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Nutrição, Crescimento e Metabolismo Bacteriano Professora: Drª. Emanuelle Karine Frota Batista Centro Universitário UNINOVAFAPI Curso de Medicina Veterinária Disciplina: Microbiologia Aplicada à Ciências Agrárias NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS • Todas as formas de vida dividem exigências nutritivas • Necessidades de substancias químicas • Todos os organismos requerem uma fonte de energia • Quais? Crescimento Funcionamento normal NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS • Exigências nutritivas, as bactérias podem ser: • Fototróficos – utilizam a energia radiante (luz) • Bactérias autótrofas: fotossintetizantes e quimiossintetizantes • Quimiotróficos – dependem da oxidação de compostos químicos, sem necessidade de luz • Bactérias heterótrofas: quimiossintetizantes MAIORIA DAS BACTÉRIAS NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS • Grande maioria das bactérias são quimiotróficas • Litotróficas • Oxidam compostos inorgânicos • Organotróficas • Oxidam compostos orgânicos NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS • Grande maioria das bactérias são quimiotróficas • Litotróficas - AUTÓTROFAS • Oxidam compostos inorgânicos NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS • Grande maioria das bactérias são quimiotróficas • Litotróficas – AUTÓTROFAS • Simbiose de planta leguminosa com bactéria fixadora de O2 NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS • Grande maioria das bactérias são quimiotróficas • Organotróficas - HETERÓTROFAS • Oxidam compostos orgânicos para obtenção de carboidratos e energia BATERIAS PATOGÊNICAS, DE INTERESSE NAS AREAS DE SAUDE NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS • Grande maioria das bactérias são quimiotróficas • Organotróficas - HETERÓTROFAS NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS • O crescimento bacteriano exige a presença de nutrientes essenciais em concentrações ideais para as células e ambiente propício • Bactérias necessitam de uma série de exigências de natureza física, inorgânica e orgânica para seu crescimento NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS • FATORES NUTRITIVOS (in vitro = in vivo) • Substâncias que participam do metabolismo celular • Grupos • Macronutrientes - grandes qtidades • C, N, H, P, Ca, Na, Fe, Mg, K, S • Micronutrientes - pequenas qtidades • Co, Zn, Mo, Cobre, Manganês e Níquel O crescimento microbiano é definido não em termos de tamanho celular, mas como o aumento do número de células, que ocorre por divisão celular ✓ A divisão celular nas bactérias geralmente ocorre por Divisão Binária e às vezes por Brotamento CRESCIMENTO DAS BACTÉRIAS CRESCIMENTO DAS BACTÉRIAS FASES DO CRESCIMENTO BACTERIANO ➢ Fase Lag (Fase de Demora) Número de bactéria permanece constante em função do tempo Pouca ou sem divisão celular Síntese enzimática e de moléculas variadas Aumento na qtidade de ptnas, tamanho celular FASES DO CRESCIMENTO BACTERIANO ➢ Fase Logarítmica ou Exponencial Progressão Geométrica (Crescimento >> Morte) (células viáveis) Tempo de geração tempo p/ uma população dobrar de nº FASES DO CRESCIMENTO BACTERIANO ➢ Fase Estacionária Máxima Não há crescimento liquido da população (Crescimento Morte) Síntese de metabólitos secundários/ Esporulação Causas: esgotamento de nutrientes essenciais, acumulo de produtos de excreção, alteração no pH (O2, Nutrientes, pH, Produtos Tóxicos, etc ) FASES DO CRESCIMENTO BACTERIANO ➢ Fase de Declínio ou Morte Morte >> Crescimento (Formas de Involução) Fatores Necessários para o Crescimento Bacteriano FÍSICOS ✓ Temperatura ✓ pH ✓ Pressão Osmótica ✓Atmosfera Gasosa QUÍMICOS ✓ Carbono ✓ Nitrogênio ✓ Enxofre e Fósforo ✓ Oligoelementos CO2 Bactérias Autotróficas Compostos