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Técnica histológica2

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TÉCNICA HISTOLÓGICA
TÉCNICA HISTOLÓGICA
1. Fixação em fixador simples ou mistura fixadora
Preserva a morfologia e a composição dos tecidos
Duração: cerca de 12 horas dependendo do fixador e do tamanho da peça
TÉCNICA HISTOLÓGICA
2. Desidratação em álcool etílico de concentrações crescentes (70 a 100%)
Remover a água dos tecidos
6 a 24 horas, dependendo do tamanho da peça
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3.Clareamento ou diafanização em benzol, xilol ou toluol, solventes do álcool e parafina
Embeber a peça em substância miscível em parafina
1 a 6 horas, dependendo do tamanho da peça
TÉCNICA HISTOLÓGICA
4. Impregnação pela parafina fundida geralmente realizada em estufa a 600C
A parafina penetra nos espaços tornando o corte mais fácil
30 minutos a 6 horas, dependendo do tamanho da peça
TÉCNICA HISTOLÓGICA
5. Inclusão a peça é colocada num molde retangular com parafina fundida
Obtenção do bloco de parafina de forma regular, para ser cortado no micrótomo 
Até o endurecimento em temperatura ambiente
TÉCNICA HISTOLÓGICA
6. Microtomia 
Cortes com 5m de espessura em média no micrótomo
TÉCNICA HISTOLÓGICA
6. Microtomia 
Cortes com 5m de espessura em média no micrótomo
TÉCNICA HISTOLÓGICA
7. Montagem em lâmina
Cortes postos em banho-maria para distensão e “pescados”com lâminas de vidro e secos em estufa
 
TÉCNICA HISTOLÓGICA
7. Montagem em lâmina
Cortes postos em banho-maria para distensão e “pescados”com lâminas de vidro e secos em estufa
 
TÉCNICA HISTOLÓGICA
Os corantes podem ser:
Ácidos: coram formações básicas (citoplasma), ex: eosina, fucsina ácida, orange G
Básicos: coram estruturas ácidas (núcleo), ex: azul de toluidina, azul de metileno, hemalúmen
Neutros: formados pela associação de um corante básico com um ácido. 
Ou:
Simples (azul de metileno)
Duplos (HE) 
Múltiplos (Papanicolau).
 
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Etapas da coloração:
 
Desparafinização e hidratação: as lâminas permanecem 24 horas em estufa a 560C para retirar a parafina. O resíduo é retirado com banhos sucessivos de xilol (2), álcool absoluto, 95%, 70%, água de torneira e água destilada.
Coloração: Hematoxilina-eosina
Montagem: com glicerina, goma arábica, gelatina ou resinas naturais (bálsamo do Canadá, óleo de cedro), semi-sintéticas ou sintéticas (lamínula)
TÉCNICA HISTOLÓGICA
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