Aula Pratica 4 Modo de Compatibilidade

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<p>Aula Prática Microbiologia:</p><p>Coleta, transporte e</p><p>Universidade Federal do Maranhão</p><p>Centro de Ciências Sociais, Saúde e Tecnologia</p><p>Curso: Engenharia de Alimentos</p><p>Disciplina: Microbiologia Geral</p><p>Coleta, transporte e</p><p>estocagem de amostras para</p><p>análise</p><p>Professora: Virlane Kelly Lima</p><p>Coleta, transporte e estocagem de amostra para análise</p><p>American Public Helath Association (APHA), descritas na</p><p>4° edição do Compedium of Methods for</p><p>Microbiological examination</p><p>A coleta de amostra para avaliação de lotes de</p><p>alimentos processados deve obedecer a planos de</p><p>amostragem.amostragem.</p><p>A obtenção das amostras, seu transporte para o</p><p>laboratório e sua preparação são etapas fundamentais</p><p>para o sucesso da análise.</p><p>O número de unidades a serem coletadas para a análise</p><p>e os critérios adotados para a aprovação ou reprovação</p><p>de um produto definem um plano de amostragem.</p><p>Coleta, transporte e estocagem de amostras para análise</p><p>Definições importantes</p><p>Lote: quantidade de alimento de mesma composição e</p><p>características químicas e sensoriais, produzida e manuseada numa</p><p>mesma batelada, sob as mesmas condições.</p><p>Lote: quantidade de alimento produzida dentro de um intervalo de</p><p>tempo de funcionamento de uma linha de produção, semtempo de funcionamento de uma linha de produção, sem</p><p>interrupção.</p><p>Amostra de lote: um determinado número de entidade individuais,</p><p>retirada ao acaso, para representar o lote.</p><p>Lote inteiro não pode ser analisado(perda econômica).</p><p>Alimentos acondicionados em embalagens individuais, é</p><p>composta de n embalagens individuais.</p><p>Grandes massas de alimentos, é composta de n alíquotas do</p><p>produtos.</p><p>Coleta, transporte e estocagem de amostras para análise</p><p>Planos de amostragem de lotes:</p><p>Tomada de n unidades analíticas deve seguir plano estatístico.</p><p>Plano de duas ou três classes.</p><p>Plano de duas classes:aceitável e inaceitável.</p><p>Aplicados no caso de presença e ausência.</p><p>Ausência é aceitávelAusência é aceitável</p><p>Presença em qq das n unidades de amostra é inaceitável.</p><p>Plano de três classes:Aceitável, qualidade intermediária e inaceitável</p><p>Recomendados nos casos onde o padrão são valores dentro de uma</p><p>faixa m e M.</p><p>n: Número de unidades de amostras a serem colhidas</p><p>aleatoriamente de um mesmo lote.</p><p>m: limite inferior e M: limite superior</p><p>m: padrão microbiológico estabelecido para um m.o.</p><p>Coleta, transporte e estocagem de amostras para análise</p><p>M: limite tolerável, acima do padrão, que pode ser atingido por</p><p>algumas unidades de amostras.</p><p>2 classes: Separa o lote aceitável do inaceitável</p><p>3 classes: Separa o lote com qualidade intermediária do lote</p><p>inaceitável.</p><p>c: dentre as n unidades de amostras, c é o número máximo dec: dentre as n unidades de amostras, c é o número máximo de</p><p>unidades que podem ser aceitas com contagens acima de padrão m,</p><p>desde que não acima do limite M.</p><p>Padrão microbiológico é ausência, c = 0</p><p>Coleta, transporte e estocagem de amostras para análise</p><p>Exemplo:</p><p>M=106 m=105 n=5 c=3</p><p>Se uma unidade der resultados> 106 o lote deve ser rejeitado</p><p>Se 4 ou + unidades derem resultados maiores que 105: rejeitado</p><p>Coleta, transporte e estocagem de amostras para análise</p><p>Definições importantes</p><p>Embalagens ou alíquotas individuais são</p><p>chamadas unidade de amostra.