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<p>1</p><p>HEMOGRAMA</p><p>LEUCOGRAMA</p><p>1</p><p>HEMOGRAMA</p><p>, leucócitos e plaquetas</p><p>(Observações relativas à microscopia do esfregaço sanguíneo)</p><p>(relativa e absoluta)*</p><p>(índices hematimétricos)</p><p>VPM(índice plaquetário – nem todos laboratórios fazem/liberam este índice)</p><p>Avaliação</p><p>quantitativa</p><p>Avaliação</p><p>qualitativa</p><p>* Esfregaço corado.</p><p>2</p><p> Contagem global (nº de leucócitos/mm3 ou /L de sangue)</p><p> Corrigir, se necessário, quando observados eritroblastos durante</p><p>contagem diferencial</p><p> Contagem diferencial</p><p> relativa (%)</p><p> absoluta (/mm3 ou /L)</p><p> Avaliação qualitativa dos leucócitos ao microscópio</p><p> alterações citoplasmáticas</p><p> alterações nucleares</p><p> distribuição</p><p> outras</p><p>HEMOGRAMA - Leucograma</p><p>3</p><p>CONTAGEM DE LEUCÓCITOS (GLOBAL)</p><p> Câmara de Neubauer</p><p> Automatizada</p><p>HEMOGRAMA - Leucograma</p><p>4</p><p>Contagem Global de Leucócitos em câmara de</p><p>Neubauer</p><p>5</p><p>Diluente lisa as hemácias e cora o núcleo dos leucócitos e eritroblastos.</p><p>Contagem Global de Leucócitos em câmara de</p><p>Neubauer</p><p>6</p><p>2</p><p>Importante:</p><p> Considerar os valores de referência do laboratório. Por</p><p>exemplo: 4.000 – 11.000/L.</p><p> Cerca de 95% da população considerada NORMAL -</p><p>leucometria dentro dos valores de referência.</p><p> 2,5% terá valores próximos a esses limites, tanto acima quanto abaixo, e</p><p>também será normal.</p><p> Contagem leucocitária de um indivíduo � bastante constante ao</p><p>longo dos dias e anos (sob mesmas condições fisiológicas).</p><p>HEMOGRAMA - Leucograma</p><p>���� cada pessoa tem seu “número normal” de leucócitos.</p><p>7</p><p>HEMOGRAMA - Leucograma</p><p> Leucocitose: aumento do número de leucócitos no</p><p>sangue.</p><p> Leucopenia: diminuição do número de leucócitos no</p><p>sangue.</p><p> Pode haver aumento / diminuição de um ou mais tipos de leucócitos</p><p>8</p><p> Negros tem valores menores que brancos</p><p> Contagem da manhã 5-10% menor que a da tarde (cortisol)</p><p> Exercício físico aumenta a contagem</p><p> Fumo aumenta a contagem (até 1000)</p><p> Fumo + obesidade = aumenta até 2000</p><p> Álcool diminui a contagem</p><p>HEMOGRAMA - Leucograma</p><p>9</p><p>HEMOGRAMA - Leucograma</p><p> Ao nascimento, neutrófilos predominam.</p><p> A partir da segunda semana, os linfócitos predominam -</p><p>~60%.</p><p> Por volta dos 4 anos, equilíbrio entre granulócitos e</p><p>linfócitos.</p><p> A partir daí, aumento progressivo de granulócitos, com</p><p>padrão adulto aos 14-15 anos.</p><p>10</p><p>HEMOGRAMA - Leucograma</p><p>Leucócitos 1 a 3 anos 4 a 14 anos Acima de 14 anos</p><p>% absoluta(/mm3) % absoluta(/mm3) % absoluta(/mm3)</p><p>Leucócitos</p><p>Totais</p><p>---- 5.000 – 15.000 ---- 4.500 – 11.000 ---- 4.000 -11.000</p><p>Neutrófilo</p><p>Bastonete</p><p>2 – 8 100 – 600 2 – 4 100 – 400 2 – 4 100 – 400</p><p>Neutrófilo</p><p>Segmentado</p><p>20 – 40 2.000 – 6.000 35 – 55 2.000 – 6.000 36 – 66 2.000 – 7.500</p><p>Eosinófilo 4 – 10 200 – 1.500 4 – 8 300 – 1.000 2 – 4 100 – 400</p><p>Basófilo 0 – 1 0 – 100 0 – 1 0 – 100 0 – 1 0 – 100</p><p>Linfócito 40 – 60 2.000 – 8.000 30 – 55 1.500 – 6.500 25 – 45 1.500 – 4.000</p><p>Monócito 4 – 10 200 – 1.500 4 – 10 200 – 1.000 2 – 10 200 – 800</p><p>Valores mínimos e máximos das contagens absoluta e diferencial de leucócitos obtidos em São José do Rio Preto, SP.