUSÃO Através dessa aula foi possível perceber a importância do microscópio óptico, pois ele nos permite visualizar detalhes que são invisíveis a olho nu, sem contar no quanto ele contribui para o avanço em diversas áreas da ciência. Quanto à prática de observação da letra de jornal no microscópio, pude perceber a incrível capacidade do equipamento em ampliar detalhes que normalmente passam despercebidos por nós, mostrando o quão incrível é essa ferramenta para projetos científicos e também o estudo de microestruturas. REFERÊNCIAS: CENTRO DE ESTUDOS GENOMA HUMANO. Microscopia: Guia prático para utilização do microscópio óptico. São Paulo:USP. Disponível em: https://genoma.ib.usp.br/files/upload/44/microscopia-2.pdf. Acesso em: 29 mar. 2024. DOUGLAS MIQUITA; UFMG 2012. Microscopista alia capacidade de operar máquinas complexas ao espírito investigativo. Universidade Federal de Minas Gerais,2012. Disponível em: https://ufmg.br. Acesso em: 29 mar. 2024. DE PAULA, CRISTIANE COIMBRA, ET AL. A importância da microscopia versus hemocultura com foco na urgência do diagnóstico de tratamento. Anais do Workshop de Boas Práticas Pedagógicas do Curso de Medicina. Vol. 5. 2021.
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