</p><p>Inferir as características de todo o lote.Inferir as características de todo o lote.</p><p>Unidade de amostra: contém uma quantidade</p><p>maior que necessária para a análise.</p><p>Unidade Analítica</p><p>Quantidade de alimento que será efetivamente</p><p>utilizada na análise.</p><p>Coleta, transporte e estocagem de amostras para análise</p><p>Critérios para seleção e preparação dos frascos de coleta:</p><p>Com tampas à prova de vazamentos</p><p>De material aprovado para contato com alimento e de preferência</p><p>pré-esterilizados</p><p>Tamanho adequado.</p><p>Lembre-se: 1 unidade de amostra deve conter no mínimo 2x a</p><p>unidade analítica (3 a 4 x para separação da contra-amostra) 200 g</p><p>ou 300-500 mL são suficiente para a maioria dos alimentos .</p><p>Um frasco de coleta não deve ser completamente preenchido Os</p><p>frascos e utensílios devem ser esterilizados (autoclave, estufa, vapor</p><p>fluente, flambagem em chama, imersão em etanol 70%)</p><p>Coleta, transporte e estocagem de amostras para análise</p><p>Coleta de amostra para análise</p><p>Alimentos em embalagens individuais:</p><p>Embalagem comercial original, fechada e intacta.</p><p>Se a quantidade da embalagem não for suficiente</p><p>para a análise: juntar o conteúdo de várias</p><p>embalagens em um único frasco estéril e retirar a</p><p>unidade analítica da mistura.unidade analítica da mistura.</p><p>Alimentos em grandes embalagens ou tanques:</p><p>porções representativas para frascos ou bolsas de</p><p>coleta estéreis, sob condições assépticas.</p><p>Coleta de amostra para análise</p><p>Seleção de preparação de frascos para coleta de alimentos</p><p>acondicionados em embalagens não individuais.</p><p>a) Utilizar frascos ou bolsas com tampa à prova de vazamento,</p><p>material não tóxico, autoclaváveis ou pré-esterilizados.</p><p>b) Frascos de tamanho adequado.</p><p>c) Frascos e utensílios devem ser esterilizados em autoclave,</p><p>flambagem em chama, imersão e etanol e combustão do álcool e</p><p>uso de desinfetantes,</p><p>Coleta de amostra para análise</p><p>Procedimentos para coleta de alimentos acondicionados em</p><p>embalagens não individuais.</p><p>a) Antes de iniciar promover a mistura de toda a massa de</p><p>alimento.</p><p>b) Se não for possível promover a mistura, retirar porções de</p><p>diferentes partes do alimento, até obter a quantidade adequada.diferentes partes do alimento, até obter a quantidade adequada.</p><p>c) Não segurar os frascos diretamente acima da massa do</p><p>alimento.Não introduzir o frasco de coleta diretamente no</p><p>produto, usar utensílios.</p><p>d) Abrir os fracos apenas o necessário para introduzir o produto e</p><p>fechá-lo imediatamente.</p><p>e) Não tocar a superfície interna dos frascos ou bolsas de coleta.</p><p>f) Pessoas treinadas para fazer a coleta, tratar como amostra</p><p>contaminada.</p><p>Coleta de amostra para análise</p><p>Coleta de amostra para análise</p><p>Procedimentos para coleta de alimentos envolvidos</p><p>em casos de DTAS</p><p>a) Coletar e analisar amostras de todos os alimentos</p><p>suspeitos, o mais cedo possível.</p><p>b) Não coletar alimentos que tenham sofrido abuso</p><p>de temperatura.de temperatura.</p><p>c) Não coletar alimentos que já se encontrem em</p><p>estado parcial de deterioração.