</p><p>Fonte: http://www.ciencianews.com.br/arquivos/ACET/IMAGENS/Artigos_cientificos/Interphemo.pdf 11 12</p><p>3</p><p>HEMOGRAMA - Leucograma</p><p> CONTAGEM DIFERENCIAL DOS LEUCÓCITOS</p><p> Não automatizada</p><p>Cabeça Corpo Cauda</p><p>Linfócitos</p><p>(centro)</p><p>Neutrófilos</p><p>Monócitos</p><p>(bordas)</p><p> Blastos..................... 0 %</p><p> Promielócitos............ 0 %</p><p> Mielócitos................. 0 %</p><p> Metamielócitos......... 0 %</p><p> Bastonetes............ 1 %</p><p> Segmentados........ 58 %</p><p> Eosinófilos............ 1 %</p><p> Basófilos............... 0 %</p><p> Linfócitos ............. 35 %</p><p> Linfócitos reativos..... 0 %</p><p> Monócitos............. 5 %</p><p>(TOTAL 100 %)</p><p>Exemplo: valores relativos - % de células</p><p>13</p><p>HEMOGRAMA - Leucograma</p><p> CONTAGEM DIFERENCIAL DOS LEUCÓCITOS</p><p> Automatizada</p><p> Identificação: tamanho, número de lobos nucleares,</p><p>distribuição do corante no interior da célula (marcador com</p><p>reatividade específica para determinada célula), ...</p><p> Diferentes tipos celulares</p><p> Neutrófilos, linfócitos, monócitos/eosinófilos/basófilos (kx-21n)</p><p> Neutrófilos, eosinófilos, basófilos, linfócitos, monócitos</p><p> Neutrófilos, eosinófilos, basófilos, linfócitos, monócitos, células</p><p>imaturas, linfócitos reativos, eritroblastos ...</p><p>Número de tipos celulares depende do equipamento, da tecnologia que utiliza.</p><p>14</p><p>HEMOGRAMA - Leucograma</p><p> CONTAGEM DOS LEUCÓCITOS</p><p> Automatizada</p><p>(1) No total de leucócitos /mm3</p><p>(2) Contagem diferencial de leucócitos:</p><p>- valor relativo (%) e</p><p>- valor absoluto (/mm3)</p><p>(3) Alertas (flags) : permitem detectar a presença de neutrófilos jovens (“DE”), linfócitos</p><p>reativos, eritroblastos, blastos etc. *</p><p>(4) Histogramas leucocitários</p><p>* confecção de lâminas para a confirmação microscópica.</p><p>15</p><p>HEMOGRAMA - Leucograma</p><p> Histograma leucocitário - kx-21n</p><p>16</p><p>HEMOGRAMA - Leucograma</p><p> Histograma leucocitário</p><p>17</p><p>Contar pelo menos 200 leucócitos se houver:</p><p>Leucocitose acentuada</p><p>Linfocitose no adulto</p><p>Plasmocitose, basofilia</p><p>Ausência de eosinófilos ou monócitos</p><p>...</p><p>Presença de mielócitos</p><p>HEMOGRAMA - Leucograma</p><p>18</p><p>4</p><p>CONTAGEM CORRIGIDA DE LEUCÓCITOS TOTAIS</p><p>(devido presença de eritroblastos)</p><p> Exemplo: 35.000 leucócitos/L</p><p> Contagem diferencial = 45 eritroblastos a cada 100 leucócitos</p><p>19</p><p>CONTAGEM CORRIGIDA DE LEUCÓCITOS TOTAIS</p><p>(devido presença de eritroblastos)</p><p> Orientação:</p><p> O eritroblastos devem ser contados, em separado, durante a</p><p>contagem diferencial e a sua quantidade relatada no laudo:</p><p> “Presença de X eritroblastos em 100 leucócitos contados.”</p><p> A correção da contagem global de leucócitos deve ser realizada</p><p>sempre que observar 6 ou mais eritroblastos na contagem</p><p>diferencial.