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<p>Prof. MSc. Paulo Pineda</p><p>MATERIAL COMPLEMENTAR</p><p>Biologia (Citologia/</p><p>Histologia/Genética)</p><p>Enunciado:</p><p> “Os anticorpos monoclonais representam uma classe farmacêutica de rápido crescimento e</p><p>são importantes para terapias de precisão. Caracterizam-se por alta especificidade e</p><p>afinidade para um antígeno, principalmente aqueles presentes nas membranas celulares.</p><p>Por sua vez, canais iônicos são uma grande família de proteínas transmembrana que</p><p>controlam o transporte de íons. Eles são envolvidos em processos fisiopatológicos e são</p><p>considerados alvos-terapêuticos promissores. No entanto, ainda não foram desenvolvidos</p><p>para uso clínico anticorpos monoclonais direcionados para canais iônicos”</p><p>(HAUSTRATE et al. 2019).</p><p>Questão 1 − Enade, 2019</p><p>Pergunta:</p><p>Considerando as informações apresentadas, avalie as afirmações a seguir:</p><p>I. A produção de anticorpos monoclonais ocorre por técnicas da engenharia genética</p><p>in vivo e pela clonagem de genes codificadores de anticorpos em bactérias.</p><p>II. Pacientes com polimorfismo dos genes da síntese de canais de membrana apresentarão</p><p>resposta clínica diferenciada para tratamento com anticorpos monoclonais.</p><p>III. Os anticorpos monoclonais fazem parte de uma classe heterogênea de produtos</p><p>medicamentosos denominada biofármacos.</p><p>Questão 1 − Enade, 2019</p><p>Questão multidisciplinar que avalia a competência do aluno em lidar com diversos conceitos:</p><p> DNA e RNA: engenharia genética, DNA recombinante, expressão gênica.</p><p> Proteínas: anticorpos, anticorpos monoclonais; biofármacos.</p><p> Membrana celular: canais iônicos.</p><p> Terapia de precisão.</p><p>Questão 1 − Enade, 2019</p><p> Expressão gênica: manifestação da informação genética.</p><p>Recuperando conceitos de Biologia</p><p>Fonte: Pineda, 2019, p.103.</p><p> DNA recombinante: DNA produzido em laboratório por técnicas de engenharia genética.</p><p>Fonte: Alberts, 2017, p.468.</p><p>Recuperando conceitos de Biologia</p><p> Anticorpos: proteínas que combatem antígenos.</p><p> Anticorpos monoclonais: reconhecem um único tipo de epítopo num antígeno.</p><p> Biofármacos: fármacos produzidos através de biotecnologia.</p><p>Recuperando conceitos de Biologia</p><p>Fonte: Pineda, 2020 (acervo pessoal).</p><p>Antígeno</p><p> Canais iônicos: proteínas transmembrana</p><p>que agem como canais de íons.</p><p>Recuperando conceitos de Biologia</p><p>Fonte: Alberts, 2017, p.600.</p><p> Polimorfismo genético: variações na sequência de DNA com frequência maior do que</p><p>1% na população (RICHARDS et al. 2015).</p><p> Terapia de precisão: abordagem terapêutica customizada (individualizada, personalizada).</p><p>Recuperando conceitos de Biologia</p><p>Pergunta:</p><p>Considerando as informações apresentadas, avalie as afirmações a seguir:</p><p>I. A produção de anticorpos monoclonais ocorre por técnicas da engenharia genética in vivo</p><p>e pela clonagem de genes codificadores de anticorpos em bactérias.</p><p>II. Pacientes com polimorfismo dos genes da síntese de canais de membrana apresentarão</p><p>resposta clínica diferenciada para tratamento com anticorpos monoclonais.</p><p>III. Os anticorpos monoclonais fazem parte de uma classe heterogênea de produtos</p><p>medicamentosos denominada biofármacos.</p><p>É correto o que se afirma em:</p><p>a) I, apenas.</p><p>b) III, apenas.</p><p>c) I e II, apenas.</p><p>d) II e III, apenas.</p><p>e) I, II e III.</p><p>Questão 1 (Enade, 2019)</p><p>Pergunta:</p><p>Considerando as informações apresentadas, avalie as afirmações a seguir:</p><p>I. A produção de anticorpos monoclonais ocorre por técnicas da engenharia genética in vivo</p><p>e pela clonagem de genes codificadores de anticorpos em bactérias.</p><p>II. Pacientes com polimorfismo dos genes da síntese de canais de membrana apresentarão</p><p>resposta clínica diferenciada para tratamento com anticorpos monoclonais.</p><p>III. Os anticorpos monoclonais fazem parte de uma classe heterogênea de produtos</p><p>medicamentosos denominada biofármacos.</p><p>É correto o que se afirma em:</p><p>a) I, apenas.</p><p>b) III, apenas.</p><p>c) I e II, apenas.</p><p>d) II e III, apenas.</p><p>e) I, II e III.</p><p>Questão 1 (Enade, 2019)</p><p>Enunciado:</p><p> “A Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (qPCR) pode ser utilizada em</p><p>diagnóstico molecular de doenças genéticas, detecção de patógenos, identificação humana e</p><p>de espécies virais ou bacterianas, níveis de expressão gênica, resistência a antimicrobianos,</p><p>entre outras aplicações”.</p><p>Questão 2 − Enade, 2019</p><p>Enunciado:</p><p> O gráfico a seguir representa em A os ciclos de amplificação do qPCR (escala log) do gene</p><p>ACTB (B-actina, constituinte do esqueleto celular) e em B, os do gene COL1A1 (colágeno1,</p><p>associado a osteogênese imperfeita). O Ct (ciclo threshold) de ACTB é 18 e o de COL1A1</p><p>é 22.</p><p>Questão 2 − Enade, 2019</p><p>Fonte: Thermo Fisher, 2019.</p><p>Pergunta:</p><p> Considerando as informações apresentadas, avalie as afirmações a seguir.</p><p>I. O valor do Ct de COL1A1 indica que a expressão desse gene é 16 vezes maior do que a</p><p>do gene ACTB.</p><p>II. A linha do threshold indica o limiar de falsos positivos quando as amostras de DNA estão</p><p>contaminadas.</p><p>III. A inclinação horizontal no fim da curva de amplificação indica que a reação chegou na fase</p><p>de estabilização da amplificação ou na fase platô.</p><p>É correto o que se afirma em:</p><p>a) I, apenas.</p><p>b) III, apenas.</p><p>c) I e II, apenas.</p><p>d) II e III, apenas.</p><p>e) I, II e III.</p><p>Questão 2 − Enade, 2019</p><p>Questão multidisciplinar que avalia a competência do aluno em lidar com diversos conceitos:</p><p> A técnica de PCR: amplificação de DNA, crescimento exponencial; escala logarítmica</p><p>e interpretação de gráfico.</p><p>Questão 2 − Enade, 2019</p><p> Replicação de DNA: produção de novas moléculas de DNA a partir de moléculas</p><p>pré-existentes.</p><p>Recuperando conceitos de Biologia</p><p>Fonte: Pineda, 2019, p.103.</p><p> Replicação de DNA: produção de novas moléculas de DNA.</p><p> Processo dependente de um molde de DNA pré-existente.</p><p> Processo semiconservativo.</p><p> Molécula “filha” é uma cópia da molécula “mãe”.</p><p> Realizado pela enzima DNA polimerase.</p><p> Processo intracelular.</p><p>Recuperando conceitos de Biologia</p><p>Fonte: Pineda, 2019, p.94.</p><p> Processo de amplificação do DNA (síntese de muitas cópias de DNA), desenvolvido por Kary</p><p>Mullis em 1983.</p><p> Ocorrem vários ciclos de amplificação.</p><p> Processo realizado em laboratório.</p><p> Existem diversos tipos de técnicas de PCR, com diversas aplicações diferentes: PCR</p><p>qualitativo (convencional) e quantitativo (qPCR): PCR digital, PCR em tempo real etc.