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TÉCNICA HISTOLÓGICA TÉCNICA HISTOLÓGICA 1. Fixação em fixador simples ou mistura fixadora Preserva a morfologia e a composição dos tecidos Duração: cerca de 12 horas dependendo do fixador e do tamanho da peça TÉCNICA HISTOLÓGICA 2. Desidratação em álcool etílico de concentrações crescentes (70 a 100%) Remover a água dos tecidos 6 a 24 horas, dependendo do tamanho da peça TÉCNICA HISTOLÓGICA 3.Clareamento ou diafanização em benzol, xilol ou toluol, solventes do álcool e parafina Embeber a peça em substância miscível em parafina 1 a 6 horas, dependendo do tamanho da peça TÉCNICA HISTOLÓGICA 4. Impregnação pela parafina fundida geralmente realizada em estufa a 600C A parafina penetra nos espaços tornando o corte mais fácil 30 minutos a 6 horas, dependendo do tamanho da peça TÉCNICA HISTOLÓGICA 5. Inclusão a peça é colocada num molde retangular com parafina fundida Obtenção do bloco de parafina de forma regular, para ser cortado no micrótomo Até o endurecimento em temperatura ambiente TÉCNICA HISTOLÓGICA 6. Microtomia Cortes com 5m de espessura em média no micrótomo TÉCNICA HISTOLÓGICA 6. Microtomia Cortes com 5m de espessura em média no micrótomo TÉCNICA HISTOLÓGICA 7. Montagem em lâmina Cortes postos em banho-maria para distensão e “pescados”com lâminas de vidro e secos em estufa TÉCNICA HISTOLÓGICA 7. Montagem em lâmina Cortes postos em banho-maria para distensão e “pescados”com lâminas de vidro e secos em estufa TÉCNICA HISTOLÓGICA Os corantes podem ser: Ácidos: coram formações básicas (citoplasma), ex: eosina, fucsina ácida, orange G Básicos: coram estruturas ácidas (núcleo), ex: azul de toluidina, azul de metileno, hemalúmen Neutros: formados pela associação de um corante básico com um ácido. Ou: Simples (azul de metileno) Duplos (HE) Múltiplos (Papanicolau). TÉCNICA HISTOLÓGICA Etapas da coloração: Desparafinização e hidratação: as lâminas permanecem 24 horas em estufa a 560C para retirar a parafina. O resíduo é retirado com banhos sucessivos de xilol (2), álcool absoluto, 95%, 70%, água de torneira e água destilada. Coloração: Hematoxilina-eosina Montagem: com glicerina, goma arábica, gelatina ou resinas naturais (bálsamo do Canadá, óleo de cedro), semi-sintéticas ou sintéticas (lamínula) TÉCNICA HISTOLÓGICA TÉCNICA HISTOLÓGICA
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