Sintese proteica2 (2)

Esta é uma pré-visualização de arquivo. Entre para ver o arquivo original

*
*
Síntese de Protéinas
*
RNAs com 60 a 95 nt.;
Estrutura secundária em forma de folha de trevo;
Contendo quatro braços:
Formados por pareamento entre seqüências internas (hastes) intercaladas por regiões não pareadas (alças);
Estrutura dos RNAt
*
Estrutura secundária do RNAt
*
Haste de 7 pb formado pelo pareamento das extremindades 5’e 3’do RNAt;
Tem região 3’ de seqüência fita simples conservada (CCA), com 3’-OH livre;
O aa. se liga ao OH livre 
Braço Aceptor
*
Estrutura secundária do RNAt
*
Braço Aceptor
*
Braço TC:
Haste de 5 pb;
Possui alça contendo a base não usual pseudouridina ();
Braço D:
Haste de 3-4 bp;
Alça contendo a base não usual diidrouridina (D).
*
Estrutura secundária do RNAt
*
B
Braço do anticódon:
Haste de 5 pb;
Alça contendo a trinca do anticódon, que especifica o aa. deste RNAt e é complementar ao códon no RNAm;
Braço variável:
Tamanho e forma variável entre diferentes RNAt.
*
Estrutura secundária do RNAt
*
B
Estrutura terciária do RNAt
 Em forma de L;
 
 Duas hélices dupla formando ângulos específicos:
 Braços D e anticódon;
 Braços aceptor e T C;
*
Aminoacil-RNAt Sintetase
Reconhecem o RNAt com determinado anticodon;
Ligam o aa. correto a este RNAt;
Geralmente são específicas para cada aa.;
Requerem a ativação prévia do aa. por ATP;
*
Aminoacil-RNAt Sintetase
*
Estrutura dos Ribossomos
Organelas responsáveis pela síntese de proteínas;
Composto por RNAr + proteínas;
Possuem duas subunidades (30S e 50S - procariotos; 40S e 60S - eucariotos);
*
Estrutura dos Ribossomos
 3 sítios ativos:
 Sítio A;
 Sítio P;
 Sítio E;
 
 Regiões de ligação de fatores envolvidos na tradução (IF, EF-Tu, EF-G);
*
Pareamento entre RNAr e RNAm
Para iniciar a síntese é necessário a ligação do RNAm ao ribossomo;
No RNAm há uma seq. conservada de 35-45 que se liga ao ribossomo:
Contem o codon de iniciação (AUG);
Tem seq. parcialmente complementar a região 3’do RNAr 16S (RBS ou Shine-Dalgarno); 
*
Pareamento entre RNAr e RNAm
*
Pareamento entre RNAr e RNAm
Procariotos
*
Eucariotos
*
Códon de iniciação e RNAt iniciador
O códon de iniciação AUG é reconhecido pelo RNAt iniciador;
RNAt iniciador
Carrega uma metionina contendo grupo formil ligado ao seu radical;
Somente ele é capaz de se ligar ao sítio P parcial do ribossomo;
Se liga ao fator de iniciação IF2 para formar o complexo de iniciação.
*
Etapas na síntese de proteínas
Iniciação
Alongamento e translocação
Terminação
*
Iniciação
Ligação da subunidade menor do ribossomo (30S) no sítio RBS do RNAm formando o complexo de iniciação:
Requer que as subunidades do ribossomo estejam separadas
Necessita proteínas auxiliares – Fatores de iniciação; 
Posiciona o códon de iniciação do RNAm no sítio P do ribossomo.
*
Fatores de Iniciação
IF3  auxilia na ligação do RNAm a subunidade
  impede a ligação de 30S e 50S;
IF2  liga-se ao RNAt iniciador e o apresenta ao 
 complexo de iniciação;
IF1  estabilização do complexo de iniciação;
*
Formação do Complexo de Iniciação
*
Formação do ribossomo completo
 Liberação de IF1, IF2 e IF3;
 Ligação da subunidade maior
 (70S)
*
Alongamento e Translocação
Após a formação do ribossomo completo o alongamento da cadeia de aa. é iniciado;
Um RNAt carregado se liga ao sítio A;
A peptidil-transferase transfere o aa do RNAt iniciador para o RNAt no sítio A formando uma ligação peptídica;
*
Alongamento e Translocação
*
Alongamento e Translocação
O Fator de alongamento EF-Tu é necessários para a apresentação do RNAt com o aa. ao sítio A;
EF-Tu se liga ao RNAt carregado e o direciona ao sítio A pareando o anticódon com o códon do RNAm;
Após a ligação o EF-Tu é liberado com consumo de GTP;
O EF-Ts é necessário para regenerar a forma ativa do EF-Tu.
*
Alongamento e Translocação
*
Alongamento e Translocação
Após a formação da ligação peptídica o ribossomo se move 3 nt na fita:
O tRNA não carregado é liberado do sítio A;
O peptidil-RNAt move-se para do sítio A para o P;
Uma nova trinca é exposta no sítio A
*
Alongamento e Translocação
*
Terminação
Aparecimento no sítio A do códon de terminação (UAG, UAA e UGA);
Que é reconhecido por fatores de terminação (RF1, RF2 e RF3);
Ocorre então a liberação do peptídeo do RNAt, e dissociação do complexo ribossômico.
*
Terminação