</p><p>PCR: Reação em Cadeia da Polimerase</p><p>Placa TLDA (ThermoFisher Scientific): uma única placa</p><p>contendo um arranjo de 384 reações de PCR em tempo</p><p>real, com uso da metodologia Taqman.</p><p>Fonte: Pineda, 2020 (acervo pessoal).</p><p>PCR: Reação em Cadeia da Polimerase</p><p>Fonte: Alberts, 2017, p.473.</p><p>PCR: Reação em Cadeia da Polimerase</p><p>Fonte: Alberts, 2017, p.474.</p><p>Pergunta:</p><p> Considerando as informações apresentadas, avalie as afirmações a seguir.</p><p>I. O valor do Ct de COL1A1 indica que a expressão desse gene é 16 vezes maior do que a</p><p>do gene ACTB.</p><p>II. A linha do threshold indica o limiar de falsos positivos quando as amostras de DNA</p><p>estão contaminadas.</p><p>III. A inclinação horizontal no fim da curva de amplificação indica que a reação chegou na fase</p><p>de estabilização da amplificação ou na fase platô.</p><p>É correto o que se afirma em:</p><p>a) I, apenas.</p><p>b) III, apenas.</p><p>c) I e II, apenas.</p><p>d) II e III, apenas.</p><p>e) I, II e III.</p><p>Questão 2 − Enade, 2019</p><p>Fonte: ThermoFisher, 2019.</p><p>Pergunta:</p><p> Considerando as informações apresentadas, avalie as afirmações a seguir.</p><p>I. O valor do Ct de COL1A1 indica que a expressão desse gene é 16 vezes maior do que a</p><p>do gene ACTB.</p><p>II. A linha do threshold indica o limiar de falsos positivos quando as amostras de DNA</p><p>estão contaminadas.</p><p>III. A inclinação horizontal no fim da curva de amplificação indica que a reação chegou na fase</p><p>de estabilização da amplificação ou na fase platô.</p><p>É correto o que se afirma em:</p><p>a) I, apenas.</p><p>b) III, apenas.</p><p>c) I e II, apenas.</p><p>d) II e III, apenas.</p><p>e) I, II e III.</p><p>Questão 2 − Enade, 2019</p><p>Fonte: ThermoFisher, 2019.</p><p> ALBERTS, Bruce et al. Biologia molecular da célula. Porto Alegre:</p><p>Artmed, 2017. ISBN 978-</p><p>85-8271-423-2.</p><p> HAUSTRATE, A. et al. Monoclonal antibodies targeting ion channels and their therapeutic</p><p>potential. Frontiers in pharmacology, 10:606, 2019.</p><p> PINEDA, Paulo Henrique Baldan. Biologia: citologia, histologia e genética. São Paulo: Editora</p><p>Sol, 2019. Disponível em: Cadernos de Estudos e Pesquisas da UNIP, Série Didática, ano</p><p>XXV, n. 2-107/19, ISSN 1517-9230.</p><p> RICHARDS Sue et al. Standards and guidelines for the</p><p>interpretation of sequence variants: a joint consensus</p><p>recommendation of the American College of Medical</p><p>Genetics and Genomics and the Association for Molecular</p><p>Pathology. Genet Med. 2015;17(5):405-424.</p><p> ThermoFisher:.</p><p>Acesso em: 29 jul. 2019 (adaptado).</p><p>Referências</p><p>INTERVALO</p><p>Enunciado:</p><p> “A imagem a seguir ilustra os resultados da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR)</p><p>seguida de eletroforese em gel de agarose para o diagnóstico de Staphylococcus aureus</p><p>resistente à meticilina (MRSA) por meio da detecção do gene mecA”.</p><p>Questão 3 − Enade, 2019</p><p>M: marcador de peso molecular; 1 a 4: estafilococos coagulase-negativos, positivos para o gene</p><p>mecA; 5: estafilococos coagulase-negativo, negativo para o gene mecA; 6: Staphylococcus aureus,</p><p>negativo para o gene mecA; 7 e 8: Staphylococcus aureus, positivos para o gene mecA; C: controle</p><p>negativo; pb: pares de bases.</p><p>Fonte: Maes et al. (2012).