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Instituto Metropolitato de Ensino – IME Centro Universitário Fametro APOSTILA DE TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS PARASITOLÓGICAS 1. TÉCNICA DIRETA COM SALINA E LUGOL Objetivo Permitir a observação de protozoários e helmintos presentes nas fezes por meio da preparação direta de esfregaços utilizando soluções de salina e Lugol. Materiais Necessários · Amostra de fezes frescas · Lâminas e lamínulas · Solução salina 0,85% · Solução de Lugol · Pipeta Pasteur · Palito de madeira · Microscópio Procedimento 1. Em uma lâmina limpa, colocar uma gota de solução salina. 2. Com um bastão, adicionar uma pequena quantidade de fezes e misturar bem. 3. Cobrir com lamínula e observar ao microscópio inicialmente em objetiva de 10x e depois em 40x. 4. Repetir o procedimento utilizando solução de Lugol em vez de salina para evidenciar estruturas internas de protozoários e ovos de helmintos. Interpretação dos Resultados · Solução salina: Permite observar trofozoítos de protozoários em movimento, larvas de helmintos e ovos. · Solução de Lugol: Torna mais fácil visualizar cistos de protozoários e ovos de helmintos, pois cora o glicogênio e destaca as estruturas internas. 2. TÉCNICA DE HOFFMAN (SEDIMENTAÇÃO ESPONTÂNEA) Objetivo Concentrar ovos e larvas de helmintos pesados que sedimentam naturalmente na amostra de fezes. Materiais Necessários · Amostra de fezes frescas · Copo de sedimentação ou tubo cônico · Gaze ou peneira fina · Palito de madeira · Pipeta Pasteur · Lâminas e lamínulas · Microscópio · Água destilada · lugol Procedimento 1. Diluir as fezes em água destilada no próprio coletor. 2. Misturar bem e filtrar através de gaze ou peneira fina para remover partículas grandes. 3. Transferir o filtrado para um tubo cônico ou copo de sedimentação. 4. Deixar em repouso por pelo menos 2 horas para sedimentação dos ovos e larvas. 5. Descartar cuidadosamente o sobrenadante e coletar o sedimento do fundo com uma pipeta Pasteur. 6. Transferir para uma lâmina, adicionar uma gota de lugol e cobrir com lamínula. 7. Observar ao microscópio inicialmente em objetiva de 10x e depois em 40x. Interpretação dos Resultados · Ovos pesados, como os de Trichuris trichiura, Schistosoma mansoni, Taenia sp. e ovos inférteis de Ascaris lumbricoides serão recuperados. · Larvas de Strongyloides stercoralis também podem ser observadas. 3. TÉCNICA DE WILLIS (FLUTUAÇÃO) Objetivo Permitir a recuperação de ovos leves de helmintos que flutuam em solução de alta densidade. Materiais Necessários · Amostra de fezes frescas · Solução de cloreto de sódio saturada (40%) · Tubo de ensaio ou copo cônico · Palito de madeira · Lâmina e lamínula · Microscópio · lugol Procedimento 1. Misturar 2 g de fezes em 5 mL de solução saturada de cloreto de sódio em um tubo cônico (falcon de 10mL). 2. Homogeneizar bem a amostra com palito de madeira 3. Completar o tubo com a solução até formar um menisco convexo na borda. 4. Colocar delicadamente uma lâmina sobre o menisco e deixar por 5 a 10 minutos. 5. Retirar a lâmina, adicionar lugol e cobrir com lamínula. 6. Observar ao microscópio inicialmente em objetiva de 10x e depois em 40x. Interpretação dos Resultados · Recupera ovos leves, como Ascaris lumbricoides (ovos férteis), Ancylostoma duodenale, Necator americanus, Toxocara sp. e Enterobius vermicularis. 4. PREPARO DAS SOLUÇÕES 4.1 Solução Salina 0,85% · Dissolver 8,5 g de cloreto de sódio (NaCl) em 1 litro de água destilada. · Armazenar em frasco limpo e identificado. 4.2 Solução de Cloreto de Sódio Saturada (Willis) · Aquecer 100 mL de água destilada. · Dissolver 40-50 g de NaCl até saturar completamente. · Filtrar e armazenar em frasco fechado. 5. REGISTRO DE AMOSTRAS POSITIVAS Número da Amostra Parasita Identificado Observação 1 2 3 4 5 Observação: Espaço para anotação dos parasitas identificados nas amostras analisadas durante a prática. Prof. Naira Sulany Parasitologia Clínica image1.jpeg