Orgânicos Bactérias Heterotróficas Fatores Químicos ✓ Carbono o Síntese de todos os compostos orgânicos necessários para a viabilidade celular Fonte de Carbono o Parte essencial dos aminoácidos ✓Nitrogênio Proteínas Fontes de Nitrogênio Fatores Químicos o Atmosfera – fixação de nitrogênio o Compostos nitrogenados (nitrito, nitrato, amônia) ✓ Enxofre ✓ Fósforo Aminoácidos: Cisteína, Cistina e Metionina Vitamina: Tiamina e Biotina Síntese de ácidos nucléicos Fosfolipídios das membranas celulares ATP Fatores Químicos ✓ Oligoelementos o Elementos traço o Elementos minerais são essenciais para atividade de algumas enzimas (cofatores) o Geralmente presentes na água o Podem ser adicionados ao meio de cultura Molibidênio fixação do nitrogênio Fatores Químicos Temperatura Fatores Físicos 0 a 18⁰ C temp. ótima (15 a 18⁰ C) 45 a 80⁰ C temp. ótima (75⁰ C) 25 a 40⁰ C temp. ótima (37⁰ C) ❖ Temperatura Ótima de Crescimento Atemperatura na qual uma sp de microrganismo cresce mais rapidamente o Micro-organismos necessitam de pH ótimo para crescimento em determinados meios de cultura o Maioria na faixa ótima de pH entre 6 e 8 o pH 7,0 (neutro): microrganismos da microbiota normal humana e patogênicos o pH 3,0 (ácido): ex : Lactobacillus o pH 8,5 - 9,5 (alcalino): ex : Vibrio Cholerae pH Fatores Físicos – Estrutura e funções das proteínas Atmosfera Gasosa Fatores Físicos o Utilização de O2 como aceptor de H pelas bactérias é variável: o Aeróbios obrigatórios o Microaerófilos o Anaeróbios facultativos o Anaeróbios aerotolerantes: podem crescer em ambiente contendo ar ou em incubadores de CO2 moderados: crescem na presença de 2 a 8% de O2 livre estritos: morrem na presença de O2 Atmosfera Gasosa Fatores Físicos Pseudomonas aeruginosa Aeróbio Obrigatório Crescimento Bacteriano São aqueles crescem na microrganismos presença de que só oxigênio por utilizarem este composto como receptor final de elétrons. Esses microrganismos são capazes de crescer em uma atmosfera padrão de 21% de oxigênio Anaeróbio Obrigatório Crescimento Bacteriano O2 Clostridium tetani Crescimento Bacteriano Tétano São aqueles microrganismos que podem ser mortos pelo oxigênio, e que não utilizam ele para suas reações de produção de energia Microaerófilo Campylobacter jejuni Crescimento Bacteriano oxigênio menor que a encontrada no São microrganismos que só crescem em atmosfera contendo concentração de ar atmosférico São aqueles microrganismos que crescem na presença do ar atmosférico, mas podem também crescer na sua ausência. Eles não requerem o oxigênio para o crescimento, embora possam utilizá-los para a produção de energia reações químicas em suas Anaeróbio Facultativo Crescimento Bacteriano Escherichia coli Osmolaridade Concentração de solutos no meio Disponibilidade de água METABOLISMO • Conjunto de reações bioquímicas realizadas por uma célula • Reações conectadas de forma que ocorra a formação de grandes moléculas a partir de moléculas pequenas • Compreende o catabolismo e anabolismo • Catabolismo: reações químicas que liberam energia a partir da degradação de substancias orgânicas • Anabolismo: reações químicas que consomem energia e permitem a síntese de precursores metabólicos, macromoléculas e estruturas celulares METABOLISMO • GLICÓLISE • Glicose – Energia contida, pode ser liberada pela glicólise • Sequência de reações • Mol. é quebrada em 2 mols. de ácido pirúvico (3C) • Acompanhada de produção de ATP e NADH (dinucleotídeo de adenina nicotinamida) METABOLISMO • FERMENTAÇÃO • Decomposição microbiana de carboidratos independente de O2 • Compostos orgânicos – doadores e receptores de H (elétrons) • Formação adicional de ATP • Fermentação alcóolica – produção de álcool (Sacaromyces cerevisiae) • Fermentação homolática – produção de ácido lático (Lactobacillus) • Fermentação