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08/09/2024 1 Hemograma, Contagem diferencial de leucócitos e Automação Objetivos de Aprendizagem: 1. Analisar e interpretar as alterações leucocitárias; 2. Compreender a importância da automação laboratorial; 3. Entender a interpretação gráfica gerada nos aparelhos de automação. Hemograma Uma contagem sanguínea completa, comumente chamada de hemograma, fornece as informações dos componentes celulares. O QUE É HEMOGRAMA E PARA QUE SERVE? Analisa informações das principais linhagens celulares, que são: eritrócitos e leucócitos, bem como, a contagem total de plaquetas. É um dos exames laboratoriais mais básicos e rotineiros. O exame serve como triagem para diversas doenças que acometem o sangue. Também é um exame de rotina importante para observar quaisquer alterações que possam aparecer no organismo do paciente. QUAIS AS DOENÇAS QUE UM HEMOGRAMA PODE DETECTAR? •Anemia; •Leucemia; •Causas de sintomas, como fraqueza, febre e perda de peso; •Infecções virais; •Infecções bacterianas; •Alergias 1 2 3 4 08/09/2024 2 PRÉ-REQUISITOS PARA HEMOGRAMA Para não afetar os resultados do hemograma é recomendado não ingerir bebidas alcoólicas 72 horas antes do exame e evitar exercícios físicos na véspera. PREPARO DO EXAME Não são necessários muitos preparos específicos. Caso o paciente siga uma leve dieta um dia antes do exame, não é necessário fazer jejum. Porém, caso contrário, recomenda-se um jejum de 3 horas. Antes da realização da coleta, é preciso informar se faz o uso de medicamentos contínuos, pois alguns deles podem interferir no exame. CONTRAINDICAÇÕES Não existem contraindicações para realizar o exame de hemograma. TUBO PRA COLETA Possui EDTA jateado na parede do tubo e são utilizados em bancos de sangue. O EDTA é o anticoagulante recomendado para rotinas de hematologia por ser o melhor anticoagulante para a preservação da morfologia celular. Dados do Laboratório Dados do Paciente Eritrograma Leucograma Plaquetas * Os valores podem diferenciar entre os laboratórios e deve ser interpretado juntamente com os outros parâmetros do hemograma. Dados do Laboratório Dados do Paciente Eritrograma Leucograma Plaquetas * Os valores podem diferenciar entre os laboratórios e deve ser interpretado juntamente com os outros parâmetros do hemograma. 5 6 7 8 08/09/2024 3 Eritrograma – Série Vermelha Eritrócito Número de eritrócitos por mm3 Hemoglobina Quantidade encontrada em um determinado volume de sangue Hematócrito Percentual em que os eritrócitos, ocupam no volume de sangue total. VCM Tamanho do eritrócito HCM Quantidade de hemoglobina dentro de um eritrócito CHCM Quantidade de hemoglobina presente em um determinado volume de sangue RDW Variação no tamanho do eritrócito O hematócrito (Ht) é um parâmetro laboratorial, que se refere ao percentual em que os eritrócitos, ocupam no volume de sangue total. O Ht representa um dos mais importantes exames da série vermelha e mensurar o seu valor é essencial para identificar algumas situações que comprometem à saúde, pois ele é proporcional à quantidade de hemoglobina presente no sangue. Microhematócrito A interpretação do resultado é feita em uma escala de leitura onde se limitam as marcas de 0 a 100, observando na escala o limite de separação da massa dos eritrócitos com o plasma. O resultado é expresso em porcentagem de eritrócitos em relação ao sangue total. Valores de referência Homem – 40 a 50% Mulheres – 35 a 45% O QUE PODE SER HEMATÓCRITO BAIXO Anemia carencial Sangramento Desnutrição Leucemia Excesso de hidratação O QUE PODE SER HEMATÓCRITO ALTO Desidratação Baixos níveis de oxigênio no sangue Doença pulmonar Doença cardíaca congênita Eritrocitose, que é o aumento anormal de células vermelhas do sangue 9 10 11 12 08/09/2024 4 Leucograma – Série Branca Leucócitos Totais 100% Plaquetograma Envolve a contagem e a avaliação da morfologia das plaquetas, que são os elementos responsáveis pela coagulação sanguínea. Avaliação do Aprendizado 13 14 15 16 08/09/2024 5 Analise o hemograma ao lado e identifique as alterações: Contagem Diferencial de Leucócitos A contagem diferencial de leucócitos pode ser apresentada em números relativos (porcentagens) ou absolutos (número por microlitro). A interpretação do leucograma deve sempre se basear mais nos números absolutos de leucócitos do que nas porcentagens, particularmente se a contagem de leucócitos estiver muito alta ou muito baixa A contagem diferencial de leucócitos é a contagem de 100 leucócitos em esfregaço sanguíneo, diferenciando-os segundo suas variedades morfológicas. NormalLeucopenia Leucocitose 17 18 19 20 08/09/2024 