2 aula-pratica - Metabolismo do carboidratos

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UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ
DEPARTAMENTO DE ANÁLISES CLÍNICAS E TOXICOLÓGICAS
FACULDADE DE FARMÁCIA, ODONTOLOGIA E ENFERMAGEM
DISCIPLINA DE BIOQUÍMICA CLÍNICA II
Maria Goretti Rodrigues de Queiroz
Thamires Maria Fontenele Morais
2ª Aula Prática
Avaliação laboratorial do 
metabolismo dos carboidratos
Thamires Maria Fontenele Morais
Fortaleza, Ce
2015
Classes Clínicas
Diabetes 
Mellitus
Tipo 1
Diabetes 
Mellitus
Tipo 2Tipo 1 Tipo 2
Diabetes 
Mellitus
Gestacional
Tipos 
específicos 
de Diabetes 
Mellitus
TESTES 
LABORATORIAS
Hb-glicada
MicroalbuminúriaFrutosamina
TESTES 
LABORATORIAS
Peptídeo C e AC
Glicose
TOTG
Determinação da glicemia
�Tempo de jejum: 8-10 h
�Tipo de amostra: soro (tampa
amarela/vermelha) ou plasma (fluoreto)
�Recomendações: separar soro e plasma em�Recomendações: separar soro e plasma em
cerca de meia hora após a coleta.
�MÉTODO: Enzimático
�Hexoquinase = método de referência
�Glicose-oxidase
�Glicose-desidrogenase
Método hexoquinase
Método glicose oxidase
Procedimento
B
r
a
n
P
A
D
R
T
E
S
n
c
o
R
Ã
O
S
T
E
1 mL reagente
Procedimento
B
r
a
n
P
A
D
R
T
E
S Colocar no banho-
n
c
o
R
Ã
O
S
T
E
10 μL padrão 10 μL amostra
Colocar no banho-
maria (37°C) por 10 
min e realizar a 
leitura
Determinação da microalbuminúria
�Tipo de amostra: urina em intervalo 
especificado (24 h)
�Importância: monitoramento do DM e
detecção precoce da nefropatia diabéticadetecção precoce da nefropatia diabética
�Recomendações: antes de realizar a
determinação centrifugar a urina
�MÉTODO: Imunoturbidimétrico
Determinação da microalbuminúria
Determinação da microalbuminúria
�Resultado: 10 mg/L
�Paciente urinou: 1,8L/24h
20 mg----1L
X -----------1,8L => 36 mg/24hX -----------1,8L => 36 mg/24h
Valor de referência
Normal < 30 mg/24h
Microalbuminúria 30-300 mg/24h
Proteinúria > 300 mg/24h
Hemoglobina glicada
�Tipo de amostra: sangue total (EDTA)
� Importância: monitoramento dos níveis 
glicêmicos médios dos últimos 3 meses 
�Métodos:�Métodos:
�Cromatografia
�Troca iônica
�Afinidade
�HPLC
�Eletroforese
� Imunoturbidimetria
Cromatografia de troca iônica
COMPOSIÇÃO DO KIT
�Hemolisante = cianeto de potássio
�Tubo 1 (resina ligante com carga negativa)
�Tubo 2 (resina não ligante) 
1ª ETAPA
Hemolisar o 
sangue total
2ª ETAPA
Hemolisado
+Tubo 1
3ª ETAPA
Hemolisado
+Tubo 2
3º ETAPA
Centrifugar
Cromatografia de troca iônica
4ª ETAPA
Sobrenadante 
5ª ETAPA
Sobrenadante 
Após centrifugação Hb não glicada carga +
Sobrenadante 
Tubo 1 = HbA1C
Sobrenadante 
Tubo 2 = Hb total
Determinar a absorbância em 415 nm
Abs Hb total------100%
Abs HbA1c-------- X%
Teste oral de tolerância à lactose
1ª COLETA
Glicemia de 
jejum
SOBRECARGA DE LACTOSE
-50 g
+3 COLETAS
�Glicemia 30 min
�Glicemia 60 min
�Glicemia 90 minjejum -50 g �Glicemia 90 min
Teste oral de tolerância à lactose
GalactoseGlicoseLactose Lactase
�Pacientes normais: valores devem ser maiores que 20 mg/dL 
em relação à glicemia de jejum em qualquer amostra.
�Pacientes com intolerância à lactose: valores da glicose 
permanecem praticamente iguais ao de jejum.
Resultados amostras
• Amostra 1= 141 mg/dL
• Amostra 2 = 66 mg/dL
• Amostra 3 = 84 mg/dL