CUIDADOS COM HPLC

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<p>Telefone: (11) 3864-1411 - Fax: (11) 3872-9749 - E-mail: servico@sinc.com.br</p><p>CUIDADOS COM O SISTEMA DE HPLC</p><p>Contaminação na tubulação do sistema HPLC pode ocasionar desvio e</p><p>instabilidade na linha de base de um cromatograma.</p><p>Através da limpeza dos tubos do sistema antes ou após o seu uso ou ao</p><p>término das operações diárias o equipamento terá um melhor rendimento.</p><p>Após longo período de uso, o filtro de entrada de solventes pode entupir</p><p>devido a contaminações vindas do próprio solvente utilizado. Isto pode causar</p><p>bolhas e/ou problemas na vazão do solvente.</p><p>Essa mesma contaminação pode adentrar os cabeçotes da bomba, as</p><p>“check valves”, injetores, filtros e ir gradualmente contaminando a coluna,</p><p>causando instabilidade/desvio na linha de base.</p><p>Para Limpeza de Contaminação:</p><p>Para contaminações fracas, passe isopropanol ou metanol no sistema</p><p>(1mL/min por, no mínimo, meia hora).</p><p>Caso a contaminação persista, passe solução de 10% (no máximo) de</p><p>ácido nítrico (1mL/min por, no mínimo, meia hora).</p><p>ATENÇÃO:</p><p>1)Tire a coluna antes de iniciar o procedimento de</p><p>limpeza;</p><p>2)Retire todo o solvente orgânico da tubulação com</p><p>água antes de passar o ácido. Inclusive substitua o frasco de</p><p>descarte por um limpo. As mistura de álcool com ácido pode</p><p>explodir;</p><p>3)Após a limpeza com ácido limpe novamente a</p><p>tubulação com água.</p><p>4)Não descarte o álcool e o ácido no mesmo local.</p><p>Telefone: (11) 3864-1411 - Fax: (11) 3872-9749 - E-mail: servico@sinc.com.br</p><p>Para Limpeza de Solventes Tamponados</p><p>Quando utilizar solventes que formem cristais ao secar, cuide para que o</p><p>mesmo não permaneça parado no sistema por muito tempo. Caso isso</p><p>aconteça, o sistema poderá entupir e/ou danificar os pistões da bomba.</p><p>Se o sistema não for ser utilizado com tampão por um bom tempo, limpe</p><p>a linha com água e depois o deixe com metanol ou isopropanol.</p><p>Sempre quando substituindo os solventes de tamponados para</p><p>orgânicos, ou vice-versa, faça a seguinte seqüência:</p><p>Solução tampão  Água ultrapura  Isopropanol  Solvente</p><p>orgânico</p><p>Para Limpeza de Solventes com Íons Halogênios</p><p>Solventes tamponados com íons halogênios (tais como KCl, NaCl, NH4Cl)</p><p>ou solventes que possam produzir tais íons através de reações, estes devem</p><p>ser retirados totalmente e imediatamente do sistema após uso. Isto porque</p><p>eles podem corroer a tubulação.</p><p>Utilize água ultrapura para limpeza.</p><p>Para Troca de Solventes</p><p>Quando for trocar de solventes leve em conta os seguintes pontos:</p><p>1) Coloque uma conexão-união no lugar da coluna.</p><p>2) Verifique a miscibilidade entre os solventes envolvidos. Sempre troque</p><p>os solventes na ordem de miscibilidade.</p><p>3) Retire o filtro de entrada do solvente a ser trocado, enxágüe-o com o</p><p>novo solvente a ser utilizado. Purgue um pouco a linha.</p><p>4) Coloque o filtro de entrada no novo solvente e deixe passar um pouco</p><p>dele pela tubulação para retira o solvente anterior.</p><p>5) Repita os passos 2, 3 e 4 até que tenha colocado o solvente a ser</p><p>utilizado para análise</p><p>Telefone: (11) 3864-1411 - Fax: (11) 3872-9749 - E-mail: servico@sinc.com.br</p><p>6) No caso de detectores muito sensíveis a variação da fase móvel</p><p>(Índice de Refração, Eletroquímico, Condutividade etc.) execute a seqüência</p><p>com atenção para que os mesmos não demorem mais para estabilizar.</p><p>7) Antes de conectar a coluna, verifique que o solvente que está nela</p><p>seja miscível com o solvente que está na tubulação.</p><p>8) Caso os solventes envolvidos sejam tamponados, passe água</p><p>ultrapura para limpar a tubulação antes de entrar com o novo solvente.</p><p>Tenha sempre o cuidado de não passar solvente orgânico em uma tubulação</p><p>com solvente tamponado ou vice-versa, pois resíduos e cristais de difícil</p><p>limpeza poderão se formar.</p><p>ATENÇÃO:</p><p>Algumas colunas requerem procedimentos especiais</p><p>para substituição de seu solvente de armazenagem pelo de</p><p>trabalho. LEIA SEMPRE O MANUAL DA COLUNA!</p><p>Outra dica importante para preservação da coluna</p><p>refere-se ao choque de pressão. Sempre ao iniciar o</p><p>bombeamento do fluxo no sistema, suba vagarosamente o</p><p>fluxo (de 0,2 em 0,2 ml/min, sempre aguardando estabilizar</p><p>a pressão para subir mais um pouco), até atingir o fluxo do</p><p>método.</p><p>Para Solução de lavagem da agulha</p><p>O ideal para esta solução é que seja o mesmo solvente da diluição da</p><p>amostra. Para amostras muito viscosas, deve-se enxaguar bem a agulha.</p><p>Cuidados com a Fase móvel</p><p>Utilizar somente solventes graus HPLC;</p><p>Filtrar a fase com filtro de 0.45 micra para remover quaisquer partículas;</p><p>Sempre sonique a fase móvel preparada antes de utilizá-la, para ajudar na</p><p>exclusão das microbolhas e ar dissolvido;</p><p>Telefone: (11) 3864-1411 - Fax: (11) 3872-9749 - E-mail: servico@sinc.com.br</p><p>Quais Solventes não devo passar no sistema?</p><p>Se houver peças (tubulações, conexões, válvulas) no sistema que sejam</p><p>de PEEK (um material plástico, cor marrom claro, maleável), NÃO devemos</p><p>utilizar: Ácido Sulfúrico concentrado, Ácido Nítrico concentrado, Ácido</p><p>Dicloroacético, Acetona, Tetrahidrofurano (THF), Diclorometano, Clorofórmio e</p><p>Dimetil sulfóxido (DMSO).</p><p>Se no seu sistema tiver desgaseificador, verificar no manual deste a lista</p><p>de solventes que danificam a câmara de desgaseificação, evitando a utilização</p><p>destes.</p><p>Quando o Sistema For Ficar Parado por Longo</p><p>Tempo</p><p>Neste caso, execute a limpeza do sistema, passando por último Metanol.</p><p>Ponha papel alumínio nas conexões abertas e nos filtros de entrada.</p>