</p><p>d) Se não houver sobras das refeições suspeitas</p><p>Coletar amostras de refeições similares</p><p>Coletar amostra de ingredientes e matéria-prima.</p><p>Coletar vasilhames onde as refeições estavam</p><p>acondicionadas.</p><p>Coleta de amostra para análise</p><p>Procedimentos para coleta de amostras de água</p><p>a) Água engarrafada:Embalagem original, lacrada.</p><p>b) Amostras de torneiras e tubulações.</p><p>c) Água de poço ou cisterna com bomba.c) Água de poço ou cisterna com bomba.</p><p>d) Amostras de águas de rios, lagos ou</p><p>reservatórios.</p><p>e) Amostras cloradas devem ter o cloro residual</p><p>neutralizado antes da análise.(Solução 3% de</p><p>tiossulfato de sódio).</p><p>Coleta de amostra para análise</p><p>Fig. 4 – (1)- Passar um algodão ou gaze embebido em álcool 70% na torneira, inclusive na</p><p>parte de dentro, como mostra a figura 2. (3)- Deixar a torneira aberta durante 3 minutos. (4) -</p><p>Coletar a água em frasco estéril até preencher 2/3 do volume (de 300 a 400 mL),</p><p>Coleta de amostra para análise</p><p>Procedimentos para coleta de amostras de água</p><p>Sistemas de Distribuição de Água Para Consumo Humano</p><p>1 - Verificar se o ponto de coleta recebe água diretamente do</p><p>sistema de distribuição e não de caixas, reservatórios ou cisternas;</p><p>2 - A torneira não deverá ter aeradores ou filtros, nem apresentar</p><p>vazamentos de água;vazamentos de água;</p><p>3 - Inicialmente abrir a torneira e deixar escoar a água por 2 a 3</p><p>minutos, ou o tempo suficiente para eliminar impurezas e água</p><p>acumulada na canalização;</p><p>4 - Caso seja necessário, utilizar uma solução de hipoclorito para</p><p>eliminar qualquer tipo de contaminação externa;</p><p>5 - Remover completamente o hipoclorito antes da coleta;</p><p>Coleta de amostra para análise</p><p>Procedimentos para coleta de amostras de água</p><p>6 - Abrir a torneira a meia secção (fluxo pequeno e sem respingos)</p><p>por 2 minutos;</p><p>7 - Remover a tampa do frasco conjuntamente com o papel protetor,</p><p>com todos</p><p>os cuidados de assepsia, evitando contaminação dacom todos os cuidados de assepsia, evitando contaminação da</p><p>amostra pelos dedos, luvas ou outro material;</p><p>8 - Segurar o frasco verticalmente, próximo à base e efetuar o</p><p>enchimento, deixando um espaço vazio de aproximadamente 2,5 a</p><p>5,0 centímetros do topo, possibilitando a homogeneização;</p><p>9 - Fechar o frasco imediatamente após a coleta, fixando bem o</p><p>papel protetor ao redor do gargalo e trazer ao laboratório sob</p><p>refrigeração.</p><p>Coleta de amostra para análise</p><p>Procedimentos para coleta de amostras de água : Poços freáticos</p><p>1 - Em poços equipados com bombas manuais ou mecânicas,</p><p>bombear a água durante aproximadamente 5 minutos;</p><p>2 - Realizar desinfecção da saída da bomba com hipoclorito;</p><p>3 - Deixar a água escorrer novamente antes da coleta de amostra;3 - Deixar a água escorrer novamente antes da coleta de amostra;</p><p>4 - Remover a tampa do frasco conjuntamente com o papel protetor,</p><p>com todos os cuidados de assepsia, evitando contaminação da</p><p>amostra pelos dedos, luvas ou outro material;</p><p>Coleta de amostra para análise</p><p>Procedimentos para coleta de amostras de água : Poços freáticos</p><p>5 - Segurar o frasco verticalmente, próximo à base e efetuar o</p><p>enchimento, deixando um espaço vazio de aproximadamente 2,5 a</p><p>5,0 centímetros do topo, possibilitando a homogeneização;</p><p>6 - Fechar o frasco imediatamente após a coleta, fixando bem o</p><p>papel protetor ao redor do gargalo e trazer ao laboratório sob</p><p>refrigeração.refrigeração.