6 CÉLULA DIMINUIÇÃO AUMENTO Neutrófilo Neutropenia Neutrofilia Linfócito Linfopenia Linfocitose Monócito Monocitopenia Monocitose Eosinófilo Eosinopenia Eosinofilia Basófilo Basopenia Basofilia 40 – 70%20 – 40% 2 – 10% 1 – 4% 0 – 2% Segmentado Bastonete Os NEUTRÓFILOS (10 – 14μm). maduros são células altamente especializados no exercício da fagocitose e na destruição de bactérias e fungos. Atuam no início do processo inflamatório. São os polimorfonucleares mais abundantes no sangue. Neutrófilo Bastão ou Bastonete (seta) - neutrófilo jovem com núcleo em forma de bastão curvado. Normalmente são encontrados no sangue quando há infecções em fase aguda. Neutrófilo segmentado (seta): neutrófilo maduro com núcleo dividido em lóbulos (2 a 5 lóbulos) e citoplasma com granulações finas. É o leucócito que se apresenta em maior quantidade no sangue. 21 22 23 24 08/09/2024 7 Neutrófilo em transição de bastão para segmentado (seta tracejada) e neutrófilo segmentado (seta). Desvio à Esquerda O termo “desvio à esquerda” é utilizado quando há presença de precursores hematopoiéticos imaturos em uma amostra de sangue periférico. No Brasil, esse termo é culturalmente referido aos precursores da linhagem granulocítica. Na hematologia, existem duas definições relacionadas ao desvio à esquerda. A primeira considera o desvio à esquerda quando o número de bastões no sangue periférico está acima do valor de referência. Já a segunda define o desvio à esquerda como a presença de precursores granulocíticos anteriores aos bastões na análise do sangue periférico, sendo esta a definição mais utilizada. Desvio à esquerda escalonado Como o próprio nome diz, as células imaturas aparecem no sangue periférico em uma sequência organizada e mantendo a sua proporção hierárquica de maturação. Isso significa que a porcentagem de células mais imaturas é menor do que a de células maduras sucessoras, demonstrando um aumento da produção de células sanguíneas de maneira controlada e organizada. Desvio à esquerda não escalonado Caracterizado pela presença das células imaturas de forma desordenada, ou seja, sem uma proporção hierárquica de maturação. Nesse caso, a porcentagem de células imaturas pode ser maior do que a de células maduras sucessoras. O desvio à esquerda pode ser encontrado em casos de infecções e inflamações graves, gestação, hipóxia, choque, leucemias mieloides, policitemia vera, etc. Pode estar aliado a outras alterações importantes como a presença de granulação tóxica, vacuolização, displasias, inclusões citoplasmáticas e alterações quantitativas e morfológicas das linhagens eritrocitária e plaquetária, as quais devem ser notificadas no laudo. 25 26 27 28 08/09/2024 8 Os EOSINÓFILOS se assemelham aos neutrófilos, porem são um pouco maiores (14 – 17μm). Apresentam grânulos citoplasmáticos e núcleo bi ou trilobulado. Possuem uma atividade pro-inflamatória e citotóxica considerável, participando da reação e patogênese de numerosas doenças alérgicas, parasitárias. Eosinófilo. Geralmente possuem dois lóbulos e grânulos alaranjados e grosseiros no citoplasma. Basófilo BASÓFILOS com tamanho semelhante ao neutrófilo (10 -14μm), com núcleo obscuro devido a densa quantidade de grânulos corados de preto-púrpuro. Estes grânulos são metacromáticos pois são ricos em histamina e heparina e são liberados em casos de processosalérgicos. 29 30 31 32 08/09/2024 9 Basófilo (seta): geralmente o núcleo se apresenta em dois lóbulos e é de difícil visualização pela grande quantidade de grânulos grosseiros, densos e escuros presentes no citoplasma. Participam de processos alérgicos LINFÓCITOS (2 -12μm). São as principais células funcionais do sistema imune na defesa do organismo. Estas células são capazes de reconhecer moléculas estranhas em agentes infecciosos e combate-las por respostas humoral e citotóxica mediada por células. Linfócito (seta): Núcleo redondo com cromatina condensada, citoplasma escasso e levemente basofílico, tamanho pouco maior do que a hemácia. Linfócitos Típicos e Atípicos (reativos) Linfócitos Típicos (normais) São células pequenas, de aspecto regular, redondas, com pouco citoplasma e cromatina condensada sem nucléolos. Linfócitos Atípicos (reativos) São linfócitos maiores, que se caracterizam especialmente pelo citoplasma abundante e basofílico, com presença de alguns grânulos. Apresentam caracteristicamente uma maior intensidade da basofilia na região submembranosa quando no contato com hemácias. O núcleo pode apresentar cromatina menos condensada em algumas células (cromatina intermediária), eventuais nucléolos, e mesmo terem membrana com contorno irregular. Outro ponto importante é que, nos quadros de atipia, nem todas as células apresentam todas as características citadas, com presença de grande pleomorfismo celular. 