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ATIVIDADE 2 - BIO - ENGENHARIA GENÉTICA - 52_2024 Período:20/05/2024 08:00 a 30/06/2024 23:59 (Horário de Brasília) Status:ENCERRADO Nota máxima:0,50 Gabarito:Gabarito será liberado no dia 01/07/2024 00:00 (Horário de Brasília) Nota obtida:0,35 1ª QUESTÃO Na Coreia do Sul, pela primeira vez, dois cães da raça beagle nasceram a partir de células de pele clonadas e alteradas por edição genética (CRISPR). A esperança dos cientistas envolvidos no trabalho é de que sua técnica possa ser usada para eliminar mutações causadoras de doenças em animais com pedigree. Apesar de cachorros já terem nascido anteriormente editando a genética de ovos fertilizados, esta é a primeira vez que se usa a técnica em células clonadas. A novidade é benéfica porque significa que as mutações podem ser removidas sem afetar outras características, como acontece na edição de genes de óvulos. Beagles são clonados em técnica inédita para tentar driblar doenças. Disponível em: <https://vidadebicho.globo.com/comportamento/noticia/2022/07/beagles-sao-clonados-em-tecnica- inedita-para-tentar-driblar-doencas.ghtml>. Acesso em: 11 abr. 2024. Considerando o texto apresentado e com os conhecimentos sobre a Clonagem Gênica, avalie as afirmações a seguir. I. A escolha do vetor de clonagem é de suma importância, pois o DNA inserido precisará ser multiplicado com facilidade. II. Para o isolamento do genoma de interesse, é utilizado a enzima ligase para selecionar apenas os fragmentos contendo a informação da expressão que será introduzida no vetor. III. A enzima de restrição atuará apenas no vetor, cortando o local onde o gene será inserido. IV. Para o sucesso da clonagem gênica, é de suma importância conter um vetor de clonagem, o gene de interesse e as enzimas ligase e de restrição. É correto o que se afirma em: ALTERNATIVAS I, apenas. II, apenas. I e IV, apenas. II e III, apenas. I, II e III. 2ª QUESTÃO 05/07/2024, 01:17 Unicesumar - Ensino a Distância about:blank 1/7 Uma vez que um fragmento de DNA específico tenha sido isolado, é geralmente caracterizado pela determinação da sequência exata de nucleotídeos da molécula. A investigação é finalizada com uma técnica de reação em cadeia da polimerase (polymerase chain reaction, PCR). LODISH, Harvey. Biologia celular e molecular. 2014 . Em relação à técnica de PCR, assinale a opção correta: ALTERNATIVAS A PCR simula a amplificação de um RNA. A PCR precisa de grandes quantidades de material genético para ser eficiente. A técnica de PCR me mostra os fragmentos de DNA com seus tamanhos em pares de bases. A técnica de PCR é conhecida por gerar várias cópias do material genético, porém, tem a desvantagem de ser demorada e necessitar de vários ciclos. O DNA para a PCR pode ser extraído de organismos vivos, em decomposição, ou vestigiais encontrados em ossadas e fósseis, desde que esteja íntegro. 3ª QUESTÃO A PCR depende da habilidade de desnaturar alternadamente moléculas de DNA de fita dupla e hibridizar fitas simples complementares de modo controlado. Para organismos nos quais todo o genoma, ou a maioria dele, tenha sido sequenciado, a amplificação por PCR, começando com DNA genômico total, tende a ser a maneira mais fácil de se obter uma região específica do DNA de interesse para clonagem. LODISH, Harvey. Biologia celular e molecular. 2014 . Considerando as informações apresentadas, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas. I. A técnica de PCR é um método para amplificação de moléculas inteiras ou fragmentos de DNA. PORQUE II. Para a amplificação de um RNA de fita simples, a molécula deve ser convertida em uma dupla fita de cDNA, ou DNA complementar, por meio do auxílio da transcriptase reversa. A respeito dessas asserções, assinale a opção correta: ALTERNATIVAS 05/07/2024, 01:17 Unicesumar - Ensino a Distância about:blank 2/7 As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa correta da I. As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa correta da I. A asserção I é uma proposição verdadeira, e a II é uma proposição falsa. A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira. As asserções I e II são proposições falsas. 4ª QUESTÃO A terapia gênica é uma abordagem genética promissora que teve como objetivo inicial tratar doenças herdadas ou adquiridas com auxílio da substituição, ou modificação de genes alterados, ou ausentes, e pode ser definida como uma técnica para introduzir material genético para obter uma resposta terapêutica. DOLINSKY, L. C. de. Engenharia Genética. Florianópolis–SC: Arqué, 2023. Com relação às técnicas de terapia gênica, assinale a opção correta: ALTERNATIVAS Na terapia gênica, o gene mutado é alvo de replicação. A terapia pode ser aplicada em qualquer célula do corpo, pois o vetor irá diferenciar a célula após a infecção. Podem ser utilizados vetores virais ou não virais, como partículas sintetizadas para carrear e transferir a informação de interesse. A terapia gênica é uma técnica utilizada há décadas, especialmente empregada no cruzamento de animais para a seleção de características de interesse. Para o sucesso da expressão do gene editado, o gene receptor precisa passar por fase de desnaturação, para abertura da dupla fita de DNA, seguida por anelamento e extensão. 5ª QUESTÃO Moléculas ionizadas colocadas em um campo elétrico migram de acordo com suas cargas e pesos moleculares. Se a carga for positiva, elas migrarão para o polo negativo ou cátodo e, inversamente, se ela for negativa, a migração ocorrerá na direção do polo positivo ou ânodo. Este é o fundamento de outra técnica analítica, a eletroforese. MALAJOVICH, M. A. Biotecnologia, 2011. Disponível em: https://pessoal.utfpr.edu.br/leilamarques/arquivos/BIOTECNOLOGIA_2012.pdf. Acesso em: 9 maio de 2024. Com base nos conhecimentos sobre a eletroforese, avalie as afirmações a seguir. I. A eletroforese de DNA pode ser utilizada para purificar e concentrar uma sequência de interesse. II. Os tipos de géis utilizados não interferem na sensibilidade da leitura das bandas. III. A eletroforese de proteínas separa por tamanho e carga, enquanto na eletroforese de DNA é possível identificar apenas a separação por tamanho de pares de bases. É correto o que se afirma em: ALTERNATIVAS 05/07/2024, 01:17 Unicesumar - Ensino a Distância about:blank 3/7 I, apenas. II, apenas. I e III, apenas. II e III, apenas. I, II e III. 6ª QUESTÃO A separação eletroforética de proteínas é mais comumente realizada em géis de poliacrilamida. Quando uma mistura de proteínas é colocada em gel e uma corrente elétrica é aplicada, proteínas migram pelo gel. LODISH, Harvey. Biologia celular e molecular. 2014 . Considerando a técnica de eletroforese de proteínas, assinale a opção correta: ALTERNATIVAS Podem ser analisadas diretamente, independente de suas cargas. Pode ser utilizada para analisar a carga de uma molécula proteica. Os géis de análise podem ser de agarose e poliacrilamida desnaturante. A eletroforese não é capaz de separar misturas complexas de proteínas. As proteínas maiores migram primeiro, devido à maior atração ao polo eletroforético. 7ª QUESTÃO A reação em cadeia da polimerase (PCR) é um método que simula a replicação do DNA para aumentar o material genético disponível para análise de forma específica. A PCR aumenta a quantidade de cópias da sequência alvo do DNA. DOLINSKY, L. C. de. Engenharia Genética. Florianópolis–SC: Arqué, 2023. Sobre a PCR, avalie as afirmações a seguir. I. Para a amplificação do DNA, é necessário fornecer o DNA isolado, a enzima Tac Polimerase e os nucleotídeos livres, além dos iniciadores, em uma solução tampão. II. A amplificação do material genético se dá por ciclos de desnaturação, anelamento e extensão. III. O processo de extensão acontece em temperaturas aproximadas de 72 °C, pois a Tac Polimerase é isolada de microrganismos que suportam altas temperaturas. É correto o que se afirma em: ALTERNATIVAS 05/07/2024,01:17 Unicesumar - Ensino a Distância about:blank 4/7 I, apenas. II, apenas. I e III, apenas. II e III, apenas. I, II e III. 8ª QUESTÃO A agência regulatória do Reino Unido se tornou a primeira no mundo a aprovar uma terapia genética que promete curar duas doenças que afetam as células sanguíneas. O novo tratamento contra a doença falciforme e a beta talassemia é pioneira no uso de uma ferramenta de edição genética conhecida como Crispr. As responsáveis pela técnica — as cientistas Emmanuelle Charpentier e Jennifer Doudna — ganharam o Prêmio Nobel em 2020. Este avanço é considerado revolucionário para as duas doenças hereditárias que acometem o sangue, ambas desencadeadas por erros no gene da hemoglobina (proteína responsável pelo transporte de oxigênio nas hemácias). Anemia falciforme: terapia genética é esperança contra doença “invisível” que afeta dezenas de milhares de brasileiros. Disponível em: <https://www.bbc.com/portuguese/articles/c3g25e0w4z6o>. Acesso em: 15 abr. de 2024. Considerando o texto apresentado e com os