</p><p>Pergunta:</p><p> Considerando as informações apresentadas, avalie as afirmações a seguir.</p><p>I. A ausência das bandas correspondentes ao gene mecA nas amostras 5 e 6 determina</p><p>a ausência de resistência à meticilina nessas amostras.</p><p>II. A utilização dessa metodologia permite a detecção da concentração inibitória mínima</p><p>da meticilina contra a bactéria em estudo.</p><p>III. Nessa metodologia, a presença de material genético de bactérias de espécies diferentes</p><p>de Staphylococcus não influencia o resultado final, sendo essa uma das vantagens</p><p>do seu uso.</p><p>É correto apenas o que se afirma em:</p><p>a) I.</p><p>b) II.</p><p>c) I e II.</p><p>d) I e III.</p><p>e) II e III.</p><p>Questão 3 − Enade, 2019</p><p>Questão multidisciplinar que avalia a competência do aluno em lidar com diversos conceitos:</p><p> A técnica de PCR.</p><p> O processo de expressão gênica.</p><p> A técnica de eletroforese em gel de agarose.</p><p>Questão 3 − Enade, 2019</p><p> Eletroforese: técnica analítica de separação de moléculas submetidas a um campo elétrico.</p><p> Tipos de eletroforese: em gel de agarose, em gel de acrilamida, por focalização isoelétrica,</p><p>capilar etc.</p><p> Eletroforese em gel de agarose: o DNA, misturado com corante fluorescente, migra para o</p><p>polo positivo.</p><p>Conceitos</p><p>A B C</p><p>Eletroforese em gel de agarose. A: gel customizado; B e C: gel</p><p>pré-fabricado no início e no final da eletroforese, respectivamente.</p><p>Fonte: Pineda, 2020 (acervo pessoal).</p><p>Enunciado:</p><p> “A imagem a seguir ilustra os resultados da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR)</p><p>seguida de eletroforese em gel de agarose para o diagnóstico de Staphylococcus aureus</p><p>resistente à meticilina (MRSA) por meio da detecção do gene mecA”.</p><p>Questão 3 − Enade, 2019</p><p>M: marcador de peso molecular; 1 a 4: estafilococos coagulase-negativos, positivos para o gene</p><p>mecA; 5: estafilococos coagulase-negativo, negativo para o gene mecA; 6: Staphylococcus aureus,</p><p>negativo para o gene mecA; 7 e 8: Staphylococcus aureus, positivos para o gene mecA; C: controle</p><p>negativo; pb: pares de bases.</p><p>Fonte: Maes et al. (2012).</p><p>Pergunta:</p><p> Considerando as informações apresentadas, avalie as afirmações a seguir.</p><p>I. A ausência das bandas correspondentes ao gene mecA nas amostras 5 e 6 determina a</p><p>ausência de resistência à meticilina nessas amostras.</p><p>Questão 3 − Enade, 2019</p><p>M: marcador de peso molecular; 1 a 4: estafilococos coagulase-negativos, positivos para o gene</p><p>mecA; 5: estafilococos coagulase-negativo, negativo para o gene mecA; 6: Staphylococcus aureus,</p><p>negativo para o gene mecA; 7 e 8: Staphylococcus aureus, positivos para o gene mecA; C: controle</p><p>negativo; pb: pares de bases.</p><p>Fonte: Maes et al. (2012).</p><p>Pergunta:</p><p> Considerando as informações apresentadas, avalie as afirmações a seguir.</p><p>II. A utilização dessa metodologia permite a detecção da concentração inibitória mínima da</p><p>meticilina contra a bactéria em estudo.</p><p>Questão 3 − Enade, 2019</p><p>M: marcador de peso molecular; 1 a 4: estafilococos coagulase-negativos, positivos para o gene</p><p>mecA; 5: estafilococos coagulase-negativo, negativo para o gene mecA; 6: Staphylococcus aureus,</p><p>negativo para o gene mecA; 7 e 8: Staphylococcus aureus, positivos para o gene mecA; C: controle</p><p>negativo; pb: pares de bases.