</p><p>7 - Em poços sem bomba, a amostragem deixa de ser feita</p><p>diretamente no poço, utilizando um recipiente esterilizado (passar</p><p>álcool em baldes);</p><p>8 - Não retirar amostras da camada superficial da água, evitando a</p><p>contaminação com espuma ou com outro material das paredes do</p><p>poço.</p><p>Coleta de amostra para análise</p><p>Procedimentos para coleta de amostras de água :</p><p>Águas Superficiais</p><p>Amostras coletadas diretamente de um corpo receptor:</p><p>1 - Procurar evitar a coleta de amostras em áreas estagnadas ou em</p><p>locais próximos às margens;</p><p>2 - Com todos os cuidados de assepsia, remover a tampa do frasco</p><p>juntamente com o papel protetor;juntamente com o papel protetor;</p><p>3 - Com uma das mãos, segurar o frasco pela base, mergulhar</p><p>rapidamente o frasco com a boca para baixo, de 15 a 30 centímetros</p><p>abaixo da superfície da água, para evitar a introdução de</p><p>contaminantes superficiais;</p><p>4 - Direcionar o frasco de modo que a boca fique em sentido</p><p>contrário à correnteza;</p><p>Coleta de amostra para análise</p><p>Procedimentos para coleta de amostras de água :</p><p>Águas Superficiais</p><p>5 - Se o corpo de água for estático, deverá ser criada uma corrente</p><p>superficial, através da movimentação do frasco na direção horizontal</p><p>(sempre para frente);</p><p>6 - Inclinar o frasco lentamente para cima, a fim de permitir a saída6 - Inclinar o frasco lentamente para cima, a fim de permitir a saída</p><p>de ar e subseqüente enchimento do mesmo;</p><p>7 - Retirar o frasco do corpo d’água, desprezar uma pequena porção</p><p>da amostra, deixando um espaço vazio suficiente que permita a</p><p>homogeneização da amostra para análise;</p><p>8 - Fechar o frasco imediatamente, fixando o papel protetor ao redor</p><p>do gargalo e trazer ao laboratório.</p><p>Coleta, transporte e estocagem de amostras para análise</p><p>Água clorada:</p><p>Adicionar aos frascos de coleta, antes da esterilização 0,1ml de uma</p><p>solução 3% de tiossulfato de sódio para cada 100ml de amostra.</p><p>Neutraliza 5 mg Cl/l</p><p>Concentração de CL acima de 5 mg/l: 0,1mL de uma solução 10% de</p><p>tiossulfato de sódiotiossulfato de sódio</p><p>Neutraliza 15mg de Cl residual por litro.</p><p>Água com teor de metais(>1,0 mg/L) Cu e Zn: coletar em frascos com</p><p>EDTA(ácido etilenodiaminotetracético): agente quelante.</p><p>Adicionar aos frascos 0,3mL de uma solução 15% de EDTA para cada</p><p>100 mL de água.</p><p>As soluções de tiossulfato e EDTA podem ser adicionadas aos mesmo</p><p>frasco.</p><p>Coleta, transporte e estocagem de amostras para análise</p><p>INFORMAÇÕES QUE DEVEM ACOMPANHAR AS AMOSTRAS</p><p>Tipo de amostra e processo usado na fabricação</p><p>Fabricante,</p><p>Data fabricação,</p><p>Código do lote</p><p>Solicitante da análiseSolicitante da análise</p><p>Data e local da coleta razão da análise</p><p>Transporte e estocagem de amostra até o momento da</p><p>análise</p><p>Normalmente transportar e estocar da mesma forma que o produto</p><p>é normalmente transportado e estocado até sua comercialização.</p><p>a) Alimentos com baixa atividade de água: temperatura ambiente,</p><p>protegidos contra umidade.protegidos contra umidade.</p><p>b) Alimentos congelados: mantidos congelados até o momento da</p><p>análise.</p><p>c) Alimentos refrigerados: mantidos sob refrigeração desde a coleta</p><p>até o momento da análise.