Aula 1 de histologia

Prévia do material em texto

<p>UF GD UNIVERSIDADE FEDERAL DA GRANDE DOURADOS HISTOLOGIA (Histologia e seus métodos de estudo) Prof.Dr. Roosevelt Souza Histologia Básica Texto e Atlas 12a edição GUANABARA KOOGAN TRATADO DE OITAVA EDIÇÃO HISTOLOGIA ROSS Leslie P. Gartner HISTOLOGIA TEXTO E ATLAS WOJCIECH PAWLINA TRADUÇÃO DA EDIÇÃO</p><p>Histologia e seus métodos de estudo que é histologia? Grego (hystos = tecido + logos = estudo) É o estudo dos tecidos biológicos de animais e plantas, sua formação, estrutura e função. Existem 4 tecidos fundamentais: epitélio estratificado tecido ósseo tecido conjuntivo Tecido Epitelial tecido nervoso Tecido Conjuntivo tecido tecido Tecido Muscular germinativo (testículo) sanguíneo Tecido Nervoso músculo estriado musculo cardíaco músculo liso epitélio prismático</p><p>Histologia e seus métodos de estudo Do que são constituído os tecidos? Células Matriz extracelular: substâncias complexas como proteínas, fibrilas de colágeno e membranas basais. As células produzem a matriz extracelular e é influenciada por ela. São entidades que trabalham juntas, sendo simultaneamente estimuladas ou inibidas. Histologia e seus métodos de estudo Cada um dos tecidos fundamentais é constituído por vários tipos de células e interações com a matriz extracelular. Os órgãos são formados por diversos tipos de tecidos (exceto o SNC). Essa combinação dispõe o funcionamento do organismo e do corpo como um todo. É necessário o conhecimento da química, fisiologia, imunologia e patologia.</p><p>Histologia e seus métodos de estudo Preparação de Tecidos para Exame Microscópico: Cortes histológicos Visualizados ao microscópio de luz, ou óptico ou fotônico. A imagem é visualizada quando um feixe de luz atravessa o corte histológico juntamente com a lâmina. Cortes delgados que permitam a passagem de luz. MICRÓTOMOS Artefatos Histologia e seus métodos de estudo Preparação de Tecidos para Exame Microscópico: FIXAÇÃO DESIDRATAÇÃO CLAREAMENTO INCLUSÃO OU EMBEBIÇÃO CONGELAMENTO: MÉTODO FÍSICO COLORAÇÃO</p><p>Preparação de Tecidos para Exame Microscópico: FIXAÇÃO: FORMOL AL 37% Método aplicado para impedir a autólise celular. 3 1 Mergulhados em soluções químicas: Fixadores Desnaturadores ou formação de pontes entre moléculas tecido deve ser cortado em fragmentos menores. Infusão intravascular de fixadores. Folmoldeído (formol) Glutaraldeído (fixador para microscopia eletrônica) Agem no grupo amina (NH2) das proteínas. Histologia e seus métodos de estudo Desidratação e Clareamento Desidratação: passagem em soluções crescente de etanol (70% a 100%). Clareamanto ou Diafanização: Inclusão em meio orgânico intermediário, miscível em etanol e parafina (Xilol) Após os Xilol: o tecido fica transparente ou translúcido. SLEE mtp</p><p>Preparação de Tecidos para Exame Microscópico: INCLUSÃO OU EMBEBIÇÃO: Serve para fornecer consistência rígida ao tecido fixado. Parafina ou resinas de plástico (eletrônica). Finalmente INCLUSOS ou EMBEBIDOS em parafina (58°C a 60°C). Blocos de parafina levados ao MICRÓTOMO (1-10 micrômeros- um) 3-5 um (Plural: Micra) 1mm KD3368 5 CIENCOR Histologia e seus métodos de estudo Preparação de Tecidos para Exame Microscópico: Congelamento: método físico Comum em práticas hospitalares (biópsias cirúrgicas) Menor tempo de processamento Histoquímica (ausência de substâncias químicas) Criostato = micrótomo Estudos de lipídios</p><p>Histologia e seus métodos de estudo Preparação de Tecidos para Exame Microscópico: COLORAÇÃO: Os tecidos após a desidratação e clareamento são translúcidos à microscopia óptica. Corantes: ácidos ou básicos Formam pontes salinas entre os componentes ionizados dos tecidos. Componentes que se coram com corantes ácidos: acidófilos Componentes que se coram com corantes básicos: basófilos Preparação de Tecidos para Exame Microscópico: COLORAÇÃO: Hematoxilina: é um corante de comportamento básico - cora componentes basófilos ácidos nucléicos, glicosaminoglicanas e glicoproteínas ácidas. (Azul de Teluidina e Azul de Metileno). Eosina: é um corante ácido - cora componentes acidófilos mitocôndrias, grânulos de secreção, proteínas citoplasmáticas e colágeno. (Orange G, fucsina ácida). Obs.: Hidratação antes de corar e depois nova desidratação 0198-7 - PR</p><p>Histologia e seus métodos de estudo Lente ocular Microscopia de Luz Prisma Lente objetiva Espécime Platina Condensador Filtro de luz Controles de movimento da platina Controles de ajuste de foco Espelho Fig. 1.2 Desenho esquemático de um de luz mostran- do seus componentes principais e o trajeto da luz desde a fonte luminosa até o olho do observador. (Cortesia de Carl Zeiss Co.) 300 nm 225 nm 90 nm Hemácia 24 nm 10.000 nm 150 nm E. Coli (bactéria) nm = nanômetro</p><p>Histologia e seus métodos de estudo Problemas na interpretação dos cortes: Distorções e Artefatos Retrações: calor da parafina Espaços artificiais: perda de moléculas - lipídios e glicogênio Precipitações do corante Sujeira - confundir com grânulos citoplasmáticos. Os defeitos de processamento são chamados de Artefatos. Na microscopia de luz não é possível diferenciar as organelas nem os componentes da matriz celular. Influência da altura do corte nas dimensões no órgão, ter consciência que o corte é aleatório e que existe mais estruturas para frente e para trás do corte. Histologia e seus métodos de estudo Corte transversal Corte longitudinal Corte oblicuo Diagrama que muestra los diferentes aspectos de cortes a través de un tubo curvo en diferentes niveles Fig. 1-2. La histología exige la reconstrucción mental de imágenes bidimensionales en una sólida tridimensional a partir de la cual se cortaron. En este diagrama se un tubo curvo en varios planos para ilustrar la relación entre una serie de cortes bidimensionales y la estructura tridimensional. Copyright 2002 by W.B. Saunders All rights reserved.</p><p>FORMOL 10%</p><p>HYRAX ZEISS M 25 M25</p><p>80% 95% ÁLCOOL 100% HEMATOXILINA EOSINA ÁLCOOL 70%</p><p>Resumo HYRAX FORMOL 10% Micrótomo 24 horas Desidratação e Clareamento Hidratação Desidratação euromex PB.5265 Lamínula ENTELLAN 25ML 70%</p>