Relatório - microbiologia clínica

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CENTRO UNIVERSITÁRIO MAURÍCIO DE NASSAU
CURSO DE FARMÁCIA
MICROBIOLOGIA CLÍNICA
TÉCNICA DE COLORAÇÃO DE GRAM
João Pessoa – PB
2021
1. INTRODUÇÃO
A coloração de Gram, é uma técnica rápida e simples projetada para distinguir bactérias com base nas características de suas paredes celulares após serem expostas a diferentes corantes e soluções. 
Portanto, além de confirmar a morfologia das bactérias, a coloração de Gram também pode confirmar a cor que elas obtiveram. Este resultado é muito importante para determinar outras estratégias de identificação de espécies bacterianas e para os médicos orientarem o tratamento preventivo com base nas seguintes condições. 
2. DESENVOLVIMENTO
2.1. Definir características de bactérias gram negativas e gram positiva. Dar um exemplo de cada
A parede da célula Gram-negativa é constituída por estruturas de múltiplas camadas bastante complexas, que não retêm o corante quando submetidas a solventes nos quais o corante é solúvel, sendo descoloradas e, quando acrescentado outro corante, adquirem a nova coloração. 
Já a parede da célula Gram-positiva consiste de única camada que retém o corante aplicado, não adquirindo a coloração do segundo corante.
Como fatores de ataque ou agressão, as células Gram-positivas e Gram-negativas caracterizam-se por graus diferentes de virulência. As bactérias Gram-negativas são constituídas por uma endotoxina, o LPS, que lhes confere a propriedade de patogenicidade, enquanto nas bactérias Gram-positivas a exotoxina, composta pelo ácido lipoteicoico, tem como característica principal a aderência.
As bactérias Gram negativas:
· Escherichia coli
· Salmonella
· Shigella
· Pseudomonas
· Moraxella
· Helicobacter
· Stenotrophomonas
· Bdellovibrio
· Legionella
As bactérias Gram positivas:
· Filo 
· Firmicutes - Bacilos, Estreptococos, Estafilococos, 
· Enterococos, 
· Actinobacteria, 
· Listeria, 
2.2. Descrever a técnica de coloração.
Colocar algumas colônias da bactéria na lâmina, podendo ser acrescentando uma gota de água para facilitar a homogeneização das colônias;
Deixar secar um pouco, podendo a lâmina passar rapidamente pela chama para favorecer a secagem, no entanto é importante ter atenção à temperatura, já que se a temperatura for muito alta é possível que haja alteração na estrutura da bactéria, o que pode interferir no resultado do exame;
Quando a lâmina estiver seca, cobrir com o corante cristal violeta e deixar agir por cerca de 1 minuto;
Lavar a lâmina com um filete de água corrente e cobrir a lâmina com o lugol, que tem como objetivo fixar o corante azul, e deixar agir por 1 minuto. Ambos os tipos de bactérias conseguem absorver o complexo formado pelo corante e o lugol, ficando azuis;
Em seguida, lavar a lâmina com água corrente e aplicar álcool a 95%, deixando agir por 30 segundos. O álcool é responsável por dissolver a membrana de lipídios formadora das bactérias gram-negativas e, assim, remover o complexo formado entre o corante e o lugol, descorando essas bactérias. No entanto, no caso das bactérias gram-positivas, o álcool desidrata a parede celular das bactérias gram-positivos, havendo contração dos poros e as tornando impermeáveis;
Depois, deve-se lavar novamente em água corrente e cobrir a lâmina com o segundo corante, a fucsina ou safranina e deixar agir por 30 segundos;
Em seguida, deve-se lavar a lâmina com água corrente e deixar secar à temperatura ambiente.
2.3. Qual a função do álcool 95% (descorante)
O álcool 95% é responsável por dissolver a membrana de lipídios formadora das bactérias gram-negativas e, assim, remover o complexo formado entre o corante e o lugol.
REFERÊNCIAS
BRASIL. Técnica de Coloração de Gram. 2001. Disponível em: https://bvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/115_03gram.pdf. Acesso em: 29 set 2021.
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