</p><p>20</p><p>HEMOGRAMA - Leucograma</p><p>No baixo No normal/L (adulto) No aumentado</p><p>Leucopenia 4.000 – 10.000 Leucocitose</p><p>Neutropenia 1.700 – 8.000 Neutrofilia</p><p>Eosinopenia 20 – 500 Eosinofilia</p><p>Basopenia* 0 – 100 Basocitose/filia</p><p>Monocitopenia 80 – 800 Monocitose</p><p>Linfopenia 1.200 – 3.500 Linfocitose</p><p>*termo não utilizado devido o número normal de basófilos ser baixo: de 0 a 100/L.</p><p>As alterações numéricas dos leucócitos:</p><p>21</p><p>HEMOGRAMA - Leucograma</p><p>Causas das variações numéricas:</p><p>Causa</p><p>primária</p><p>Decorrem de anormalidades das</p><p>células precursoras na medula óssea</p><p>� o aumento de produção não é</p><p>reacional.</p><p>Causa</p><p>secundária</p><p>Decorrem de reações do organismo a</p><p>inflamações/infecções ou outras</p><p>situações similares.</p><p>22</p><p>HEMOGRAMA - Leucograma</p><p>Importante ���� na interpretação de uma</p><p>fórmula leucocitária ���� deve-se sempre</p><p>utilizar os valores absolutos*.</p><p>*A contagem relativa de leucócitos imaturos pode ser clinicamente relevante.</p><p>23</p><p> Neutrófilos</p><p> Reserva granulocítica na medula óssea:</p><p> ~14 vezes o número de neutrófilos circulantes.</p><p> Predominam neutrófilos bastonetes sobre os segmentados (3/2).</p><p> Preferência hierárquica na liberação de segmentados para o sangue</p><p>periférico (neutrófilos segmentados: 40-70% x bastonetes: 0-6%).</p><p> Desvio à esquerda (DE):</p><p> É a mobilização da reserva medula com quebra da hierarquia da liberação</p><p> formas neutrofílicas imaturas no sangue periférico</p><p> Reserva do compartimento marginal (sangue periférico) já foi esgotado (maior</p><p>consumo – por exemplo, em processo inflamatório agudo).</p><p> Aumento desproporcional dos bastonetes em relação aos segmentados.</p><p> Contagem relativa (%) de bastonetes e outros granulócitos imaturos pode</p><p>ser utilizada como parâmetro na interpretação do leucograma.</p><p>24</p><p>5</p><p>25</p><p> Neutrófilos</p><p> � demanda tecidual</p><p> Maturação 4-6 dias 48 horas (mieloblasto a segmentado)</p><p> Maior quantidade de bastonetes e de células mais jovens</p><p>(metamielócitos, mielócitos, promielócitos e mieloblastos)</p><p>Granulações</p><p>grosseiras</p><p>(tóxicas)</p><p>Vacúolos Corpúsculos</p><p>de Döhle</p><p>26</p><p> Dificuldades interpretação do leucograma:</p><p> Subcompartimentos</p><p> Marginal (leucócitos aderidos ao endotélio)</p><p> Circulante</p><p> exercícios, estresse agudo físico ou emocional, etc. leucocitose à custa de</p><p>neutrofilia e sem DE</p><p> Tempo de meia-vida dos neutrófilos</p><p> ~7 horas</p><p>“REPETIR PARA CONFIRMAÇÃO DO RESULTADO??”</p><p> Processo infeccioso agudo</p><p> Produção x consumo x evolução clínica</p><p> Valores de referência</p><p> Identificação bastonetes</p><p> Automatizado x manual</p><p> “Núcleo estreita-se a um terço do diâmetro dominante = segmentado”(?)</p><p>27</p><p>Observações sobre neutrófilos bastonetes e</p><p>neutrófilos segmentados</p><p> Existem critérios diferentes para identificar um neutrófilo</p><p>como bastonete ou como segmentado.