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22/08/2020 1 Biologia Celular e Molecular Fundamentos da biologia molecular Profa. Dra. Cristiane Mota Leite • Unidade de Ensino: 3 • Competência da Unidade: Capacidade de correlacionar os conhecimentos sobre biologia celular na aplicação de técnicas de biologia molecular. • Resumo: Diferenças estruturais entre DNA e RNA; funções do DNA e RNA; aplicações da genética molecular; replicação, transcrição e tradução do código genético; processos de regulação da expressão gênica em procariotos e eucariotos. • Palavras-chave: Núcleo, DNA, RNA, material genético, genoma, mitose, duplicação celular, síntese proteica, expressão gênica, dogma central, transcrição, ativação, cromatina, genética. • Título da Teleaula: Fundamentos da Biologia Molecular. • Teleaula nº: 3 Contextualizando a teleaula • Ácidos nucleicos: função e estrutura; • O que é: replicação, transcrição e tradução; • Como a expressão gênica pode ser regulada. Ácidos nucleicos: tipos, constituição e funções. Ácidos nucleicos • Função: armazenamento e transmissão da informação genética. DNA – ácido desoxirribonucleico: armazenador da informação genética na maioria dos seres vivos. RNA – ácido ribonucleico: armazenador da informação genética em alguns vírus. Importante na transmissão da informação. Ácidos nucleicos: são unidades de NUCLEOTÍDEOS • Base nitrogenada; • Grupo fosfato; • Pentose: • Desoxirribose (DNA) • Ribose (RNA) Fonte: PIMENTEL, M. M. G., GALLO, C. V. M., SANTOS-REBOUÇAS, C. B. Genética essencial. 1. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2017. 1 2 3 4 5 6 22/08/2020 2 Bases nitrogenadas dos ácidos nucleicos guanina Purinas adenina citosina Pirimidinas timina uracila Fonte: 1,2,3NEUROtiker/Wikimedia Commons; Yikrazuul/Wikimedia Commons.; CC BY-SA 3.0/Wikimedia Commons. (DNA) (RNA) Ácidos nucleicos • São unidos por ligações fosfodiéster. Ligação fosfodiéster Fonte: Adaptado de CNX OpenStax/Wikimedia Commons. Estrutura do DNA. Você é docente do Departamento de Genética e Melhoramento Animal e Vegetal e será responsável por ministrar a disciplina de Genética Molecular para graduação. Aproveite a primeira aula para estimular discussões e rodas de conversa. Aproveite também para anotar os questionamentos dos alunos!!! Qual a diferença entre cromossomo, gene e genoma? O que significa a sigla DNA e RNA? O que é a estrutura da dupla-hélice? Quem descobriu? O que é o sentido 5’-3? Fonte: Avatar Maker. Estrutura do DNA • Pontes de hidrogênio entre bases complementares; • Dupla hélice. Fonte: Adaptado de 2CNX OpenStax/Wikimedia Commons. Genoma • DNA nuclear, DNA das mitocôndrias e DNA do cloroplasto (célula vegetal). Fonte: Chromosome-es.svg: KES47/Wikimedia Commons. 7 8 9 10 11 12 22/08/2020 3 DNA mitocondrial e DNA do cloroplasto • Cromossomo circular. Fonte: Adaptado de Kelvinsong/Wikimedia Commons. Fonte: Adaptado de National Human Genome Research Institute/Wikimedia Commons. RNA: estrutura e funções. Estrutura do RNA • Fita única; • Uracila substitui a timina; • Pentose: ribose; Fonte: Difference_DNA_RNA- DE.svg/Wikimedia Commons. Funções do RNA • RNA mensageiro (RNAm): transferência da mensagem do DNA ao citoplasma, carregando a sequência de aminoácidos que será convertida em proteínas; • RNA transportador (RNAt): transporte de aminoácidos para os ribossomos durante síntese proteica; • RNA ribossômico (RNAr): associado às proteínas, constitui as subunidades dos ribossomos (síntese proteica). Replicação do DNA. Replicação do DNA • Eucariotos: fase S da interfase; • Semiconservativa Fonte: Adaptado de LadyofHats Mariana Ruiz/Wikimedia Commons. 13 14 15 16 17 18 22/08/2020 4 Perguntas Processo de transcrição do DNA. Transcrição do DNA • Dogma Central da Biologia Molecular Transcrição do DNA INÍCIO ALONGAMENTO FINALIZAÇÃO Fonte: Adaptado de Calibuon/Wikimedia Commons. Transcrição do DNA Processamento do Pré-RNAm em eucariotos DNA Pré- RNAm RNAm Transcrição Processamento Tradução Proteína Sequência regulatória Sequência regulatóriaRegião de leitura do DNA Íntron Íntron Região de codificação da proteína Éxon Éxon Cap 5’ Cauda Poli-A Éxon Íntron Fonte: Adaptado de Thomas Shafee/Wikimedia Commons. Tradução ou síntese de proteínas. 19 20 21 22 23 24 22/08/2020 5 Tradução Fonte: 2LadyofHatsTranslation/Wikimedia Commons. Código genético (códons e seus aminoácidos) Fonte: Adaptada de Dave15o1/Wikimedia Commons. Regulação da expressão gênica. Você é docente do Departamento de Genética e Melhoramento Animal e Vegetal e será responsável por ministrar um curso sobre expressão gênica no curso de inverno do departamento. Você deverá abordar alguns tópicos pertinentes ao assunto do curso. Regulacão da expressão gênica!!! Fonte: Avatar Maker. Regulação da expressão gênica • Processo que controla quais genes no DNA da célula são expressos (usados para produzir um produto funcional como uma proteína); • A regulação da expressão gênica em procariotos e eucariotos pode acontecer em diferentes níveis no caminho molecular que vai desde a molécula do DNA até o produto proteico final. Níveis para regulação da expressão gênica • Alteração dinâmica da estrutura da cromatina; • Transcrição; • Processamento do RNAm; • Estabilidade do RNA; • Tradução; • Pós-tradução. • Processamento, degradação, endereçamento e transporte das proteínas. 