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Questões - Clonagem de DNA 1. Sobre a clonagem de DNA, assinale a alternativa correta. (A) Vetores de clonagem necessitam ter sequências promotoras e sinal de poliadenilação. (B) Cromossomos artificiais de bactéria não necessitam de gene de seleção. (C) Cosmídeos são vetores circulares semelhantes a plasmídeo, empacotados em fagos. (D) O genoma de fago lambda deve ser modificado para a exclusão dos genes do ciclo lítico e lisogênico do fago e para inserção do gene de interesse durante a clonagem. (E) Cromossomos artificiais de leveduras necessitam, apenas, de sítios de clonagem e gene de seleção para serem mantidos em leveduras. 2. A clonagem de moléculas de DNA envolve a utilização de uma série de enzimas. Sonre essas enzimas e suas respectivas funções, assinale a alternativa incorreta. (A) Exonucleases podem remover nucleotídeos um a um das pontas de moléculas de DNA. (B) Endonucleases podem clivar pontes fosfodiéster internas de moléculas de DNA. (C) DNA Ligases podem unir dois fragmentos dupla fita de DNA. (D) DNA polimerase podem sintetizar uma nova molécula de DNA complementar a uma fita de DNA já existente. (E) Fosfatases alcalinas podem remover um grupamento fosfato presente na ponta 3' de uma molécula de DNA. 3. A clonagem é um mecanismo comum de propagação da espécie em plantas ou bactérias. De acordo com Webber (1903), um clone é definido como uma população de moléculas, células ou organismos que se originaram de uma única célula e que são idênticas à célula original e entre elas. Em humanos, os clones naturais são os gêmeos idênticos, que se originam da divisão de um óvulo fertilizado. A grande revolução da Dolly, que abriu caminho para possibilidade de clonagem humana, foi a demonstração, pela primeira vez, de que era possível clonar um mamífero, isto é, produzir uma cópia geneticamente idêntica a partir de uma célula somática diferenciada. Sobre os princípios básicos de clonagem e embriologia humana, é correto afirmar que (A) todas as células do nosso corpo possuem 46 cromossomos. (B) a grande novidade sobre a clonagem da ovelha Dolly foi a descoberta de que uma célula do corpo, não diferenciada, poderia ser reprogramada ao estágio inicial e voltar a ser totipotente. (C) o corpo humano possui 23 pares de cromossomos: 22 pares de cromossomos autossômicos e 1 par de cromossomos sexuais. (D) a molécula de DNA é encontrada somente no núcleo das células. (E) gêmeos univitelinos se originam da fecundação de dois óvulos. 4. A clonagem molecular é uma técnica da engenharia genética conhecida também por DNA recombinante. Essa tecnologia permite utilizar um fragmento de DNA e combiná-lo com outro, produzindo muitas cópias de diferentes combinações genéticas. A clonagem molecular pode fazer com que genes estranhos sejam expressos em bactérias e leveduras ou mesmo em outras células superiores. Com isso, é uma ferramenta que auxilia no estudo dos genes e os seus produtos e, também, proporciona a obtenção de organismos transgênicos para uso na terapia gênica. A clonagem molecular ou DNA recombinante é um método que permite fazer várias cópias idênticas (clones) de um pedaço específico de DNA. Para que isso seja possível, a técnica requer a execução de alguns procedimentos tecnológicos. Observe a figura a seguir. A figura acima mostra molécula de DNA recombinante produzida é introduzida em um organismo hospedeiro, podendo então serem replicadas. Esse processo é conhecido como transformação e tem como principal característica: (A) O uso de um marcador de antibiótico, assim uma célula hospedeira sem o vetor morre quando exposta a um determinado antibiótico, enquanto o hospedeiro com o vetor sobrevive e se multiplica, porque é resistente. (B) A união do fragmento do gene alvo ao vetor, através da DNA ligase, formando o plasmídeo recombinante contendo o gene de interesse. (C) As células com o plasmídeo recombinante serem identificadas e, assim, crescerem em grande escala, replicando o fragmento de DNA. (D) As células hospedeiras copiarem o DNA do vetor juntamente com o próprio DNA, criando, dessa maneira, múltiplas cópias do DNA inserido. 5. Considerando os princípios da clonagem molecular, assinale a opção correta. (A) As técnicas de clonagem molecular envolvem a introdução de DNA exógeno em um organismo hospedeiro. (B)Nos experimentos de clonagem molecular, são utilizadas enzimas de restrição capazes de restaurar a estrutura anelar de plasmídeos. (C) Nos experimentos de clonagem molecular, são utilizadas enzimas de restrição capazes de restaurar a estrutura anelar de plasmídeos. (D) Bactérias selvagens são aquelas que receberam o DNA recombinante, portanto possuem um genoma diferente da bactéria parental. (E) O plasmídeo é um tipo de vetor capaz de se comportar como um cromossomo de levedura. 6. A clonagem molecular ou DNA recombinante é uma técnica aplicada da biologia molecular que proporciona a produção de cópias idênticas (clones) de um fragmento específico de DNA. Como mostra a figura a seguir, a utilização dessa técnica requer a realização de determinados procedimentos que estão indicados abaixo pelos números 1 a 3. Assinale a opção que indique corretamente o procedimento no qual a molécula de DNA recombinante produzida é introduzida no hospedeiro para ser replicada e as células hospedeiras copiam o DNA do vetor juntamente com o próprio DNA, criando múltiplas cópias do DNA inserido. (A) 3/Transformação (B) 3/Expressão gênica (C) 2/Recombinação (D) 2/Seleção clonal (E) 1/Isolamento de interesse 7. Os vetores de clonagem molecular devem ser capazes de replicação em uma célula viva de modo a amplificar a informação genética que foi inserida nos mesmos. Também é importante que exista um meio de identificar e recuperar rapidamente a molécula recombinante. Além disso, vários vetores de clonagem estão atualmente em uso adequados para tamanhos diferentes de inserção de DNA ou para usos diferentes do clone. Assinale a sequência abaixo que apresenta os vetores em ordem crescente em relação ao tamanho de inserções. (A) BAC, plasmídeo, cosmídeo, YAC (B) Cosmídeo, plasmídeo, YAC, BAC (C) Plasmídeo, cosmídeo, YAC, BAC (D) YAC, cosmídeo, plasmídeo, BAC (E) Plasmídeo, cosmídeo, BAC, YAC 8. Panayiotis Zavos “quebrou” o último tabu da clonagem humana — transferiu embriões para o útero de mulheres, que os gerariam. Esse procedimento é crime em inúmeros países. Aparentemente, o médico possuía um laboratório secreto, no qual fazia seus experimentos. “Não tenho nenhuma dúvida de que uma criança clonada irá aparecer em breve. Posso não ser eu o médico que irá criá-la, mas vai acontecer”, declarou Zavos. “Se nos esforçarmos, podemos ter um bebê clonado daqui a um ano, ou dois, mas não sei se é o caso. Não sofremos pressão para entregar um bebê clonado ao mundo. Sofremos pressão para entregar um bebê clonado saudável ao mundo.” A clonagem humana é um importante assunto de reflexão no campo da bioética que, entre outras questões, dedica-se a: (A) refletir sobre as relações entre o conhecimento da vida e os valores éticos do homem. (B) legitimar o predomínio da espécie humana sobre as demais espécies animais no planeta. (C) relativizar, no caso da clonagem humana, o uso dos valores de certo e errado, de bem e mal. (D) legalizar, pelo uso das técnicas de clonagem, os processos de reprodução humana e animal. (E) fundamentar técnica e economicamente as pesquisas sobre células-tronco para uso em seres humanos. 9. A ovelha Dolly, primeiro clone animal oficialmente declarado, após adulta foi acasalada com um macho não aparentado. Desse cruzamento resultou o nascimento de um filhote com características “normais”. Este filhote: (A) é geneticamente idêntico à sua mãe, a ovelha Dolly. (B) é geneticamente igual à sua avó, mãe da ovelha Dolly. (C) não tem nenhum patrimônio genético do seu pai. (D) tem todo patrimônio genéticoherdado de seu pai. (E) tem parte do material genético de seu pai e parte de sua mãe.