33 34 35 36 08/09/2024 10 Os níveis de linfócitos atípicos flutuam devido a várias condições. Eles aumentam em resposta a infecções, doenças autoimunes ou malignidades como linfoma e leucemia. Níveis mais altos de linfócitos atípicos podem indicar uma resposta imune ativa. Por outro lado, níveis baixos podem ser resultado de imunossupressão, como a causada por quimioterapia, infecção pelo HIV ou uso de medicamentos imunossupressores. Portanto, a contagem de linfócitos atípicos é um indicador útil da saúde imunológica do corpo. 1 a 3 - Atipia linfocitária por hiperbasofilia citoplasmática. 4 a 6 - Atipia linfocitária por hiperbasofilia citoplasmática e polimorfismo. 7 a 9 - Atipia linfocitária por aumento da bosofilia citoplasmática e polimorfismo. Monócitos MONÓCITOS (12 -15μm). Estas células tem grande importância no processo inflamatório em nível tecidual devido a sua importância na fagocitose, eliminação de microrganismos e, principalmente, como célula apresentadora de antígenos (APC). Monócito (no centro da imagem). São as maiores células do sangue periférico, núcleo com cromatina frouxa e reticular, e com formato irregular, podendo apresentar aspecto de rim (riniforme, como nesta figura). Avaliação do Aprendizado 37 38 39 40 08/09/2024 11 Automação Laboratorial A automação laboratorial corresponde à adoção de tecnologia em diversos segmentos do laboratório com o intuito de tornar os procedimentos mais rápidos e mais confiáveis. Ou seja, por meio do uso da tecnologia, é possível transformar processos que até então eram realizados de forma manual em processos automatizados. Como consequência disso, há o aumento da produtividade, uma vez que um sistema robotizado consegue realizar em menos tempo aquilo que anteriormente era feito pelo operador. Manual X Automatizado Manual - Baixo custo - Contagem celular - “Contra-prova”/Calibração das técnicas automatizadas - Emergências Automatizado - Boa reprodutividade - Boa repetitividade - Rapidez - Fácil manuseio Vantagens Manual - Erro de reprodutibilidade - Maior tempo - Técnico treinado Automatizado - Indispensável etapas manuais - Checagem de leitura de lâminas - Conferência Desvantagens 41 42 43 44 08/09/2024 12 Qualidade Laboratorial Um laboratório pode fazer mais de 2000 hemogramas por dia! Laboratórios pequenos: média de 100 à 200 hemogramas/dia Laboratórios de médio porte: de 500 à 700 hemogramas/dia Laboratórios grandes: mais de 1000 hemogramas/dia Hemograma Automatizado Técnica mais utilizada em todos os laboratórios clínicos do mundo. Mais rápida, reprodutível e confiável do que a técnica manual. Amostra de sangue é aspirada pelo equipamento. Após tratamento com soluções específicas, ela passa por eletrodos que medem o tamanho da célula e sua complexidade. Desta maneira é possível distinguir entre os diversos tipos celulares do sangue. Impedância elétrica Nos aparelhos hematológicos, esse é o método comumente encontrado. As células sanguíneas são contadas e medidas a partir dos impulsos elétricos que geram quando são imersas em um meio condutor (solução eletrolítica). As células também são orientadas em um fluxo laminar e interceptadas uma a uma por uma corrente elétrica. Mesmo sendo más condutoras de energia, quando imersas em um meio condutor podem ser contadas e medidas a partir dos impulsos elétricos que geram. O número de pulsos obtidos durante o ciclo de contagem é correspondente ao número de células contadas. Quanto maior a corrente elétrica, ou seja, a intensidade do pulso elétrico, maior é tamanho da célula. Por esse método são contados eritrócitos, e em diferente diluição após sua lise, contam-se os leucócitos e as plaquetas. 45 46 47 48 08/09/2024 13 A somatória dos impulsos elétricos produzem os histogramas, importantes para analise da variabilidade das populações celulares 49 50 51 52 08/09/2024 14 Cada célula tem um tamanho diferente, logo, irão formar picos diferentes no histograma Leucócitos Eritrócitos Índices Hematimétricos Plaquetas 53 54 55 56 08/09/2024 15 Avaliação do Aprendizado De acordo a análise dos histogramas abaixo, identifique a alternativa correta: A: histograma normal a. O paciente é portador de linfocitose b. O paciente é portador de neutrofilia c. O paciente é portador de monocitose d. O paciente é portador de neutropenia e. O paciente é portador de trombocitose B: histograma de paciente 57 58 59 60 08/09/2024 16 https://www.youtube.com/watch?v=_gCdDhE6cCs https://www.youtube.com/watch?v=pqUfzfiIVVE&t=23s 61