</p><p> O que realmente é necessário é que seja definido um</p><p>critério firme para esta classificação e este critério seja</p><p>seguido e reproduzido por todos os profissionais de um</p><p>mesmo laboratório.</p><p>CARTWRIGHT, por exemplo, classifica o segmentado como</p><p>uma célula neutrofílica aonde o núcleo tenha uma constrição que</p><p>seja 2/3 menor que a maior parte do núcleo.</p><p>28</p><p>Wim Van der Meer, 2006 29</p><p>HEMOGRAMA - Leucograma</p><p> A microscopia é indispensável para notar:</p><p> as alterações citoplasmáticas, nucleares</p><p> identificação de células imaturas</p><p> As alterações podem ser, principalmente:</p><p> reacionais</p><p> defeitos genéticos notados à microscopia</p><p>30</p><p>6</p><p>Contagem Manual</p><p>de Leucócitos Totais</p><p>31</p><p>Contagem de Leucócitos em câmara de Neubauer</p><p>32</p><p>Fonte: modificado de https://kasvi.com.br/como-e-realizada-contagem-de-celulas/</p><p>Contagem em “L” e em zig-zag</p><p> Escolher qual “L” vai utilizar e padronizar para todas as contagens.</p><p>33</p><p>Contagem de Leucócitos em câmara de Neubauer</p><p>Diluente lisa as hemácias e cora o núcleo dos leucócitos e eritroblastos (se presentes).</p><p>34</p><p>Contagem de Leucócitos em câmara de Neubauer</p><p> Material:</p><p> Sangue coletado com EDTA</p><p> Micropipeta de 20 e de 1000 µL</p><p> Ponteira para 20 e 1000 µL</p><p> Tubo de ensaio para a diluição</p><p> Papel absorvente macio</p><p> Descarte para ponteiras</p><p> Câmara de Neubauer</p><p> Lamínula para Câmara de Neubauer</p><p> Placa de Petri</p><p> Algodão umedecido</p><p> Álcool 70%</p><p> Microscópio</p><p>35</p><p>Contagem de Leucócitos em câmara de Neubauer</p><p> Procedimento:</p><p>1-Preparar a câmara de Neubauer.</p><p>2-Pipetar 380 µL de solução diluente (líquido de Turk) em um tubo.</p><p>2-Pipetar rigorosamente 20µL da amostra de sangue bem homogeneizada</p><p>e transferir para o tubo contendo o diluente (diluição 1:20).</p><p>3-Lavar a ponteira da pipeta varias vezes na solução. Homogeneizar.</p><p>4-Homogeneizar a diluição e transferir, com o auxilio de uma micropipeta, uma alíquota</p><p>para a câmara de Neubauer.</p><p>5-Deixar sedimentar por cerca de 2 minutos (em câmara úmida).</p><p>6-Levar ao microscópio. Focar em menor aumento.</p><p>7-Contar os leucócitos nos 4 quadrantes laterais, em “zig-zag” e em “L”, com objetiva de</p><p>40x. Anotar o valor contado em cada quadrante.</p><p>8-Fazer os cálculos.</p><p>36</p><p>7</p><p>Cálculos - contagem de Leucócitos em câmara de Neubauer</p><p> Área de cada quadrante lateral:</p><p> = 1,0 mm x 1,0 mm = 1,0 mm²</p><p> Área dos quatro quadrantes laterais contados:</p><p> Área contada = 4 x 1,0 mm² = 4,0 mm²</p><p> A altura entre o retículo e a lamínula é de 0,1 mm.</p><p> Volume contado = a x h</p><p>4,0 mm² x 0,1 mm = 0,4 mm³ (= 0,4 µL)</p><p> Fator de correção para que o resultado possa ser expresso por 1 mm³ ou por 1 µL:</p><p> fc =0,4 mm³ x 2,5 = 1,0 mm³, portando o fator de correção = 2,5</p><p> A amostra foi diluída 1:____</p><p> Número de leucócitos/µL = número contado em 4 quadrantes laterais x fc x f dil.</p><p>Leucócitos/mm³ (ou /µL) = células contadas x _____x _____</p><p>20</p><p>Leucócitos/mm³ (ou /µL) = células contadas x _________ 50</p><p>37</p><p>Valores de referência para adultos e crianças</p><p>38</p>