Regulação gênica pós-transcricional - miRNAs

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Regulação gênica pós-transcricional em eucariotos: 
microRNAs 
 
Prof. Dr. Tiago Campos Pereira 
tiagocampospereira@ffclrp.usp.br 
3602 3818 – sala 13, bloco 14 
 
5920508 - Genética I I 2014 
- Biogênese 
- Características biológicas 
- Mecanismos de ação de miRNAs 
 
 
AGENDA 
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Nota
regulacao genica pos transcricional: a modificacao dos transcritos dos eucaiotos antes da traducao inclu a remocao de introns, o exato encadeamento dos exons remanescxentes e a adicao de CAP a extremidade 5´do mRNA e a adicao de cauda poli A na extremidade 3´. depois o RNAm é transportado para o citoplasma onde é traduzido e degradado. a velocidade da traducao, estabilidade e ativ dos produtos proteicos pode ser regulada.
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Nota
regulacao pos trancricional em eucariotos - encadeamento alternativonull- estabilidade do mRNAnull-traducaonull-estabilidade proteicanull-silenciamento do RNA
intron 
 UTR = não-traduzidos (untranslated): sinalizam para maquinaria de tradução e 
regulação pós-transcricional 
ATG = metionina Stop codon 
exons 
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Nota
o encadeamento alternativo pode gerar diferentes formas de mRNAnull a partir de mol identicas de pre mRNA. a expressao de um gene pode originar varias prot com funcoes simlares ou diferentes. essas mudancas podem influenciar na capacidade de ligacao com o receptor ou localizacao na cel. o numero de prot que um organismo pode produzir, proteoma, nao é igual ao numero de genes do genoma, podendo exceder estes em uma ordem de magnitude.
Biogênese 
LAI EC. 2003. microRNAs: Runts of the Genome Assert Themselves 
mature 
primary 
precursor 
~70nt 
Helicase 
Drosha = RNase III 
 
DGCR8 e TRBP = 
ligantes de dsRNA 
 
RISC = RNA-induced 
Silencing Complex 
 
Complexo RNP (miRNP) 
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Nota
Características biológicas 
stem 
loop 
hairpin 
(fold-back) 
miRNA 
mRNA 
5,8 S rRNA 
tRNA 
 
SEMPERE LF et al. 2003. Temporal regulation of 
microRNA expression in Drosophila melanogaster 
mediated by hormonal signals and Broad-Complex 
gene activity. 
mir-319: cliva o gene TPC4 (controle 
do desenvolvimento foliar) 
Mutante A. thaliana jaw-D: 
- folhas e frutos enrugados 
- época de floração atrasada 
- pétalas esverdeadas 
 
Fenótipo causado pela super-expressão de miR-319 
Mecanismos de ação 
COOK HA et al. 2004. The Drosophila SDE3 homolog armitage is required 
for oskar mRNA silencing and embryonic axis specification. 
LAI EC. 2003. microRNAs: Runts of the Genome Assert Themselves 
Deadenilação 
http://www.phar.nagoya-cu.ac.jp/english/re_13.html 
5´ 
5´ 
5´ 
5´ 
poliA poliA 
 
RNAi e microRNA 
http://www.youtube.com/watch?v=cK-OGB1_ELE 
 
miRNA 
http://www.youtube.com/watch?v=CC2oHLhrCnU 
 
RNAi pirate 
http://www.youtube.com/watch?v=H5udFjWDM3E