normas e biossegurança

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Normas de laboratório e 
Biossegurança
UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA - UFBA
INSTITUTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE - ICS
DEPARTAMENTO DE BIOFUNÇÃO
Disciplina: Bioquímica para Biotecnologia A013
_____________________________________________________________________________________________
Dra. Daniele Takahashi
Salvador, novembro de 2012
BIOSSEGURANÇA
CONCEITO GERAL
Procedimentos e ações capazes de eliminar 
ou minimizar riscos inerentes as atividades 
de pesquisa, produção, ensino, que podem 
comprometer a saúde do homem, dos 
animais, do meio ambiente ou a qualidade 
dos trabalhos desenvolvidos.
CONCEITO 
“Processo voltado para a segurança, o
controle e a diminuição de riscos advindos da
biotecnologia”.
Comissão Técnica Nacional de Biossegurança (CTNBio)
Nacional
MTE – Ministério do Trabalho e 
Emprego (Legislação Trabalhista e as 
NR’s – Normas Regulamentadoras)
Ministério da Saúde (segurança do 
trabalhador)
MCT - Ministério da Ciência e 
Tecnologia (aprovação de projetos)
CTNBio – Comissão Técnica 
Nacional de Biossegurança 
(Instruções Normativas)
LEGISLAÇÃO
Lei nº 11.105
(24 de março de 2005)
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Atividade de risco são as capazes de 
proporcionar dano, doença ou morte.
RISCO e PERIGO
• RISCO é o perigo mediado pelo
conhecimento que se tem da
situação. É o que temos como
prevenir.
• PERIGO existe enquanto não se
conhece a situação. É o
desconhecido ou mal conhecido.
NÍVEIS DE RISCOS
Primário: é a própria fonte de risco, quando por si só
já é um risco
Ex. frasco de éter, material pérfuro-cortante
Secundário: é a própria fonte de riscos + a condição
insegura ligada ao humano
Ex. frasco de éter colocado próximo a fonte de calor,
material pérfuro-cortante descartado em lixos comum
somado ao não gerenciamento dos resíduos.
Riscos Ergonômicos
Riscos Físicos
Riscos Químicos
Riscos Biológicos
TIPOS DE RISCOS NO TRABALHO EM LABORATÓRIO
PODEM CAUSAR ACIDENTES
ACIDENTES DE TRABALHO
O que pode provocar?
Qualquer fator que coloque o trabalhador em situação
de perigo.
Exs:
•máquinas e equipamentos sem proteção, probabilidade
de incêndio e explosão,
•arranjo físico inadequado,
•armazenamento de reagentes em local inadequado,
•Etc....
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1. RISCOS ERGONÔMICOS: qualquer fator que possa
interferir nas características psicofisiológicas do
trabalhador causando desconforto ou afetando sua
saúde.
Ex: o levantamento e transporte manual de peso, o
ritmo excessivo de trabalho, a monotonia, a
repetitividade, a responsabilidade excessiva, a postura
inadequada de trabalho, o trabalho em turnos.
TIPOS DE RISCOS TIPOS DE RISCOS
2. RISCOS FÍSICOS: causador por diversas formas de
energia a que possam estar expostos os trabalhadores.
Ex. Ruído, vibrações, pressões anormais, temperaturas
extremas, radiações ionizantes, radiações não
ionizantes, ultra-som, materiais cortantes e
ponteagudos, etc.
•Pressões anormais: embolia traumática pelo ar,
intoxicação por oxigênio e gás carbônico, doença
descompressiva.
•Radiações ionizantes (raios X, raios gama, raios alfa, raios beta,
neutrons, prótons)
Podem causar: alterações celulares, câncer, fadiga,
problemas visuais.
•Radiações não ionizantes (luz visível, infravermelhos,
ultravioletas, microondas de aquecimento, corrente elétrica).
•Podem causar: queimaduras, lesões na pele, nos olhos e em outros
órgãos.
ATENÇÃO
As radiações infravermelho, ultravioleta e de 
raios laser podem causar ou agravar problemas 
visuais e outros.
catarata, queimaduras, lesões na pele 
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AGENTES FÍSICOS: ESTUFA AGENTES FÍSICOS: AUTOCLAVE
AGENTES FÍSICOS: NITROGÊNIO LIQUIDO EXEMPLOS DE APLICAÇÕES BIOTECNOLÓGICAS DA RADIAÇÃO ionizante
Imunoquímica
Ramo da Bioquímica e da 
Imunologia que estuda as 
reações dos sistemas 
imunitários e dos seus 
componentes a nível 
molecular. 