</p><p>Fonte: Maes et al. (2012).</p><p>Pergunta:</p><p> Considerando as informações apresentadas, avalie as afirmações a seguir.</p><p>III. Nessa metodologia, a presença de material genético de bactérias de espécies diferentes</p><p>de Staphylococcus não influencia o resultado final, sendo essa uma das vantagens</p><p>do seu uso.</p><p>Questão 3 − Enade, 2019</p><p>M: marcador de peso molecular; 1 a 4: estafilococos coagulase-negativos, positivos para o gene</p><p>mecA; 5: estafilococos coagulase-negativo, negativo para o gene mecA; 6: Staphylococcus aureus,</p><p>negativo para o gene mecA; 7 e 8: Staphylococcus aureus, positivos para o gene mecA; C: controle</p><p>negativo; pb: pares de bases.</p><p>Fonte: Maes et al. (2012).</p><p>Pergunta:</p><p> Considerando as informações apresentadas, avalie as afirmações a seguir.</p><p>I. A ausência das bandas correspondentes ao gene mecA nas amostras 5 e 6 determina a</p><p>ausência de resistência à meticilina nessas amostras.</p><p>II. A utilização dessa metodologia permite a detecção da concentração inibitória mínima da</p><p>meticilina contra a bactéria em estudo.</p><p>III. Nessa metodologia, a presença de material genético de bactérias de espécies diferentes</p><p>de Staphylococcus não influencia o resultado final, sendo essa uma das vantagens</p><p>do seu uso.</p><p>É correto apenas o que se afirma em:</p><p>a) I.</p><p>b) II.</p><p>c) I e II.</p><p>d) I e III.</p><p>e) II e III.</p><p>Questão 3 − Enade, 2019</p><p>Pergunta:</p><p> Considerando as informações apresentadas, avalie as afirmações a seguir.</p><p>I. A ausência das bandas correspondentes ao gene mecA nas amostras 5 e 6 determina a</p><p>ausência de resistência à meticilina nessas amostras.</p><p>II. A utilização dessa metodologia permite a detecção da concentração inibitória mínima da</p><p>meticilina contra a bactéria em estudo.</p><p>III. Nessa metodologia, a presença de material genético de bactérias de espécies diferentes</p><p>de Staphylococcus não influencia o resultado final, sendo essa uma das vantagens</p><p>do seu uso.</p><p>É correto apenas o que se afirma em:</p><p>a) I.</p><p>b) II.</p><p>c) I e II.</p><p>d) I e III.</p><p>e) II e III.</p><p>Questão 3 − Enade, 2019</p><p>Enunciado:</p><p> “A adrenoleucodistrofia ligada ao cromossomo X (X-ALD) é uma doença hereditária</p><p>recessiva cujas primeiras manifestações são notadas na infância. A doença está relacionada</p><p>à mutação no gene ABCD1 (mapeado em Xq28), que gera problemas em peroxissomos. A</p><p>figura a seguir representa o heredograma referente à X-ALD de uma família. O indivíduo C7</p><p>faleceu aos 23 anos de idade, vítima dessa doença. Não há confirmação de outros óbitos por</p><p>X-ALD nessa família, nem de membros vivos manifestando sinais da doença. Indivíduos da</p><p>geração D são crianças menores de 5 anos de idade”.</p><p>Questão 4 − Enade, 2019</p><p>Pergunta:</p><p> O indivíduo C8 e sua noiva, de 29 e 27 anos de idade, respectivamente, procuraram o</p><p>Serviço de Aconselhamento Genético (SAG). Sabendo-se que a mulher não tem histórico</p><p>familiar de X-ALD, assinale a opção que indica o aconselhamento genético correto</p><p>para esse casal.</p><p>a) As filhas de sexo feminino do casal serão portadoras da</p><p>mutação em ABCD1 identificada na família paterna.</p><p>b) O casal deve optar por reprodução assistida ou adoção para</p><p>evitar o risco de terem filhos com X-ALD.