Staphylococcus Aureus

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Características característica de resistência que é um microorganismo que vai cresce tento no pH ácido como no estar presente mas nem sempre pH alcalino vai causar dano as pessoas resistem a alimentos que tem pouca anaeróbica facultativa atividade de água (Aa limitante: 0,86) cresce na ausência e na presença característica de resistência que são do oxigênio resistentes a altas concentrações de - mecanismo de resistência sal no alimento - tem crescimento em embalagem vão resistir a uma concentração permeável e impermeável alcalina de até 20% microoganismos mesófilos temperatura ótima de crescimento é 35°C (temperatura Contagem ambiente) - consegue se multiplicar a partir plaqueamento em superfície de 7°C até 47,8°C identificação e higienização com as células bacterianas do álcool 70% Staphylococcus são facilmente diluição e homogeinização destruídas pelo aquecimento, meio de cultura: Baird-Parker porém elas são produtoras de incubação a toxinas que são termo preparar as diluições a partir das resistentes unidades analíticas e semear as toxinas não são destruídas utilizando a técnica o plaqueamento classificada como tipo em superfície e utilizar o meio ágar intoxicação baird-parker - vai provocar a doença pela telurito de potássio, gema de ovo, ingestão da toxina pré formada glicina e piruvato de sódio nos alimentos telurito -> telureto -> coloração escura começam a produzir a toxina na - gema de ovo -> halo claro temperatura de 10°C até 46°C UFC escuras, brilhantes com halo está relacionado aos surtos de claro ao redor contaminação pela manipulação do alimento por estar presente na pele, orofaringe, utensílios o período de incubação Staphylococcus é de 30min, após a ingestão da dose infectantena composição do ágar tem 25 1 mL 1 mL diluição diluição diluição gema de ovo, substrato do 225 mL diluente 0.1 mL Staphylococcus, além do 0.1 mL telurito de potássio Baird Baird Baird Parker Parker Parker no telurito de potássio tem2 35-37°C 35-37°C substâncias inbidores de 48 horas 48 horas crescimento: glicina e piruvato de sódio UFC negra. halo claro semear das diluições de 3 5 colônias típicas superfície 0,1ml e encuar as Caldo BHI placas 35-37°C/48h 35 37°C 24 horas se durante a encubação o Provas bioquímicas microorganismo tiver utilizado o telurito como substrato, ele reduz o telurito de potássio em vão se basear a pesquisa de enzimas e toxinas relacionadas ao telureto com essa redução tem a microorganismo liberação do ferro e deixa a precisa reestabelecer o potencial de colônia preta multiplicação da bactéria para fazer as - se tiver o uso da gema de ovo provas durante a encubação vai acarretar semper usar o meio de enriquecimento a formação de um halo claro ao que não seleciona nada, apenas fornece substratos redor da colônia preta utilizar o Caldo BHI e o ágar nutriente como meio de enriquecimento Provas Bioquímicas com auxílio da Alça de Platina, raspar umas 5 colônias que serão semeadas e 3 5 UFC específicas encubadas a 35-37°C/24h Caldo BHI (incubação ao retirar da estufa, o caldo fica turvo, e vai ser usado pra fazer todas as vão confirmar o gênero e a bioquímicas espécieProvas para Confirmação do 2. Prova do Manitol Gênero substrato utilizado pelo Staphylococcus mas não pelo Bacillus 1. Prova da Catalase é possível diferenciar pois tem uma verificar se a bactéria produz a bactéria que se multiplica no manitol enzima catalase e outra não diferenciar o Staphylococcus do a utilização do manitol como Streptococcus substrato gera a formação de utilizar o meio de cultura Ágar compostos ácidos que acidificam Nutriente semeado com o o pH do meio crescimento que teve no Caldo BHI meio de cultura: Ágar Manitol encubar a 35-37°C/48h - tem na composição um indicador pingar peróxido de hidrogênio na de pH chamado Azul de Bromotimol superfície do meio - muda a cor do meio de cultura se tiver a produção da catalase vai o caldo BHI vai ser semeado na ferventar e formar várias bolinhas na superfície do ágar manitol e superfície catalase positiva encubado a 35-37°C/48h pode