Anticorpos radioativos 
produzem radiação gamma e 
podem ser fotografados por 
equipamento especializado
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Southern Blotting
A membrana com DNA é colocada em contato com uma sonda de DNA que 
contém átomos radioativos ou corantes fluorescentes ligando-se a ela - Essa 
sonda irá parear com qualquer seqüência de DNA complementar a ela, 
identificando assim a seqüência procurada. 
Imagem: Distribuição de endotelina, um peptídeo que age
como mensageiro químico dentro do organismo.
Aqui a proteína presente foi marcada com uma molécula
radioativa.
Bioquímica
3. RISCOS QUÍMICOS: Substâncias, compostos ou
produtos que possam penetrar no organismo via
respiração, nas formas de poeiras, fumos, névoas,
neblinas, gases ou vapores, ou serem absorvido pelo
organismo através da pele e/ou por ingestão.
 Podem causar intoxicação e mutação (substâncias
cancerígenas).
TIPOS DE RISCOS
•Irritantes: são causados, por exemplo, por ácido
clorídrico, ácido sulfúrico, fenol, amônia, soda cáustica,
cloro,
Provocam irritação das vias aéreas superiores.
•Asfixiantes: gases como hidrogênio, nitrogênio, hélio,
metano, acetileno, dióxido de carbono, monóxido de
carbono
Causam dor de cabeça, náuseas, sonolência, convulsões,
coma e até morte.
•Anestésicos: a maioria dos solventes orgânicos como o
butano, propano, aldeídos, acetona, cloreto de carbono,
benzeno, xileno, álcoois, tolueno,
Tem ação depressiva sobre o sistema nervoso central,
provocando danos aos diversos órgãos.
AGENTES QUÍMICOS X SAÚDE
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Neurotóxicos: Butil-Metacrilato, Organofosforados, Xilol,
Acrilamida, Clorofórmio, Metanol (efeito cumulativo).
Mutagênicos: Brometo de Etídeo, Azul trypan, Acrilamida,
Formaldeído, fenol, Clorofórmio
AGENTES QUÍMICOS X SAÚDE
4. RISCOS BIOLÓGICOS
“Amostras provenientes de seres vivos”
• Plantas
• Animais
• Bactérias (incluindo OGM’s)
• Fungos
• Protozoários
• Insetos
• Amostras biológicas de animais e seres humanos 
como sangue, urina, escarro, fezes, secreções...)
TIPOS DE RISCOS
AGENTES BIOLÓGICOS
Os agentes biológicos constituem-se no mais antigo risco de que se 
tem notícia; Bernardino Ramazzini Pai da Medicina do Trabalho, em 
sua obra-prima datada de 1700, (PAGS 1992:66) [ I ], já fazia referência 
às doenças dos coveiros:
"A plebe, nas suas paróquias, põe os seus mortos amontoados em
promiscuidade, dentro de grandes sepulcros; quando os coveiros
descem a esses antros fétidos, cheios de cadáveres semi-pútridos,
para depositarem outros mortos que trazem, expõem-se a perigosas
doenças, como febres malignas, morte repentina, caquexia,
hidropsias, catarros sufocantes e outras doenças mais, muito graves;
apresentam face cadavérica e aspecto amarelado como quem vai
trabalhar no Inferno. Pode acreditar-se que a causa mais ativa e pior
desses males pestíferos está na descida ao sepulcro, pois, no seu
interior, respira-se necessariamente uma atmosfera pestilenta, à qual
se incorporam os espíritos animais (cuja natureza deve ser etérea),
inabilitando-os para a sua função, isto é, para a manutenção de toda
a máquina vital."
Meios de transmissão dos agentes biológicos:
Transmissão por contato direto ou indireto; 
Transmissão por vetor biológico ou mecânico; 
Transmissão pelo ar;
Rotas de entrada:
 inalação; 
 ingestão; 
penetração através da pele;
contato com mucosas dos olhos, 
nariz e boca.