</p><p>d) Alimentos em embalagens herméticas: temperatura ambiente,</p><p>não sendo exposto a temperaturas > que 45°C.</p><p>Transporte e estocagem de amostra até o momento da</p><p>análise</p><p>Transporte e estocagem de amostras de água</p><p>a) Água engarrafada: embalagem original lacrada, T ambiente.</p><p>b) Embalagens abertas ou amostras transferidas para outrosb) Embalagens abertas ou amostras transferidas para outros</p><p>frascos: Transporte sob refrigeração, intervalo entre coleta e</p><p>análise 8h não ultrapassar 24h.</p><p>c) Outros tipos de água: refrigeração</p><p>homogeneização.</p><p>Inverter a embalagem 25 vezes.Inverter a embalagem 25 vezes.</p><p>Se não houver espaço para agitação, utilizar um segundo frasco.</p><p>Se houver formação de espuma esperar que a espuma disperse.</p><p>Se a amostra for gaseificada: agitar em shaker.</p><p>Retirada com pipeta: profundidade não maior que 2,5 cm abaixo</p><p>da superfície.</p><p>Espaço entre homogeneização e retirada da amostra:3minutos.</p><p>Homogeneização da amostra e retirada da unidade</p><p>analítica</p><p>Procedimento para a homogeneização e retirada de unidade analítica</p><p>de produtos sólidos ou líquidos concentrados.</p><p>Produtos em pó: homogeneizar invertendo a embalagem</p><p>com as mãos.</p><p>Iogurtes com pedaços de frutas: liquidificador</p><p>Queijos:macerar todo o conteúdo e retirar a unidadeQueijos:macerar todo o conteúdo e retirar a unidade</p><p>analítica.</p><p>Amostra congelada: descongelar sob refrigeração(0 a 4°C)</p><p>por não mais de 24h na embalagem original.</p><p>Grande peças de carnes: usar furadeira elétrica.</p><p>Homogeneização da amostra e retirada da unidade</p><p>analítica</p><p>Procedimento para a homogeneização e retirada de unidade analítica</p><p>de produtos sólidos ou líquidos concentrados.</p><p>Amostra heterogênea: porções com diferentes camadas</p><p>ou liquidificar.</p><p>Quantidade de amostra menor que a unidade analítica</p><p>requerida: metade da análise, guardar a contra prova.requerida: metade da análise, guardar a contra prova.</p><p>Homogeneização em liquidificador: diluente cobrir as</p><p>facas do aparelho.</p><p>Homogeneização da amostra e retirada da unidade</p><p>analítica</p><p>Procedimento para retirada da unidade analítica pela técnica do</p><p>esfregaço da superfície.</p><p>Alimentos com contaminação superficial</p><p>Ex:carcaças de bovinos, suínos, aves e peixes.</p><p>Análise de equipamentos, mesas, utensílios e</p><p>embalagens.embalagens.</p><p>Esfregaço: swabs estéreis, esponjas, tampões de algodão</p><p>estéreis.</p><p>Homogeneização da amostra e retirada da unidade</p><p>analítica</p><p>Procedimento para retirada da unidade analítica pela técnica da</p><p>lavagem superficial.</p><p>Alimentos com contaminação superficial</p><p>Ex:carcaças de aves inteiras, peixes,cascas de ovos, grãos,</p><p>sementes, castanhas, amendoins</p><p>Mergulhar em diluente adequado contido em bolsaMergulhar em diluente adequado contido em bolsa</p><p>estéril.</p><p>Aplica-se a análise de embalagens.</p><p>Homogeneização da amostra e retirada da unidade</p><p>analítica</p><p>Guarda de contra-amostra</p><p>Guarda de material remanescente nas mesmas condições</p><p>de análise.</p><p>Amostras perecíveis: congeladas</p><p>Unidade amostral swab ou lavagem: congelar parte nãoUnidade amostral swab ou lavagem: congelar parte não</p><p>utilizada do diluente.</p><p>Tempo de guardar contra prova: até obtenção dos</p><p>resultados, ou a critério do laboratório.</p>