ser Staphylococcus ou ao retirar vai observar a coloração Bacillus do meio se ao pingar o peróxido de se a bactéria tiver utilizado o hidrogênio não tiver nenhuma manitol como substrato o meio de mudança cultura ficará amarelado sem fervenção do meio de cultura - - uso dos compostos ácidos - manitol catalase negativa positivo no laudo não escreve que é se continuar na cor avermelhada Streptococcus pois não foi pedido ou se continuar na cor origninal do meio manitol negativo o Staphylococcus usa o manitol então o resultado esperado é positivo confirma que é uma colônia de Staphylococcus mas não se sabe a espécie SALGADOProvas para Identificação se o semeado continou liquefeito após o tempo em geladeira e o das Espécies controle ficou normal teve produção da gelatinase 1. Prova da Gelatinase gelatinase positiva observa se o Staphylococcus é se os dois continuarem liquefeitos, produtor ou não da gelatinase o de controle está contaminado se ele for produtor da o meio de cultura teve gelatinase, vai fazer com que o contaminação e repete o teste meio fique liquefeito/destruído para ser o Staphylococcus aureus e perde a textura original o resultado esperado é positivo na meio de cultura: Gelatina prova da gelatinase Nutritiva sempre vai trabalhar com 2 tubos 2. Prova da Coagulase do meio: um será o tubo controle para observar se aquele (apenas gelantina nutritiva) e outro microorganismo produz a o tubo semeado (semeado com coagulase levando a formação de Caldo BHI) coágulos no meio de cultura pois não é possível autoclavar o tembém utiliza o meio de cultura meio para que seja estéril que não permite a autoclavação a encubar a 35-37°C/24h base de plasma sanguíneo ao retirar observa meio liquefeito não permite a autoclavee nem a ainda existe a dúvida se a gelatina nutritiva liquefação aconteceu pela trabalhar com 2 tubos do meio: um temperatura alta da estufa ou pela será o tubo controle (plasma produção da enzima gelatinase sanguíneo ovino) e outro o tubo colocar na geladeira por 20min semeado (plasma semeado com para que a temperatura volte ao Caldo BHI) normal colocar os dois tubos em banho avaliar o resultado para ter maria durante 18h a uma certeza que a liquefação foi temperatura em torno de 36°C feita pela gelatinase ir observando se teve a formação do tem 3 coágulo no meio de cultura, se tiver semeado: normal/liquefeito/liquefeito pode tirar controle: normal/normal/liquefeito para ser coagulase negativa tem (-) (+) (contaminação) que esperar 18h, os coágulos se os tubos voltarem a textura começam a aparecer depois de normal após a geladeira aproximadamente 6 horas em banho não é o aureus gelatinase maria negativacomparar os resultados dos dois o aquecimento do Caldo BHI é para tubos destruir a DNAse se ela estiver semeado: coágulos/normal/coágulos presente controle: normal/normal/coágulos - é destrupida mais facilmente pelo (+) (-) (contaminação) aquecimento do que a termonuclease se o tubo semeado tiver a encubar a 35-37°C/48h presença de coágulos e no tubo ao retirar observar se teve o de controle estiver sem coágulos aparecimento de halos ao redor do - coagulase positiva buraco, tendo seu tamanho se nenhum dos dois tubos aumentado apresentarem coágulos - coagulase negativa se tanto o controle como o semeado apresentarem coágulos teve contaminação e precisa repetir a análise 3. Prova da DNAse baseada na pesquisa de 2 toxinas que são produzidas pelo negativo positivo Staphylococcus aureus a termonuclease e a DNAse são se tem a formação do halo feitas ao mesmo tempo pois usa aumentando os buracos sabe que o mesmo meio de cultura tem a presença daquela toxina - trabalha com duas Placas de serve para as duas placas Petrus o resultado esperado para ser o meio de cultura: Ágar Azul de Staphylococcus aureus é positivo Toluidina - o mesmo meio para os dois usar um bastão estéril para fazer Prova da Gelatinase buracos no meio de cultura das duas placas - na placa da DNAse vai pingar o POS NEG Caldo BHI nos 4 buracos feitos - a placa termonuclease terá que ser aquecido em banho maria antes de pingar Caldo BHI - pingar nos buracos da placa aquecida