Prévia do material em texto
Metabolismo bacteriano O termo metabolismo se refere a todas as reações químicas que ocorrem nas células vivas. Essas reações são catalisadas por enzimas e têm como objetivo a produção de novas estruturas ou de energia. As enzimas são catalisadores biológicos que diminuem a energia de ativação de uma reação, aumentando, assim, sua velocidade. Não são consumidas ou transformadas, nem afetam o equilíbrio da reação. A atividade enzimática é influenciada por temperatura, pH e concentração de substrato. Fonte de energia microbiana A energia microbiana (produção de ATP) pode ser gerada a partir de compostos químicos (quimiotrofia) da luz (fototrofia). Os organismos que obtêm energia a partir de compostos químicos podem ser classificados como quimiorganotróficos, cuja fonte de equivalentes redutores (elétrons) são compostos orgânicos, ou quimiolitotróficos, com fonte inorgânica de equivalentes redutores. Quanto à fonte de carbono, os organismos fototróficos podem ser classificados como fotoautotróficos (CO 2 como fonte) e fotoheterotróficos (compostos orgânicos como fonte). Observação: O aceptor final de elétrons dos quimiotróficos pode ser ou não o O 2 ; caso não, esse aceptor pode ser um composto orgânico ou inorgânico. Quimiorganotróficos: Sua produção de energia pode ser aeróbia (no caso de fungos e várias bactérias, como a E. coli ), anaeróbia ou por meio da fermentação. Esses organismos oxidam carboidratos como fonte primária de energia, principalmente glicose. Na fermentação , não há aceptores finais de elétrons. O ATP é produzido por fosforilação em nível de substrato (catabolismo do produto orgânico). Após a glicose ser quebrada em ácido pirúvico, na glicólise, o piruvato é convertido em um produto orgânico por meio da fermentação (sem cadeia transportadora nem ciclo do ácido cítrico). 1. Fermentação láctica: Produto final ácido láctico. Sua desvantagem é a deterioração de alimentos e sua vantagem é a produção de certos alimentos. 2. Fermentação alcoólica: Produto final CO 2 e álcool. Suas vantagens são a produção de bebidas alcoólicas (etanol) e produção de pães (CO 2 liberado é responsável pelo crescimento da massa). Na respiração aeróbica , a produção do ATP se dá por fosforilação oxidativa (força próton motiva). O substrato químico orgânico é oxidado a CO 2 pelas vias metabólicas centrais. O oxigênio é o aceptor final de elétrons. Na respiração anaeróbica , a produção do ATP também se dá por fosforilação oxidativa (força próton motiva). A oxidação do substrato químico a CO 2 também se dá pelas vias metabólicas centrais. Nesse caso, o oxigênio não é aceptor final de elétrons — os aceptores são outros compostos. Procariotos não apresentam mitocôndrias, portanto, a cadeia transportadora ocorre na membrana plasmática da célula bacteriana. Observação: Ver matéria de bioquímica. Quimiolitotróficos: Obtenção de energia a partir de compostos inorgânicos. Esses rganismos estão associados a mineração, agricultura e queima de combustíveis fósseis. 1. Bactérias nitrificantes: Utilizam doadores inorgânicos de elétrons (NH 3 ) como fonte de energia. Muito presentes no solo, na água e em locais de abundância de amônia. 2. Bactérias oxidadoras de enxofre: Compostos de enxofre reduzido como fonte de energia. Vivem em pH neutro e ácido. Apresentam grande capacidade de oxidar ferro. Presentes em esgotos, sedimentos com algas em decomposição, camadas de lodos ativados e fontes sulfurosas. Química e nutrição celular crescimento de microorganismo Macronutrientes: (grande quantidade) 1. Carbono: Hidrocarbonetos, aminoácidos, lipídeos e CO 2 . 2. Nitrogênio: Nitrato e amônia (inorgânicos), aminoácidos e bases nitrogenadas (orgânicos) 3. Oxigênio: No experimento representado ao lado, é possível observar a interação de diferentes microorganismos com o oxigênio (zona óxica) a) aeróbios b) anaeróbios c) aeróbios facultativos d) microrganismos microaerófilos e) anaeróbios aerotolerantes Micronutrientes: (quantidades traços) O ferro atua nas reações de transporte de elétrons. Micronutrientes são fatores de crescimento (vitaminas, aminoácidos, purinas e pirimidinas). Fatores físicos de crescimento 1. Temperatura: Abaixar a temperatura diminui o metabolismo microbiano da maioria dos organismos. A chamada zona de perigo engloba as temperaturas 15°C até 50°C; nessa faixa de temperatura há rápido crescimento de bactérias, que podem produzir toxinas e contaminar alimentos. Pouco acima dos 50°C o crescimento microbiano é lento e acima dos 60°C a maioria dos micróbios são destruídos 2. Pressão osmótica: A adição de sais ou outros solutos resulta no aumento da pressão osmótica, o que inibe o crescimento microbiano. Portanto, é uma prática indicada para a conservação de alimentos 3. pH : A maioria das bactérias cresce em pH próximo à neutralidade. O pH ideal para o crescimento de fungos e leveduras geralmente é menor que o ideal para o crescimento bacteriano. Biofilmes Um biofilme é um agregado de bactérias aderidas a uma superfície. Essas bactérias agregadas coordenam sua atividade metabólica (quorum sensing) de modo que todas as populações bacterianas presentes sejam beneficiadas (sintrofismo). Meios de cultura (um meio de cultura é uma s olução nutriente utilizada para promover o crescimento de microrganismos) 1. Quimicamente definidos: Composição química exata (orgânicos ou inorgânicos). 2. Complexos: Composição de produto microbiano, animais ou vegetais (caseína, extrato de carne, extrato de levedura). 3. Enriquecidos: Utilizados na cultura de organismos fastidiosos (nutricionalmente exigentes). Suplementado com adicionais nutricionais. 4. Seletivos : São adicionados compostos para inibir o crescimento de microorganismos que não o de interesse. 5. Diferenciais: Um indicador (corante) revela, por mudança de coloraçã,o se uma reação metabólica em particular ocorreu durante o crescimento. Observação I: Para o cultivo de microorganismos anaeróbicos (O 2 prejudica seu crescimento), podem ser usadas jarras de anaerobiose. Além disso, câmaras deanaerobiose são utilizadas para a manipulação desses microorganismos. Observação II: (estriamento por esgotamento) Observação III: Em líquidos, a presença do microorganismo é identificada pela turbidez. Divisão de fissão binária Na divisão bacteriana, proteínas se organizam (MnCD e MnE) para que a célula se divida em duas. O crescimento bacteriano é exponencial. O tempo de geração em bactérias é muito mais rápido que em eucariotos; em média 20 minutos para que uma célula se divida. Curva de crescimento bacteriano Quantificação 1. Contagem direta (Petroff-Hausser) 2. Turbidimetria 3. Filtração 4. Contagem de celular viáveis: 5. Diluição seriada: