Relatório de Microbiologia

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Aluna: Juliana Ferreira Bueno Rosa 
RA: 28319094 
 
Relatório das aulas práticas de Microbiologia 
 
Este relatório tem como objetivo observar o crescimento e analisar as 
estruturas bacterianas. 
Foi realizada uma citologia de pele da minha cachorrinha da raça 
poodle, a amostra coletada está identificada como "Pele (Juliana)". 
Os meios utilizados foram: Agar MacConkey, que é um meio de cultura 
seletivo e diferencial usado para o isolamento de bactérias Gram-negativas, 
especialmente enterobactérias. Ele contém sais biliares e cristal violeta, que 
inibem o crescimento de bactérias Gram-positivas. Também possui lactose e 
um indicador de pH (vermelho neutro). As bactérias que fermentam lactose 
(como Escherichia coli) produzem colônias rosadas, enquanto as que não 
fermentam (como Salmonella) produzem colônias incolores ou pálidas. E Agar 
Nutriente, um meio de cultura simples e não seletivo, usado para o crescimento 
de uma ampla variedade de micro-organismos, tanto Gram-positivos quanto 
Gram-negativos. Ele fornece nutrientes essenciais, como peptonas e extrato de 
carne, sendo adequado para o cultivo geral de bactérias não exigentes. É 
utilizado em laboratórios para manutenção de culturas bacterianas. 
O objetivo da semeadura é distribuir a amostra no meio de cultura para 
isolar e identificar micro-organismos. A incubação promove o crescimento 
desses micro-organismos em condições controladas, permitindo a observação 
de características das colônias para análise posterior. 
1. Semeadura: 
• A semeadura consiste em espalhar a amostra sobre o meio de cultura para 
distribuir os micro-organismos, permitindo o desenvolvimento de colônias 
isoladas. Esse processo facilita a identificação e diferenciação de espécies 
bacterianas. 
• Em meios seletivos como o Agar MacConkey, a semeadura é feita para isolar 
bactérias Gram-negativas, verificando a fermentação da lactose. 
• Em meios gerais como o Agar Nutriente, a semeadura visa permitir o 
crescimento de uma ampla variedade de micro-organismos, sem selecionar por 
tipos específicos. 
2. Incubação: 
• A incubação ocorre em condições controladas de temperatura (geralmente 35- 
37°C, dependendo do organismo de interesse), permitindo o crescimento dos 
micro-organismos sem interferências externas. 
• O objetivo da incubação é estimular a multiplicação bacteriana, facilitando a 
observação de características como morfologia das colônias, reações 
bioquímicas (como a fermentação de açúcares) e o número de colônias 
formadas, que pode refletir a quantidade de micro-organismos presentes na 
amostra inicial. 
• Preparação 
1-Lave as mãos 
2-Desinfete a bancada com álcool 70% que todas as placas estão devidamente 
identificadas. 
3-Certifique-se de todas as placas estão devidamente identificadas. 
4-Observe as características das colónias de E. coli em Agar MacConkey. 
5-Examine as colónias de Salmonella em Agar MacConkey, Chromoagar 
Salmonella, XLT4. 
6-Observe as colônias de Staphylococcus aureus em Agar Sangue, prestando 
atenção na presença de beta-hemólise. 
No nosso caso, ao observar o crescimento bacteriano nas placas Ágar 
MacConkey bactérias gram negativas, que temos como exemplo Pseudomonas 
spp. ou Salmonella spp, que formam colônias incolores ou amareladas. E na 
placa de Ágar nutriente como é um meio não seletivo, houve um crescimento 
mais amplo de bactérias gram-negativas, também podem crescer, com colônias 
de aparência variável, geralmente mais lisas e translúcidas. A observação 
dessas colônias pode ajudar a identificar infecções bacterianas ou 
desequilíbrios na microbiota da pele. Foram observadas poucas colônias uma 
distante da outra, as mesmas no microscópio possuíam bactérias em coloração 
rosada, onde no meio Ágar MacConkey que permitiria uma análise mais 
específica sobre o tipo de bactéria gram-negativa presente, mas infelizmente 
não obtivemos um resultado digno, pois a placa estava 
contaminada/reutilizada. No Agar Nutriente, o foco está na observação da 
morfologia geral das colônias, sendo útil para o cultivo de uma gama mais 
ampla de bactérias, mas sem as informações bioquímicas específicas que o 
Agar MacConkey proporciona. 
Portanto, observamos que no meio Agar MacConkey permite uma 
análise mais específica sobre o tipo de bactérias Gram-negativas presentes, 
enquanto o Agar Nutriente oferece um panorama mais amplo do crescimento 
bacteriano, mas sem essa diferenciação. Na análise de amostras de citologia 
de pele, a observação da morfologia das colônias bacterianas é fundamental 
para identificar patógenos. As colônias podem ter diferentes formas, bordas, 
cores, tamanhos e texturas. Bactérias comuns na pele de cães e possíveis: 
incluem Staphylococcus spp, parte da microbiota normal, mas que pode causar 
infecções (como piodermas); Streptococcus spp, associado a infecções 
secundárias; Pseudomonas aeruginosa, uma bactéria oportunista; e 
Escherichia coli, que pode contaminar feridas. Além disso, a levedura 
Malassezia pachydermatis pode causar dermatite em cães predispostos. A 
análise morfológica das colônias e a identificação de bactérias comuns na pele 
de cães permitem uma abordagem mais precisa para o diagnóstico de 
infecções cutâneas. A correlação dessas observações com sinais clínicos, 
como prurido, lesões ou secreções, ajuda a direcionar o tratamento adequado, 
que pode incluir antibióticos tópicos ou sistêmicos, antifúngicos, e cuidados 
com a higiene da pele. 
O uso de diferentes meios de cultura é crucial para o isolamento e 
identificação de bactérias, pois permite: 
1. Isolamento seletivo de grupos específicos, como bactérias Gram-negativas 
(Agar MacConkey). 
2. Identificação diferencial de características bacterianas, como fermentação de 
lactose ou hemólise. 
3. Crescimento de bactérias exigentes, que requerem nutrientes específicos. 
4. Diferenciação entre patógenos e comensais, facilitando diagnósticos mais 
precisos. 
5. Velocidade no diagnóstico, já que o uso de meios apropriados pode fornecer 
pistas rápidas sobre o tipo de bactéria envolvida. 
Essa diversidade de meios melhora a precisão e a eficiência na 
identificação bacteriana, auxiliando no tratamento adequado de infecções. 
Objetivo da Coloração de Gram: 
A coloração de Gram visa classificar bactérias em Gram-positivas 
(roxas) e Gramnegativas (rosadas) com base na estrutura da parede celular. 
Isso auxilia na identificação rápida das bactérias e na escolha inicial de 
antibióticos. 
Relevância da Coloração de Gram: 
• Diferenciação rápida entre tipos de bactérias, orientando o tratamento. 
• Informação sobre sensibilidade a antibióticos, ajudando na seleção de 
medicamentos eficazes. Objetivo do Antibiograma: O antibiograma determina a 
sensibilidade ou resistência de bactérias a diferentes antibióticos, identificando 
quais tratamentos são eficazes. 
Relevância do Antibiograma: 
• Permite a escolha direcionada de antibióticos com base na eficácia contra a 
bactéria isolada. • Ajuda a combater a resistência bacteriana, garantindo que 
tratamentos sejam apropriados e eficazes. Essa combinação de técnicas é 
fundamental para um diagnóstico preciso e tratamento eficaz de infecções 
bacterianas na microbiologia. 
 
Coloração de gram: 
a) Prepare esfregaços bactérianos em lâminas de vidro, utilizando colônias 
isoladas de E. coli, Salmonella, e S. aureus. 
b) Realize a coloração de Gram: 
c) Fixe a amostra na lâmina passando-a brevemente sobre a chama do bico de 
Bunsen. 
d) Aplique Cristal Violeta e deixe agir por 1 minuto. 
e) Enxágue com água corrente. 
f) Aplique Lugol e deixe agir por 1 minuto. 
g) Enxágue com água corrente. 
h) Descolora com Alcool-acetona por 10-15 segundos 
i) Enxágue imediatamente com água corrente. Aplique Fucsina e deixe agir por 
1 minuto. 
j) Enxágue com água corrente e sequea lâmina. 
Observe ao microscópio a coloração e a morfologia das células bacterianas: 
k) Gram-positivas: células coradas em roxo. 
l) Gram-negativas: células coradas em rosa. 
Antibiograma: 
a. Selecione uma colônia isolada de cada amostra (E. coli, Salmonella, S. 
aureus). 
b. Usando um swab estéril, inocule uniformemente a placa de Ágar Mueller-
Hinton, espelhando bem em várias direções 
Aplique os discos de antibióticos na superfície da placa: 
c. Incube a placa a 37°C por 18-24 horas. 
d. Após a incubação, observe os halos de inibição ao redor dos discos. 
 Observação dos Resultados do Antibiograma: 
e. Use uma régua para medir o diâmetro dos halos de inibição 
f. Compare os resultados com tabelas padrão para determinar a sensibilidade 
ou resistência das bactérias aos antibióticos testados. 
Importância da Observação Morfológica para Identificação Bacteriana: 
• A observação morfológica permite identificar características como forma, 
tamanho e arranjo das bactérias (ex: cocos, bacilos, espirilos), que são 
fundamentais para a classificação e identificação de espécies. 
• A coloração de Gram, que revela a estrutura da parede celular (Gram-
positivas ou Gram-negativas), ajuda a direcionar o tratamento inicial e fornece 
informações sobre o perfil dos microrganismos. 
Importância da Realização de Antibiogramas para Escolha do Tratamento: 
• O antibiograma determina a sensibilidade ou resistência das bactérias a 
diferentes antibióticos, orientando a escolha do medicamento mais eficaz para 
o tratamento da infecção. • Essa prática é crucial para evitar o uso de 
antibióticos inadequados, reduzindo a resistência bacteriana e melhorando os 
resultados clínicos, uma vez que permite tratamentos direcionados e mais 
eficazes.