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CLASSIFICAÇÃO DO RISCO BIOLÓGICO:
Os agentes de risco biológico podem ser distribuídos
em quatro classes (ordem crescente de risco
classificados segundo os seguintes critérios):
•Patogenicidade para o homem;
•Virulência;
•Modos de transmissão;
•Disponibilidade de medidas profiláticas eficazes;
•Disponibilidade de tratamento eficaz;
•Endemicidade.
• Classe de Risco I - Escasso risco individual e comunitário.
O Microrganismo tem pouca probabilidade de provocar
enfermidades humanas ou enfermidades de importância
veterinária.
Ex: Bacillus subtilis
• Classe de Risco II - Risco individual moderado, risco
comunitário limitado.
A exposição ao agente patogênico pode provocar a
infecção, porém, se dispõe de medidas eficazes de
tratamento e prevenção, sendo o risco de propagação
limitado.Ex: Schistosoma mansoni
CLASSIFICAÇÃO DO RISCO BIOLÓGICO
• Classe de Risco III - Risco individual elevado, baixo risco
comunitário.
• O agente patogênico pode provocar enfermidades
humanas graves, podendo propagar-se de uma pessoa
infectada para outra, entretanto, existe profilaxia e/ou
tratamento.
Ex: Mycobacterium tuberculosis
• Classe de Risco IV - Elevado risco individual e
comunitário.
Os agentes patogênicos representam grande ameaça
para as pessoas e animais, com fácil propagação de um
indivíduo ao outro, direta ou indiretamente, não existindo
profilaxia nem tratamento.
Ex: Vírus Ebola- febre hemorrágica ebola (Fiocruz)
CLASSIFICAÇÃO DO RISCO BIOLÓGICO
O laboratório é um lugar de trabalho sério, portanto as 
atividades devem ser desenvolvidas com extrema 
atenção e cuidado.
Antes de iniciar-se qualquer
atividade deve-se tomar o
cuidado de fazer uma
preparação correta do ambiente
EVITANDO OS RISCOS E ACIDENTES
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Antes do Trabalho Laboratorial, Procure se informar 
sobre:
 Os riscos dos materiais e
reagentes com que vai trabalhar.
Os procedimentos de
Segurança no Laboratório.
Saídas e caminhos de evacuação,
em caso de acidente.
Localização EPCs e EPIs.
Lava olhos 
Extintores
Chuveiro
Caixa de primeiros 
socorros
Equipamentos de proteção coletiva (EPCs)
EQUIPAMENTOS DE PROTEÇÃO INDIVIDUAL
EPIs
EQUIPAMENTOS DE PROTEÇÃO INDIVIDUAL
Usar guarda-pó de 
algodão com 
mangas compridas
Óculos de proteção
Luvas de proteção
Sapatos fechados com 
sola antiderrapante e 
impermeabilizados
Máscaras de proteção
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Óculos de Segurança proteção dos olhos
 Para trabalho com
substâncias corrosivas ou
com perigo de projeções.
 Podem ser usados com
óculos normais.
 Contra o risco de poeiras.
PARA QUE SERVEM OS EPIs Luvas de Proteção  proteção das mãos
Protegem contra o risco de cortes,
queimaduras e exposição a
agentes tóxicos.
Requer uma seleção apropriada
tendo em conta o risco ao qual o
usuário irá se expor
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Luvas
Luvas de procedimentos
Luvas de borracha
• Luvas cirúrgicas
Máscaras de proteção  sistema respiratório
Proteção do sistema respiratório 
contra gases, vapores, névoas, 
poeiras ou partículas tóxicas.
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CUIDADOS COM SUBSTÂNCIAS QUÍMICAS
Manusear os compostos
voláteis SEMPRE em uma
capela.
Armazenar solventes e
substâncias corrosivas em
frascos de vidro, de preferência
que não permitam a passagem
da luz.
Descartar substâncias tóxicas e
corrosivas e local adequado,
NUNCA DIRETAMENTE NA PIA.
Utilizar pipetadores automáticos
ou pêras de sucção.
NUNCA PIPETAR COM A BOCA!
CUIDADOS COM A PIPETAGEM
CUIDADOS COM AQUECIMENTO
 Não aqueça bruscamente qualquer substância.
 Nunca direcione a abertura de tubos de ensaio ou
frascos para si ou para outra pessoa durante o
aquecimento.
 Não utilize “chama exposta “ em locais onde esteja
ocorrendo manuseio de solventes voláteis.
 Não aqueça fora das capelas, substâncias que
gerem vapores tóxicos.
Equipamento ou vidraria que tenha sido removida da
sua fonte de aquecimento e que ainda esteja quente
Colocar o aviso:
“CUIDADO MATERIAL AQUECIDO”
Cuidados com aquecimento
 Usar sempre luvas de isolamento térmico ao
manipular material quente.
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CUIDADOS COM APARELHAGEM, EQUIPAMENTOS E 
VIDRARIAS
 Ao usar material de vidro, verifique sua condição;
Qualquer material de vidro trincado, quebrado ou com
arestas cortantes deve ser rejeitado.
 Antes de iniciar a montagem, inspecione a
aparelhagem, certifique-se de que ela esteja completa
intacta e em condições de uso.
 Nunca provar ou cheirar, diretamente, soluções ou
produtos químicos.
Evitar o hábito de levar as mãos à boca, nariz, olhos,
rosto ou cabelo, durante a execução das atividades.
REGRAS GERAIS DE SEGURANÇA EM LABORATÓRIO
 Lavar com frequência as mãos no (inicio, durante e
no fim das atividades laboratoriais).
 Nunca trabalhar sozinho no laboratório.
INFORMAR E REGISTRAR:
 Os Acidentes;
 As Lesões;
 Os princípios de incêndio;
Derramamento de substâncias.
MESMO QUE PAREÇAM PEQUENOS E 
SEM IMPORTÂNCIA!!!
Regras gerais É EXPRESSAMENTE PROIBIDO!!!!
COMER
BEBER
FUMAR
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DESCARTE DE RESÍDUOS
 Os resíduos químicos de laboratório não devem ser
despejados diretamente na pia/ esgoto.
 Todos os resíduos devem ser adequadamente
acondicionados, devidamente identificados e
eliminados.
NÃO misturar solventes, ácidos e outras substâncias
que poderão reagir entre si.
ATENÇÃO!!!
Dependendo das características dos produtos, 
deverão ser feitos tratamentos prévios ao despejo.
Descarte de resíduos
ANTES DE DEIXAR O LABORATÓRIO
1) Desligar a água
2) Desligar os equipamentos elétricos.
3) Arrumar a bancada.
4) Guardar os reagentes.
5) Lavar as mãos.
BIOSSEGURANÇA.COM
http://www.biosseguranca.com/home.htm
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RADIAÇÃO RISCO 
BIOLÓGICO
ARMA 
QUÍMICA
SIMBOLOGIA IRRITANTE
INFLAMÁVEL
PERIGO AO 
MEIO AMBIENTE
TÓXICO
CORROSIVO
C
O
M
B
U
S
TÍ
V
E
L
E
XP
LO
S
IV
O
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RISCO
BIOLÓGICO
RADIAÇÃO 
IONIZANTE
RADIAÇÃO 
NÃO 
IONIZANTE
RADIAÇÃO A 
LASER
O
GÁS 
COMPRIMID
O
SUPERFÍCIE 
AQUECIDA A
BAIXA 
TEMPERATUR
A
CAMPO 
MAGNÉTICO
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REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
• BRASIL. Portaria nº 3.214 de 08 de junho de 1978 NR - 5.
Comissão Interna de Prevenção de Acidentes. In:
SEGURANÇA E MEDICINA DO TRABALHO. 29. ed. São
Paulo: Atlas, 1995. 489 p. (Manuais de legislação, 16).
• Departamento de química - UFPR Segurança do trabalho
e Ambiente. Acessado em 10.04.10 disponível em:
http://www.quimica.ufpr.br.
• SAVARIZ, M. C.. Manual de Produtos Perigosos -
Emergência e Transporte. 2a Edição. Sagra - DC Luzzatto -
Porto Alegre - RS - 1994.
• _____UNESP(Laboratório de Hemoglobinas e Genética
das doenças Hematológicas). Manual de Biossegurança.
Acessado em 08.04.10, disponível em http://www.cro-
rj.org.br/biosseguranca/Manual%20Biosseguranca%20pr
aticas%20corretas.pdf;