acética – produção de ácido acético (Acetobacter) • Fermentação mista – produção de ácido, álcool e gás (Clostridium) • Fermentação butileno-glicólica –produção de butileno glicol (produto não ácido) (Klebsiella) Fermentação Lactobacillus e Bacillus Saccharomyces (Levedura) Propionibacterium Escherichia, Salmonella Fermentação Clostridium Streptococcus, Klebisiella, Enterobacter 2 ATP METABOLISMO• Respiração • Também chamada – Ciclo de Krebs processo oxidativo que transfere energia do ácido pirúvico para formar NADH e FADH • Energia contida nesses carregadores de e-, utilizada na formação de ATP na cadeia transportadora de e- • Alguns microrganismos anaeróbios possuem cadeia respiratória que converte a energia dos e- em ATP na ausência de O2 • (Aceptor de e-, moléculas como sulfato, nitrato ou CO2) Respiração 38 ATP REPRODUÇÃO REPRODUÇÃO BACTERIANA • O tipo mais comum é por FISSÃO BINÁRIA TRANSVERSAL • Uma única célula se divide em duas após o desenvolvimento de uma parede celular transversal • REPRODUÇÃO ASSEXUADA • Não é o único método de reprodução REPRODUÇÃO BACTERIANA • ESPORULAÇÃO • Algumas espécies podem produzir ESPOROS • Ocorre em situações de escassez de nutrientes • A célula que origina o esporo se desidrata • Ocorre formação de uma parede grossa • Redução da atividade metabólica • Todas as bactérias dos gêneros Bacillus e Clostridium REPRODUÇÃO BACTERIANA • ESPORULAÇÃO • Esporos são células altamente resistentes • As bactérias que formam esporos podem se manter por longos períodos como células vegetativas • Resistentes aos agentes físicos (calor e dessecação) e químicos (antissépticos) • Forma de sobrevivência ? REPRODUÇÃO BACTERIANA • BROTAMENTO • Algumas bactérias realizam reprodução por brotamento • Desenvolve-se um broto a partir da célula mãe • Aumento dos brotos • Separação das células • Formação de um novo indivíduo TROCA DE MATERIAL GENÉTICO • Não ocorre reprodução sexuada nas bactérias, mas pode ocorrer troca de material genético • Há 3 mecanismos distintos • Transformação • Conjugação • Transdução TROCA DE MATERIAL GENÉTICO • TRANSFORMAÇÃO • Incorporação de fragmentos de DNA livre, por outra bactéria que se rompeu • Lise celular • Liberação de seu DNA • Quebras de DNA originando centenas de fragmentos • Pequena proporção de genes podem ser transferidos para a bactéria TROCA DE MATERIAL GENÉTICO • TRANSFORMAÇÃO TROCA DE MATERIAL GENÉTICO • TRANSFORMAÇÃO • Bactérias não-encapsuladas vivas absorveram material genético das encapsuladas mortas pelo calor e passaram a produzir capsula • Capacidade de causar doença • As bactérias não encapsuladas foram transformadas em encapsuladas • Fator de transformação é o DNA TROCA DE MATERIAL GENÉTICO • CONJUGAÇÃO • Duas células bacterianas geneticamente diferentes trocam DNA através de ponte promovida por pelo sexual • Pili sexual ou fímbria TROCA DE MATERIAL GENÉTICO • CONJUGAÇÃO • Nem todos os pares são férteis • Celulas-macho contem uma pequena peça de DNA (plasmídeo) chamada Fator sexual ou fator F • São identificados como F+ • No processo de conjugação funcionam como células doadoras • Celulas-fêmea são chamadas como F- • Funcionam como receptoras TROCA DE MATERIAL GENÉTICO • CONJUGAÇÃO TROCA DE MATERIAL GENÉTICO • CONJUGAÇÃO • O plasmídio F contem entre 40 a 100 genes • Pode ocorrer autorreplicação • Bactéria F+ se adere a células F- e transfere uma copia do seu plasmidio F • Quando uma célula F- recebe o Fator F, se torna uma bactéria F+ • Fator F deixa o citoplasma e se integra no cromossomo bacteriano • Esse fator pode voltar para o citoplasma carregando alguns genes cromossômicos TROCA DE MATERIAL GENÉTICO • CONJUGAÇÃO TROCA DE MATERIAL GENÉTICO • CONJUGAÇÃO • Mecanismo que possibilita a ocorrência de recombinação genica nas populações bacterianas • Confere vantagem as células bacterianas (resistência a ATB) • Ocorre com pouca frequência nas populações bacterianas • Ocorre nos gêneros • Escherichia • Salmonella • Pseudomonas • Vibrio TROCA DE MATERIAL GENÉTICO • TRANSDUÇÃO • Transferência de DNA de uma bactéria para outra mediada por vírus (bacteriófagos) • O bacteriófago entra na célula bacteriana e seu DNA se mistura com DNA bacteriano • Há rápida replicação do DNA do vírus com o bacteriano • DNA bacteriano é encapsulado em capsídeos (invólucros de origem proteica) dos vírus, produzidos pelo DNA viral dentro da célula bacteriana • Lise celular TROCA DE MATERIAL GENÉTICO • TRANSDUÇÃO • Ao infectar outra bactéria, o vírus que leva o DNA bacteriano o transfere junto com o seu TROCA DE MATERIAL GENÉTICO • TRANSDUÇÃO QUESTÕES 1. Diferencie organismos fototróficos, quimiotróficos e heterotróficos. 2. Caracterize cada uma das fases de uma curva típica de crescimento bacteriano 3. Sobre o crescimento bacteriano, discorra sobre os fatores que influenciam nesse crescimento. 4. Classifique as bactérias de acordo com seu requisito de ambiente atmosférico. 5. De acordo com a faixa de temperatura na qual crescem, como as bactérias podem ser classificadas? 6. Caracterize os tipos de reprodução assexuadas nas bactérias. 7. Com relação a troca de material genético, diferencie conjugação bacteriana, transformação e transdução. Nutrição, Crescimento e Metabolismo Bacteriano Reprodução Professora: Drª. Emanuelle Karine Frota Batista Centro Universitário UNINOVAFAPI Curso de Medicina Veterinária Disciplina: Microbiologia Aplicada à Ciências Agrárias Slide 1: Nutrição, Crescimento e Metabolismo Bacteriano Slide 2: NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS Slide 3: NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS Slide 4: NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS Slide 5: NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS Slide 6: NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS Slide 7: NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS Slide 8: NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS Slide 9: NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS Slide 10: NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS Slide 11: NUTRIÇÃO DAS BACTÉRIAS Slide 12: CRESCIMENTO DAS BACTÉRIAS Slide 13: CRESCIMENTO DAS BACTÉRIAS Slide 14: FASES DO CRESCIMENTO BACTERIANO Slide 15: FASES DO CRESCIMENTO BACTERIANO Slide 16: FASES DO CRESCIMENTO BACTERIANO Slide 17: FASES DO CRESCIMENTO BACTERIANO Slide 18: Fatores Necessários para o Crescimento Bacteriano Slide 19: Fatores Químicos Slide 20: Nitrogênio Slide 21 Slide 22: Oligoelementos Slide 23: Fatores Físicos Slide 24: pH Slide 25: Atmosfera Gasosa Slide 26: Atmosfera Gasosa Slide 27: Aeróbio Obrigatório Slide 28: Anaeróbio Obrigatório Slide 29: Microaerófilo Slide 30: Anaeróbio Facultativo Slide 31: Osmolaridade Slide 32: METABOLISMO Slide 33 Slide 34 Slide 35: METABOLISMO Slide 36: METABOLISMO Slide 37: Fermentação Slide 38: Fermentação Slide 39: METABOLISMO Slide 40: Respiração Slide 41: reprodução Slide 42: REPRODUÇÃO BACTERIANA Slide 43: REPRODUÇÃO BACTERIANA Slide 44: REPRODUÇÃO BACTERIANA Slide 45: REPRODUÇÃO BACTERIANA Slide 46: TROCA DE MATERIAL GENÉTICO Slide 47: TROCA DE MATERIAL GENÉTICO Slide 48: TROCA DE MATERIAL GENÉTICO Slide 49: TROCA DE MATERIAL GENÉTICO Slide 50: TROCA DE MATERIAL GENÉTICO Slide 51: TROCA DE MATERIAL GENÉTICO Slide 52: TROCA DE MATERIAL GENÉTICO Slide 53: TROCA DE MATERIAL GENÉTICO Slide 54: TROCA DE MATERIAL GENÉTICO Slide 55: TROCA DE MATERIAL GENÉTICO Slide 56: TROCA DE MATERIAL GENÉTICO Slide 57: TROCA DE MATERIAL GENÉTICO Slide 58: TROCA DE MATERIAL GENÉTICO Slide 59: QUESTÕES Slide 60: Nutrição, Crescimento e Metabolismo Bacteriano Reprodução