25 26 27 28 29 30 22/08/2020 6 Fatores de transcrição • Ajudam a transformar genes específicos em "ligados" ou "desligados" por meio de conexão a um DNA próximo. • Ativadores • Repressores São proteínas que regulam a transcrição dos genes Cromatina e a regulação da expressão gênica. Condensação da cromatina Fonte: Chromosome-es.svg: KES47/Wikimedia Commons. Fonte: Modificado de 3CNX OpenStax/Wikimedia Commons. Metilação das Histonas Acetilação das Histonas Fonte: Nugenis. Fonte: Adaptado de 4CNX OpenStax/Wikimedia Commons. Pergunta? Recapitulando a aula • Ácidos nucleicos: função e estrutura; • O que é: replicação, transcrição e tradução; • Como a expressão gênica pode ser regulada. 31 32 33 34 35 36 22/08/2020 7 Referência das figuras • PIMENTEL, M. M. G., GALLO, C. V. M., SANTOS-REBOUÇAS, C. B. Genética essencial. 1. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2017. • 1NEUROtiker - Own work, Public Domain. Disponível em https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=2212115. Acesso em 12 ago 2019. • CC BY-SA 3.0. Disponível em https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=106150. Acesso em 12 ago 2019. • 2NEUROtiker - Own work, Public Domain. Disponível em https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=2348346. Acesso em 12 ago 2019. • 3NEUROtiker - Own work, Public Domain. Disponível em https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=2230876. Acesso em 12 ago 2019. • Acesso em 12 ago 2019. Referência das figuras • CNX OpenStax - https://cnx.org/contents/5CvTdmJL@4.4, CC BY 4.0. Disponível em https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=53713040. Acesso em 12 ago 2019. • 2CNX OpenStax - https://cnx.org/contents/5CvTdmJL@4.4, CC BY 4.0. Disponível em https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=53713039. Acesso em 12 ago 2019. • Chromosome-es.svg: KES47 (talk)derivative work: KES47 - File:Chromosome-es.svg, CC BY 3.0. Disponível em https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=10856406. Acesso em 12 ago 2019. • Kelvinsong - Own work, CC BY-SA 3.0. Disponível em https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=23519043. Acesso em 12 ago 2019. Referência das figuras • National Human Genome Research Institute - National Institutes of Health. National Human Genome Research Institute. “Talking Glossary of Genetic Terms.”Retrieved November 17, 2016, from https://www.genome.gov/glossary/index.cfm?id=129, Public Domain. Disponível em https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=53240683. Acesso em 12 ago 2019. • Difference_DNA_RNA-DE.svg: Sponk (talk)translation:Sponk (talk) - chemical structures of nucleobases by Roland1952, CC BY-SA 3.0. Disponível em https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=9810855. Acesso em 13 jun 2018. • LadyofHats Mariana Ruiz - Own work. Image renamed from File:DNA replication.svg, Public Domain. Disponível em https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=6916971. Acesso em 14 jun 2018. Referência das figuras • Calibuon at English Wikibooks - Transferred from en.wikibooks to Commons by Adrignola using CommonsHelper., Public Domain. Disponível em https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=10872631. Acesso em 12 ago 2019. • Thomas Shafee - Shafee T, Lowe R (2017). "Eukaryotic and prokaryotic gene structure". WikiJournal of Medicine 4 (1). DOI:10.15347/wjm/2017.002. ISSN 20024436., CC BY 4.0. Disponível em https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=39514465. Acesso em 12 ago 2019. • 2LadyofHatsTranslation: Nossedotti (Anderson Brito) - File:Ribosome_mRNA_translation_en.svg, Public Domain. Disponível em https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=14698805. Acesso em 12 ago 2019. • Dave15o1 - Own work, Public Domain. Disponível em https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=5377905. Acesso em 12 ago 2019. Referência das figuras • 4CNX OpenStax - http://cnx.org/contents/GFy_h8cu@10.53:rZudN6XP@2/Introduction, CC BY 4.0. Disponível em https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=49929328. Acesso em 12 ago 2019. • Nugenis. Disponível em https://nugenis.eu/ru/%D0%B8%D1%81%D1%81%D0%BB%D0%B5%D0%B4%D0%BE%D0%B2%D0% B0%D0%BD%D0%B8%D1%8F/. Acesso em 12 ago 2019. 37 38 39 40 41 42