conhecimentos sobre a Clonagem Gênica, avalie as afirmações a seguir. I. A técnica Crispr-CAS9 é inovadora, pois permite a inserção precisa da terapia gênica modificadora no material genético. II. Um fragmento de RNA guia se alinha numa sequência alvo exata, pois foi projetado em complementaridade a partir da fita de DNA. III. Guiado pelo RNA complementar, a enzima CAS-9 age cortando a fita dupla de DNA, que sofrerá ação dos mecanismos de reparo celular. IV. O mecanismo de reparação HDR faz a reparação do DNA cortado por meio da inserção de nucleotídeos baseados em um DNA molde inserido. É correto o que se afirma em: ALTERNATIVAS I, apenas. II, apenas. I e IV, apenas. II e III, apenas. I, II e III. 9ª QUESTÃO 05/07/2024, 01:17 Unicesumar - Ensino a Distância about:blank 5/7 Na produção da vacina Qdenga, a diretora médica da Takeda explica: “Os cientistas desenvolvedores utilizaram o ‘esqueleto’ do sorotipo 2 como um arcabouço genético, ou seja, incluíram proteínas estruturais dos demais sorotipos no corpo do vírus tipo 2 atenuado para que a vacina seja eficaz contra todos eles”, explica Lee. O nome da tecnologia é DNA recombinante, em que genes dos sorotipos 1, 3 e 4 são usados para modificar o tipo 2 geneticamente. Dessa forma, o imunizante estimula o sistema imune humano a produzir anticorpos específicos para cada um dos tipos de vírus da dengue. Como funciona a Qdenga, vacina contra a dengue aprovada no Brasil? Disponível em: <https://www.nationalgeographicbrasil.com/ciencia/2023/06/como-funciona-a-qdenga-vacina-contra-a- dengue-aprovada-no-brasil>. Acesso em: 10 abril de 2024. Com base no texto apresentado sobre a tecnologia DNA recombinante, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas. I. DNA recombinante é o nome dado para a tecnologia aplicada na manipulação de sequências de DNA que permitem a modificação de genes de interesse, para formar novas sequências de DNA combinadas e de fontes diversas. PORQUE II. Todos os organismos vivos compartilham a mesma sequência de informações genéticas. A respeito dessas asserções, assinale a opção correta: ALTERNATIVAS As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa correta da I. As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa correta da I. A asserção I é uma proposição verdadeira, e a II é uma proposição falsa. A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira. As asserções I e II são proposições falsas. 10ª QUESTÃO 05/07/2024, 01:17 Unicesumar - Ensino a Distância about:blank 6/7 O publicitário Paulo Peregrino tinha um linfoma não Hodgkin – câncer que ataca os glóbulos brancos do sangue, também chamados de linfócitos – e estava prestes a ser encaminhado para cuidados paliativos, pois já havia se submetido a 45 quimioterapias nos últimos anos, sem que houvesse melhora do quadro. Ele foi, então, selecionado para um tratamento desenvolvido pelo Hemocentro de Ribeirão Preto e pelo CTC-USP (Centro de Terapia Celular da Universidade de São Paulo), em parceria com o Instituto Butantan. O método, chamado de CAR-T, envolve o redirecionamento da atividade natural de uma célula de defesa, chamada de célula T, utilizando a expressão do receptor de antígeno quimérico (CAR, na sigla em inglês). Terapia que eliminou câncer de homem em 30 dias reprograma as células de defesa do corpo; entenda. Disponível em: <https://noticias.r7.com/saude/terapia-que-eliminou-cancer-de-homem-em-30-dias- reprograma-as-celulas-de-defesa-do-corpo-entenda-01062023/>. Acesso em: 11 abr. 2024. Com base nos conhecimentos adquiridos no livro sobre terapia CAT-T, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas. I. Na terapia com células CAR-T, após a infusão nos pacientes dos vetores retrovírus modificados com a proteína T, quando em contato com células cancerígenas, reconhecidas pela expressão da proteína alvo, se ligam a essa proteína. PORQUE II. O contato ativa as células tipos T projetados com a adição do receptor CAR, inseridos pelo vetor, levando à destruição das células cancerígenas pelo sistema imunológico. A respeito dessas asserções, assinale a opção correta: ALTERNATIVAS As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa correta da I. As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa correta da I. A asserção I é uma proposição verdadeira, e a II é uma proposição falsa. A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira. As asserções I e II são proposições falsas. 05/07/2024, 01:17 Unicesumar - Ensino a Distância about:blank 7/7