</p><p>c) O planejamento familiar, nesse caso, requer pesquisa</p><p>molecular da mutação</p><p>em ABCD1 no casal.</p><p>d) Os filhos de sexo masculino do casal têm 25% de chance de</p><p>herdar mutação em ABCD1.</p><p>e) Os filhos do casal não herdarão a mutação em ABCD1</p><p>identificada na família paterna.</p><p>Questão 4 − Enade, 2019</p><p>Questão multidisciplinar que avalia a competência do aluno em lidar com diversos conceitos:</p><p> Heredograma.</p><p> Padrão de herança.</p><p> Probabilidade.</p><p>Questão 4 − Enade, 2019</p><p> Heredograma</p><p>Recuperando conceitos de Biologia</p><p>Fonte: Pineda, 2019, p.126.</p><p>Padrão clássico de herança (herança Mendeliana monogênica):</p><p> Herança recessiva;</p><p> Herança sexual ligada ao sexo (ligada ao cromossomo X);</p><p>Recuperando conceitos de Biologia</p><p>Fonte: Pineda, 2019, p.135.</p><p>Padrão clássico de herança (herança Mendeliana monogênica):</p><p> Herança recessiva;</p><p> Herança sexual ligada ao sexo (ligada ao cromossomo X);</p><p> Exemplo: Hemofilia A.</p><p>Recuperando conceitos de Biologia</p><p>Fonte: Pineda, 2019, p.136.</p><p>Enunciado:</p><p> “A adrenoleucodistrofia ligada ao cromossomo X (X-ALD) é uma doença hereditária</p><p>recessiva cujas primeiras manifestações são notadas na infância. A doença está relacionada</p><p>à mutação no gene ABCD1 (mapeado em Xq28), que gera problemas em peroxissomos. A</p><p>figura a seguir representa o heredograma referente à X-ALD de uma família. O individuo C7</p><p>faleceu aos 23 anos de idade, vítima dessa doença. Não há confirmação de outros óbitos por</p><p>X-ALD nessa família nem de membros vivos manifestando sinais da doença. Indivíduos da</p><p>geração D são crianças menores de 5 anos de idade”.</p><p>Questão 4 − Enade, 2019</p><p>Pergunta:</p><p>a) As filhas de sexo feminino do casal serão portadoras</p><p>da mutação em ABCD1 identificada na família paterna.</p><p>b) O casal deve optar por reprodução assistida ou adoção</p><p>para evitar o risco de terem filhos com X-ALD.</p><p>c) O planejamento familiar, nesse caso, requer pesquisa</p><p>molecular da mutação em ABCD1 no casal.</p><p>d) Os filhos de sexo masculino do casal têm 25%</p><p>de chance de herdar mutação em ABCD1.</p><p>e) Os filhos do casal não herdarão a mutação em ABCD1</p><p>identificada na família paterna.</p><p>Questão 4 − Enade, 2019</p><p>Pergunta:</p><p>a) As filhas de sexo feminino do casal serão portadoras</p><p>da mutação em ABCD1 identificada na família paterna.</p><p>b) O casal deve optar por reprodução assistida ou adoção</p><p>para evitar o risco de terem filhos com X-ALD.</p><p>c) O planejamento familiar, nesse caso, requer pesquisa</p><p>molecular da mutação em ABCD1 no casal.</p><p>d) Os filhos de sexo masculino do casal têm 25%</p><p>de chance de herdar mutação em ABCD1.</p><p>e) Os filhos do casal não herdarão a mutação em ABCD1</p><p>identificada na família paterna.</p><p>Questão 4 − Enade, 2019</p><p> MAES, Ni. et al. Evaluation of a triplex PCR assay to discriminate Staphylococcus aureus</p><p>from coagulase-negative staphylococci and determine methicillin resistance from blood</p><p>cultures. Journal of Clinical Microbiology, v.40, n.4, 2002.</p><p> PINEDA, Paulo Henrique Baldan. Biologia: citologia, histologia e genética. São Paulo: Editora</p><p>Sol, 2019. Disponível em: Cadernos de Estudos e Pesquisas da UNIP, Série Didática, ano</p><p>XXV, n. 2-107/19, ISSN 1517-9230.</p><p>Referências</p><p>ATÉ A PRÓXIMA!</p>